丹參注射液對病毒性心肌炎的療效及其抗氧自由基的作用

馮輝，陳相健

（1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，河南新鄉(xiāng)453100；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科，江蘇南京210029）

丹參注射液對病毒性心肌炎的療效及其抗氧自由基的作用

馮輝1，陳相健2

（1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，河南新鄉(xiāng)453100；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科，江蘇南京210029）

目的觀察丹參注射液對病毒性心肌炎的療效及其抗氧自由基的作用。方法選擇72例病毒性心肌炎患者，隨機(jī)分為2組，傳統(tǒng)組及丹參組。傳統(tǒng)組采用能量合劑，1.6-二磷酸果糖改善心肌營養(yǎng)，臥床休息，重癥用糖皮質(zhì)激素，心律失常選用相應(yīng)治療；丹參組加用丹參注射液按每次5～15mL，溶于5%葡萄糖中靜滴，每天1次，2周為一療程。觀察2組臨床表現(xiàn)、心肌酶譜的改變，前后對比觀察其療效。通過檢測2組血清中超氧化物歧化酶(SOD）、丙二醛(MDA）等指標(biāo)以了解丹參注射液的抗氧化作用。以36例健康者作對照組，檢測3組血清中心肌肌鈣蛋白(cTnT）、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP）、肌酸激酶同工酶(CK-MB）和超氧化物歧化酶(SOD），評價其相關(guān)性。結(jié)果病毒性心肌炎組患者SOD的活性與健康組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01）。治療后SOD的活性明顯升高(P＜0.01）。SOD與cTnT、hs-CRP和CK-MB水平呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05）。丹參組臨床療效顯著高于傳統(tǒng)組(P＜0.05），治療后患者心肌肌鈣蛋白(cTnT）、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP）、肌酸激酶同工酶(CK-MB）水平顯著降低(P＜0.05）且低于傳統(tǒng)組治療后；SOD活性顯著高于傳統(tǒng)組(P＜0.01）；MDA下降程度比傳統(tǒng)組顯著(P＜0.05）。結(jié)論氧自由基可能參與了病毒性心肌炎的發(fā)病過程，采用丹參注射液治療病毒性心肌炎臨床療效滿意，抗氧化作用可能是丹參注射液治療病毒性心肌炎的重要機(jī)制之一。

丹參注射液；病毒性心肌炎；氧自由基

病毒性心肌炎（viralmyocarditis，VMC）是常見病之一，其中柯薩奇病毒、?？刹《?、脊髓灰質(zhì)炎病毒、腺病毒、流感病毒等均可引起病毒性心肌炎，其發(fā)病機(jī)制是病毒侵犯心肌引起機(jī)體免疫反應(yīng)，導(dǎo)致心肌細(xì)胞受損，心肌收縮力下降，可引起各種類型的心律失常，局部以及全部心肌炎癥。大多數(shù)預(yù)后良好，少數(shù)可發(fā)生心力衰竭，心源性休克甚至猝死［1］。近年來國內(nèi)發(fā)病有增多趨勢。心肌炎的臨床表現(xiàn)多種多樣，輕重懸殊，輕者可無特殊癥狀，重者暴發(fā)急性心源性休克或心力衰竭而猝死，給臨床診斷帶來一定困難，但確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。病毒性心肌炎是病毒與機(jī)體相互作用的復(fù)雜過程，研究病毒性心肌炎的發(fā)病過程及其機(jī)制，可以有效控制病毒性心肌炎的發(fā)生和發(fā)展。研究認(rèn)為VMC是一個多因素參與的復(fù)雜過程［2］，包括病毒感染對心肌的損害、細(xì)胞免疫、自由基的作用以及多種細(xì)胞因子等介導(dǎo)的心肌損害和微血管損傷［3-5］。近年來隨著自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)對自身免疫性疾病的進(jìn)一步研究，病毒性心肌炎的氧自由基損傷已成為一個研究熱點(diǎn)。國內(nèi)外多項(xiàng)研究已證實(shí)氧自由基（oxygen free radicals，OFR）對心血管系統(tǒng)的損害［6-7］，OFR參與了心肌炎、心力衰竭、克山病和冠心病等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展過程［8］，尤其在病毒性心肌炎（VMC）的過氧化損害中起重要作用［9-13］。OFR可作用于生物膜中多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，損傷細(xì)胞膜，導(dǎo)致心力衰竭。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 選擇2010年3月至2014年2月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病毒性心肌炎組（VMC）住院患者72例，均符合VMC診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］，并排除其他疾病，其中男40例，女32例；隨機(jī)分為觀察組和傳統(tǒng)組各36例，2組性別、身高、體重、病情的嚴(yán)重程度經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，無顯著性差異，具有可比性。

