解整合素-金屬蛋白酶12-S在孕婦早期異位妊娠診斷中的價(jià)值

程錦梅，田祥學(xué)，饒永紅，李坤

（1.黃岡市婦幼保健院藥械科，湖北黃岡438000；2.黃岡市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)中心化學(xué)科，湖北黃岡438000；3.黃岡市婦幼保健院婦科，湖北黃岡438000；4.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東濟(jì)南250031）

解整合素-金屬蛋白酶12-S在孕婦早期異位妊娠診斷中的價(jià)值

程錦梅1，田祥學(xué)2，饒永紅3，李坤4

（1.黃岡市婦幼保健院藥械科，湖北黃岡438000；2.黃岡市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)中心化學(xué)科，湖北黃岡438000；3.黃岡市婦幼保健院婦科，湖北黃岡438000；4.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東濟(jì)南250031）

目的通過(guò)檢測(cè)孕婦早期血清中解整合素-金屬蛋白酶12-S(a disintegrin and metalloprotease 12，ADAM12-S）水平及變化趨勢(shì)，探討解整合素-金屬蛋白酶12-S在孕婦早期異位妊娠診斷中的價(jià)值。方法選取黃岡市婦幼保健院就診的早孕期婦女(孕5～10周）150例，其中正常妊娠102例，異位妊娠48例，留取其血清，利用時(shí)間分辨熒光免疫分析法檢測(cè)血清中解整合素-金屬蛋白酶12-S值。結(jié)果102例正常妊娠組孕婦血清中ADAM12-S值隨孕周呈線性穩(wěn)定增長(zhǎng)，相關(guān)系數(shù)r=0.9217(P＜0.05）；48例異位妊娠組孕婦血清中ADAM12-S值明顯低于正常妊娠組且隨孕周未呈線性穩(wěn)定增長(zhǎng)，相關(guān)系數(shù)r=0.2817；異位妊娠組各孕周的中位數(shù)倍數(shù)明顯低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。結(jié)論ADAM12-S在早孕正常妊娠中數(shù)值穩(wěn)定，而在異常妊娠中數(shù)值低，在孕婦早期異位妊娠診斷中具有重要價(jià)值。

解整合素-金屬蛋白酶12；孕婦早期；異位妊娠

異位妊娠（ectopic pregnancy，EP），也稱為宮外孕和子宮外孕，是指孕卵在子宮腔以外的其他部位著床并發(fā)育的異常妊娠過(guò)程［1-2］。異位妊娠為一種常見的臨床婦科疾病，多發(fā)生在受精卵停留并著床于輸卵管，也有受精卵停留并著床于其他部位情況發(fā)生，如卵巢、子宮頸和腹部。異位妊娠經(jīng)常會(huì)引起嚴(yán)重并發(fā)癥，影響患者生育功能甚至威脅患者生命。解整合素-金屬蛋白酶12（a disintegrin and metalloprotease 12，ADAM12）也稱為融合素2α（meltrin-α），為ADAM家族成員之一，是一種與組織生長(zhǎng)以及發(fā)育相關(guān)的蛋白［3］。ADAM12表達(dá)形式有2種，分別為ADAM12-L（長(zhǎng)鏈）和ADAM12-S（短鏈）。Spencer等人［4］研究發(fā)現(xiàn)孕婦早期血清中ADAM12-S的濃度伴隨孕周增加而明顯升高，Laigaard等人［5］研究發(fā)現(xiàn)ADAM12-S濃度在孕18三體以及21三體孕婦早期血清中顯著降低。ADAM12-S可能在胎盤生長(zhǎng)中具有重要功能［6］。本研究采用時(shí)間分辨熒光檢測(cè)法測(cè)定孕婦早期血清中ADAM12-S水平，探討ADAM12-S在孕婦早期異位妊娠診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月～2013年8月黃岡市婦幼保健院收治的妊娠孕婦150例，其中異位妊娠孕婦48例，約為5～10孕周，平均年齡（28.3±5.2）歲，平均孕次（1.9±0.5）次，平均產(chǎn)次（1.5±0.8）次，孕婦體質(zhì)量42～74 kg，正常單胎妊娠孕婦（對(duì)照組）102例，經(jīng)超聲確定孕周均為5～10周，平均年齡（27.8± 4.8）歲，平均孕次（2.1±0.2）次，平均產(chǎn)次（1.7±0.5）次，孕婦體質(zhì)量44～74 kg。2組孕婦在年齡、孕次、產(chǎn)次、孕周等方面比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)檢查均未發(fā)現(xiàn)不適宜妊娠的內(nèi)外科合并癥。2組孕婦均簽訂試驗(yàn)知情同意書，該實(shí)驗(yàn)得到本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集與檢測(cè)：分別收集異位妊娠孕婦和對(duì)照組孕婦空腹肘靜脈血約3mL于不含有抗凝劑的采血管中，將其于室溫靜置30min后離心20min（3000 r/min）。分離血清并將其置于-80℃冰箱保存待用。采用時(shí)間分辨熒光免疫分析法（TRFIA）檢測(cè)血清中ADAM12-S水平。