1.2 健康對照組 隨機(jī)選取36例健康者作對照組，近期無感染史及其他過敏史。其中男20例，女16例。

1.3 藥物與試劑 丹參注射液（四川升和藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z51021303）；丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。cTnT試劑盒由上海泛柯生物科技有限公司生產(chǎn)，編號：FKD1147B；HS-CRP（批號20060125）、CK-MB試劑盒（批號2007620），由上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)。

1.4 藥物干預(yù)及實(shí)驗(yàn)分組 本研究程序符合人體實(shí)驗(yàn)倫理標(biāo)準(zhǔn)，所有患者家屬均需簽署知情同意書。傳統(tǒng)組采用能量合劑，1.6-二磷酸果糖改善心肌營養(yǎng)，臥床休息，重癥用糖皮質(zhì)激素，心律失常選用相應(yīng)治療；丹參組加用丹參注射液按每次5～15mL，溶于5%葡萄糖中靜滴，每天1次，2周為1療程。

1.5 療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 在用藥前和用藥后對2組患者記錄臨床表現(xiàn)、心電圖及心肌酶譜的改變，前后對比觀察其療效。通過檢測治療組和對照組血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等指標(biāo)以了解丹參注射液的抗氧化作用。顯效：臨床癥狀及體征消失，心電圖及心肌酶譜等輔助檢查結(jié)果基本正常；有效：臨床癥狀及體征明顯好轉(zhuǎn)，心電圖及心肌酶譜等輔助檢查結(jié)果好轉(zhuǎn)；無效：臨床癥狀體征、心電圖及心肌酶譜等改善不明顯或無改善。

1.6 標(biāo)本收集 2組患者均于當(dāng)天或次天早晨6：30～7：00空腹抽取靜血4mL，分離血清，當(dāng)天內(nèi)完成血清心肌酶譜各項(xiàng)目的檢測；治療后2周采取第2次血標(biāo)本，每份血清標(biāo)本離心1 500 r/min，15min，取血清，-70℃凍存?zhèn)溆?；同時提取紅細(xì)胞，立即檢測SOD含量。

1.7 測定方法 cTnT測定采用快速診斷金標(biāo)板，檢測方法是免疫金標(biāo)法；hs-CRP采用散射比濁法，CK-MB采用酶抑制法［14］；采用鄰苯三酚自氧化抑制比色分析法測定SOD含量［15］，檢測血清中心肌肌鈣蛋白（cTnT）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和超氧化物歧化酶（SOD），評價其相關(guān)性。硫代巴比妥酸（TBA）法檢測MDA活性。

2 結(jié)果

2.1 丹參組與正常對照組SOD值比較 丹參組治療前SOD值明顯低于對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t1=11.30，P＜0.01）。治療后SOD與對照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療前SOD值明顯低于治療后SOD值，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t2=12.40，P＜0.01，見表1）。

表1 丹參組患者治療前后SOD值和對照組SOD值比較Tab.1 Salviamiltiorrhiza group before and after treatment in patients with SOD value and SOD values of the control group comparison

2.2 丹參組患者SOD、cTnT、hs-CRP、CK-MB之間的相關(guān)關(guān)系比較 丹參組患者SOD與cTnT、hs-CRP、CK-MB均呈弱負(fù)相關(guān)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見表2）。

表2 丹參組患者SOD、cTnT、hs-CRP、CK-MB的相關(guān)性分析Tab.2 Correlation analysis of SOD，cTnT，hs-CRP，CK-MB in patients of salviamiltiorrhiza group

2.3 丹參組和傳統(tǒng)組療效比較 丹參組給予丹參注射液治療后，臨床療效明顯好轉(zhuǎn)，丹參組與傳統(tǒng)組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表3）。

表3 丹參組和傳統(tǒng)組臨床療效比較Tab.3 Comparison of the clinical efficacy between salviamiltiorrhiza group and the traditional group

2.4 丹參組和傳統(tǒng)組治療前后丹參組和傳統(tǒng)組心肌酶譜的改變 2組患者治療前血清cTnT、hs-CRP、CK-MB值比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療后2組血清cTnT、hs-CRP、CK-MB值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表4）。

表4 治療前后丹參組和傳統(tǒng)組心肌酶譜的改變Tab.4 Mgocardial enzyme changes of salviamiltiorrhiza group and the traditional group before and after treatment

2.5 抗氧化治療的效果比較 治療后丹參組SOD活性上顯著于傳統(tǒng)組（P＜0.01）；MDA下降程度比傳統(tǒng)組顯著（P＜0.05，見表5）。

表5 2組VMC患者生化指標(biāo)治療前后差值比較Tab.5 Comparison of difference of biochemical in dexes in VMC patients before and after treatment between two groups

3 討論

3.1 VMC患者SOD與cTnT、hs-CRP、CK-MB之間的相關(guān)性 cTnT、hs-CRP、CK-MB為VMC特異性標(biāo)志物，其敏感性和特異性均較高［4-6］。cTnT為心肌所特有，能檢測出微小損傷；hs-CRP用于心血管疾病危險性評估，hs-CRP以微量形式存在于健康人血清中，正常值＜3 mg/L，機(jī)體在急性炎癥、創(chuàng)傷和心肌梗死時此蛋白會升高，是心血管炎癥檢測指標(biāo)；CK-MB是心肌損傷早期標(biāo)志物，其檢測快速、經(jīng)濟(jì)、有效。3種標(biāo)志物成為當(dāng)今應(yīng)用最廣的心肌損傷標(biāo)志物，心肌損傷時均增高。VMC時SOD下降。本研究顯示，實(shí)驗(yàn)組SOD的活性與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。治療3周后cTnT、hs-CRP和CK-MB水平明顯降低（P＜0.05）；SOD的活性明顯升高（P＜0.01），與cTnT、hs-CRP和CK-MB水平呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。