1.2.2 儀器：Victor TM1420型時(shí)間分辨熒光檢測(cè)儀；時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒來(lái)自芬蘭Perkin Elmer公司；計(jì)算軟件為L(zhǎng)ifecycle 3.0。所有步驟均嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件以及Microsoft Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，2個(gè)變量之間的相關(guān)程度用皮爾森相關(guān)系數(shù)r表示，非參數(shù)檢驗(yàn)兩獨(dú)立樣本的中位數(shù)及相關(guān)性；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組孕婦早期不同孕周血清中ADAM12-S水平 正常妊娠組和異常妊娠組孕婦早期各孕周血清中ADAM12-S的水平（見表1）。對(duì)照組孕婦早期血清中ADAM12-S的水平伴隨孕周的增加而升高，并且2者具有明顯的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r為0.921 7（P＜0.05，見圖1）；異位妊娠孕婦各孕期血清中ADAM12-S的水平一直處于較低水平，伴隨孕周的增加ADAM12-S的水平無(wú)顯著變化。異位妊娠孕婦各孕期血清中ADAM12-S的水平與孕周沒(méi)有線性關(guān)系（見圖2）。

表1 對(duì)照組與異位妊娠組孕婦早期各孕周血清中ADAM12-S水平（μg/L）Tab.1 Serum ADAM12-S levels of different gestationalage in normal pregnancy group and ectopic pregnancy group（μg/L）

圖1 正常妊娠組組孕婦早期血清中ADAM12-S水平與孕周關(guān)系Fig.1 Correlation of themedian ofmaternal serum ADAM12-Swith gestationalweeks in normal pregnancy group

圖2 異位妊娠組孕婦早期血清中ADAM12-S水平與孕周關(guān)系Fig.2 Correlation of themedian ofmaternal serum ADAM12-Swith gestationalweeks in ectopic pregnancy

2.2 孕婦早期血清中ADAM12-S的水平與異位妊娠的關(guān)系 對(duì)2組孕婦早期血清中的ADAM12-S的中位數(shù)倍數(shù)（MOMS）經(jīng)非參數(shù)檢驗(yàn)，正常妊娠組軼均值為9.50，異位妊娠軼均值為3.50；異位妊娠孕婦早期血清中的ADAM12-S的中位數(shù)倍數(shù)（MOMS）低于正常妊娠組孕婦MOMS，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.004，見表2）。

表2 各孕周孕婦血清中ADAM12-SMOMS值Tab.2 The values ofmaternal serum ADAM12-SMOMS at different gestationalweeks