通過本研究表明VMC患者SOD明顯降低，為分析病毒性心肌炎病情及疾病早期的干預(yù)和治療提供了科學(xué)的理論依據(jù)。

3.2 抗氧化劑在VMC中的作用 近年臨床治療VMC的抗氧化劑主要包括維生素C、維生素E、丹參、黃芪及其提取物［9-10］和輔酶Q10［11］等，其中維生素C應(yīng)用最為廣泛，它作為一種還原劑在體內(nèi)高濃度時能清除自由基，對心肌線粒體有保護(hù)作用，即保護(hù)作用是在大劑量維生素C治療的前提上完成的。丹參與維生素C均有抑制MDA生成、增強(qiáng)抗氧化作用。丹參的主要成分為丹參酮ⅡA，有廣泛的藥理作用：①可促進(jìn)心肌細(xì)胞再生，保護(hù)心臟損傷［12］；②抗自由基損傷，可抑制家兔心肌缺血再灌注時缺血的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對過氧化氫/亞鐵離子體系產(chǎn)生的OH-和黃嘌呤氧化酶體系產(chǎn)生的O2-有明顯清除作用，丹參酮ⅡA磺酸鈉可清除鄰苯二酚體系在堿性條件下產(chǎn)生O-［13］；并能提高抗氧化酶的活性，降低心肌過氧化脂質(zhì)含量，有效清除體內(nèi)氧自由基；③對細(xì)胞免疫有抑制作用［14］；基于上述藥理基礎(chǔ)，丹參注射液可用于VMC。孟祥春等報道用丹參注射液治療VMC，通過拮抗氧自由基，并配合VitC治療，其療效比單純應(yīng)用VitC更佳，說明丹參注射液對心肌有良好的保護(hù)作用［15］。研究也證實(shí)，丹參素是丹參水溶性的有效成分，它能直接刺激損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌前列環(huán)素，清除自由基損傷導(dǎo)致的嚴(yán)重微循環(huán)障礙，擴(kuò)張冠脈，增加血流量，減慢心率，促進(jìn)損傷心肌恢復(fù)。本研究表明：丹參組臨床臨床療效明顯好于傳統(tǒng)組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；抗氧化治療的效果比較，丹參組SOD活性顯著高于傳統(tǒng)組（P＜0.01）；MDA下降程度比傳統(tǒng)組顯著（P＜0.05）?？寡趸饔每赡苁堑⒆⑸湟褐委煵《拘孕募⊙椎闹匾獧C(jī)制之一。

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（編校：譚玲）

Efficacy of salvia m iltiorrhiza injection on viralmyocarditis and its effect of antioxygen free radicals

FENG Hui1，CHEN Xiang-jian2

（1.Department of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine，The First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University，Xinxiang 453100，China；2.Department of Cardiology，The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210029，China）

ObjectiveTo observe the effect of salvia miltiorrhiza injection on antioxygen free radicals and its efficacy on viral myocarditis.Methods72 cases of patientswith viralmyocarditiswere randomly divided into two groups.The traditional group with energymixture，1.6-diphosphate fructose improvingmyocardial nutrition，bed rest，intensive use of glucocorticoid，selected the appropriate treatment for arrhythmia；salvia miltiorrhiza group in the control group treatment combined with salviamiltiorrhiza injection of5～15mL each time，dissolved in 5%glucose intravenous drip，once a day，2 weeks as a course of treatment.To observe two groups ofmanifestation，the change ofmyocardialenzyme spectrum and the comparative efficacy before and after the treatment.Through the detection of the treatment group and the control group of serum superoxide dismutase（SOD），malondialdehyde（MDA）and other indicators to understand the antioxidanteffectof salviamiltiorrhiza injection.36 healthy children were taken as control group，detected cardiac troponin（cTnT），high sensitive C reactive protein（hs-CRP），creatine kinase isoenzyme MB（CK-MB）and SOD in three groups，their correlations were evaluated as well.ResultsCompared with healthy children，the activity of SOD in salvia miltiorrhiza group was statistically significant（P＜0.01）.The activity of SOD increased significantly（P＜0.01）.SOD was negatively correlated with cTnT，hs-CRP and CKMB levels（P＜0.05）.The curative effectof salviamiltiorrhiza group were significantly higher than thatof the control group.CTnT，hs-CRP and CK-MB levels decreased significantly after treatment（P＜0.05），which in salvia miltiorrhiza group decreased significantly than that of the control group.SOD activity increased value was higher than the traditional group（P＜0.01）；the decrease in MDA was obvious than that of the traditional group（P＜0.05）.ConclusionOxygen free radicals are involved in the pathogenesis of viralmyocarditis；the efficacy of salviamiltiorrhiza injection in the treatment of viralmyocarditis is proved of curative effect；antioxidant effectmay be an importantmechanism of salviamiltirrhiza injection in the treatment of viral myocarditis.

salviamiltirrhiza；viralmyocarditis；oxygen free radicals

馮輝，男，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：中西醫(yī)心血管疾病的內(nèi)科治療，E-mail：qch1821460044@163.com。

R542.21

A

1005-1678(2014）07-0081-03

國家自然科學(xué)基金（81170220）