3 討論

早在11世紀(jì)，阿拉伯一位醫(yī)生將胎兒骨骼從患者臍部化膿性竇道中拉出，第一次提出異位妊娠概念［7］。異位妊娠，也稱為宮外孕和子宮外孕，是指孕卵在子宮腔以外的其他部位著床并發(fā)育的異常妊娠過(guò)程［1-2］。異位妊娠為一種常見的臨床婦科疾病，此種疾病也是引起孕婦、產(chǎn)婦死亡的主要疾病之一［8-9］。根據(jù)孕卵的著床部位不同，異位妊娠可分為卵巢妊娠、輸卵管妊娠、腹腔妊娠、子宮殘角妊娠和宮頸妊娠等，異位妊娠情況多發(fā)生在受精卵停留并著床于輸卵管，占90%以上［10-11］。異位妊娠發(fā)病與宮內(nèi)節(jié)育器放置、輸卵管手術(shù)、輸卵管功能異常或發(fā)育不良以及輸卵管炎癥等有關(guān)［12-13］。當(dāng)異位妊娠部位發(fā)生破裂時(shí)，可引發(fā)出血和感染等嚴(yán)重并發(fā)癥［14-15］，如果不能給予患者有效的診斷和治療，可危及其生命，影響其預(yù)后［16-17］。

近年來(lái)，由于許多相關(guān)因素，異位妊娠的發(fā)病率明顯增加，并成為孕婦早期前3個(gè)月孕產(chǎn)婦死亡的第2大常見原因［18-19］。美國(guó)異位妊娠在最近20年增加了6倍，英國(guó)異位妊娠增加了4倍［20］。據(jù)報(bào)道尼日利亞異位妊娠發(fā)病率為1.74%，發(fā)展中國(guó)家異位妊娠孕產(chǎn)婦死亡率高達(dá)9%～14%［21-22］。

對(duì)于典型的異位妊娠病例診斷并不困難，但是孕婦早期異位妊娠的臨床癥狀不典型，為診斷帶來(lái)較大困難。孕婦早期對(duì)于異位妊娠的診斷方法包括診斷性刮宮、腹腔鏡探查、陰道超聲檢查等?；颊哐鍢?biāo)志物的檢測(cè)也是常用的預(yù)測(cè)辦法，目前被使用的生化指標(biāo)包括血漿孕激素以及人絨毛膜促性腺激素（B-HCG）等［23］。對(duì)于這些生化指標(biāo)的檢測(cè)需要多次測(cè)定以及動(dòng)態(tài)觀察，其對(duì)異位妊娠的診斷、預(yù)測(cè)并發(fā)癥以及治療方案選擇等方面尚存在欠缺，因此尋找其他檢測(cè)指標(biāo)的任務(wù)十分緊迫。

解整合素-金屬蛋白酶12，是最近新發(fā)現(xiàn)的與妊娠相關(guān)的一種標(biāo)記物。ADAM12為ADAM家族（一類錨定于細(xì)胞膜表面的多功能分泌型糖蛋白）成員之一，是一種與組織生長(zhǎng)以及發(fā)育相關(guān)的蛋白，其表達(dá)形式有2種，分別為ADAM12-L（長(zhǎng)鏈）和ADAM12-S（短鏈）［24］。1995年，鼠ADAM12被Yagami等［25］首次報(bào)道。1998年，Gilpin等［26］鑒定以及克隆了人ADAM12。2003年，Laigaard等［27］將ADAM12用于產(chǎn)前篩查。ADAM12-S參與調(diào)節(jié)細(xì)胞粘連、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白水解以及細(xì)胞融合等一系列過(guò)程，結(jié)合并參與胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3（insulin-like growth factor binding protein-3，IGFBP-3）和IGFBP-5的分解，從而影響IGF的生物利用度［28］。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)ADAM12進(jìn)行初步研究。ADAM12-S在胎盤的生長(zhǎng)以及功能中具有重要作用，并且與非整倍體異常以及妊娠相關(guān)的疾?。▽m內(nèi)生長(zhǎng)遲緩、妊娠高血壓疾病和胚胎停育等）存在密切聯(lián)系［6］。研究表明ADAM12-S與多種胎兒發(fā)育異常相關(guān)聯(lián)，如先兆子癇、胎兒染色體異常以及宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩等［29］。在胎盤組織中檢測(cè)到ADAM12-S的mRNA，使用Western印跡法無(wú)法在非孕婦女血清中檢測(cè)到ADAM12-S［30］。Spencer等［4］研究發(fā)現(xiàn)孕婦早期血清中ADAM12-S的濃度伴隨孕周增加而明顯升高，Laigaard等［5］研究發(fā)現(xiàn)ADAM12-S濃度在孕18三體以及21三體孕婦早期血清中顯著降低。本組資料檢測(cè)了孕婦早期對(duì)照組以及異位妊娠2組孕婦血清中ADAM12-S的水平，結(jié)果顯示102例正常妊娠組各孕周孕婦血清中ADAM12-S水平隨孕周呈線性穩(wěn)定增長(zhǎng)；48例異位妊娠組孕婦血清中的ADAM12水平明顯低于正常妊娠組且隨孕周未呈線性穩(wěn)定增長(zhǎng)。異位妊娠組各孕周的中位數(shù)倍數(shù)明顯低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。異位妊娠可能會(huì)引起絨毛組織發(fā)育不良，造成滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)于ADAM12-S的分泌減少，繼而導(dǎo)致異位妊娠孕婦血清中的ADAM12-S水平降低。

綜上所述，ADAM12-S具有獨(dú)特的妊娠特異性，在孕婦早期異位妊娠診斷中具有重要價(jià)值。檢測(cè)孕婦早期孕婦血清中ADAM12-S水平可以幫助臨床提早預(yù)測(cè)異位妊娠，提前做好應(yīng)對(duì)措施。

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（編校：王儼儼）

Value of ADAM 12-S in early diagnosis of ectopic pregnancy of pregnant women

CHENG Jin-mei1，TIAN Xiang-xue2，RAO Yong-hong3，LIKun4

（1.Department of Medical Device，Huanggang Women&Children's Healthcare Hospital，Huanggang 438000，China；2.Department of Subject，Huanggang Center for Food and Drug Control，Huanggang 438000，China；3.Department of Gynaecology，Huanggang Women &Children's Healthcare Hospital，Huanggang 438000，China；4.Obstetrics and Gynecology，Affiliated Hospital of Shandong Provincial Academy of Medical Sciences，Ji'nan 250031，China）

ObjectiveTo determine the values and variation tendency of a disintegrin and metalloprotease 12-S（ADAM12-S）of early pregnancy，and discuss the value of ADAM12-S to the ectopic pregnancy in the first trimester.Methods150 early pregnancy cases（from the 5th to 10th week of pregnancy）were selected in Huanggang Women&Children's Healthcare Hospital.There were 102 cases of normal pregnancy，48 cases of ectopic pregnancy.The AutoDELFIA immunoassay platform was used tomeasure the value of ADAM12-S in the serum.ResultsOf the 102 normal pregnancies，the values of ADAM12-S in 5th-10th week of pregnancy linearly increase with gestationalage.The correlation coefficientwas0.9217（P＜0.05）.While the values of ADAM12-S in the ectopic pregnancy group were significantly lower than the normal pregnancy group and not linearly increased with gestationalage.The correlation coefficientwas 0.2817.There was statistically significant difference between the two groups（P＜0.05）.ConclusionThe values of ADAM12-S is stable in the first trimester of normal pregnancy，while it is much more lower in abnormal pregnancy.ADAM12-S has great significance in the diagnosis of ectopic pregnancy of the first trimester.

a disintegrin and metalloprotease 12-S；first-trimester；ectopic pregnancy

R714.22

A

1005-1678(2014）07-0161-04

山東省自然科學(xué)基金課題項(xiàng)目（ZR2009CL027）；濟(jì)南市科技局科技明星計(jì)劃課題項(xiàng)目（20100118）；山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)基金課題項(xiàng)目（201023）

程錦梅，女，本科，副主任藥師，研究方向：醫(yī)院藥學(xué)，E-mail：qch1821460027@163.com。