老年子宮內(nèi)膜樣癌患者術(shù)后組織神經(jīng)纖毛蛋白1、2和鋅指E-盒結(jié)合同源異形盒-1的表達(dá)及意義

王琰琰

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧 錦州 121001)

腫瘤發(fā)展過程中常伴有明顯的侵襲和播散。神經(jīng)纖毛蛋白(NRP)1和2作為內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體，不僅可以促進(jìn)癌變，還可能與腫瘤的生長(zhǎng)進(jìn)程相關(guān)〔1,2〕。轉(zhuǎn)錄因子鋅指E-盒結(jié)合同源異形盒(ZEB)-1在正常組織中的表達(dá)常較微弱，而當(dāng)形成腫瘤性增生后，常常出現(xiàn)較強(qiáng)的表達(dá)，其可能與腫瘤性增殖有關(guān)〔3〕。本文旨在檢測(cè)老年子宮內(nèi)膜樣癌患者癌組織中NRP1、2和ZEB-1的表達(dá)及相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1臨床資料 我院行手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜樣癌老年患者145例為研究組，均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的標(biāo)準(zhǔn)，并再次經(jīng)病理科主治醫(yī)師確診。年齡60～78歲，平均63.7歲。術(shù)前均未進(jìn)行任何放療和化療。選取行子宮肌瘤術(shù)后證實(shí)為正常子宮內(nèi)膜組織90例為對(duì)照組，年齡60～77歲，平均63.1歲。兩組一般臨床特征無差別(P<0.05)。

1.2NRP1、2和ZEB-1蛋白的表達(dá) 選擇NRP1和ZEB-1的濃縮液(購(gòu)自武漢博士德生物工程公司)，在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最理想的配比濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。NRP1和ZEB-1的正式實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化SP法，應(yīng)用DAB染色。均設(shè)陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3NRP1、2和ZEB-1蛋白表達(dá)的判定 NRP1和2均以在細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜上形成棕黃的顆粒為陽性細(xì)胞，ZEB-1以細(xì)胞核上形成棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，NRP1、2和ZEB-1均計(jì)數(shù)6個(gè)400倍視野的細(xì)胞總數(shù)，計(jì)算陽性率。NRP1、2和ZEB-1均以陽性率≥25%為陽性，以<25%為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組NRP1、2和ZEB-1陽性表達(dá)比較 研究組NRP1、2和ZEB-1陽性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.000 1)。見表1。

2.2研究組NRP1、2和ZEB-1與臨床特征的關(guān)系 研究組NRP1、2和ZEB-1的表達(dá)均與腫瘤的TNM分期、浸潤(rùn)深度、脈管累犯和Ki67指數(shù)密切相關(guān)(P均<0.05)。見表2。

2.3研究組NRP1、2和ZEB-1相關(guān)性分析 研究組NRP1和2(r=0.47,P=0.041 3)、NRP1和ZEB-1(r=0.47,P=0.029 7)、NRP2和ZEB-1(r=0.46,P=0.025 1)均具有正相關(guān)性。

表1 兩組NRP1、2和ZEB-1陽性率的比較〔n(%)〕

表2 研究組NRP1、2和ZEB-1與臨床特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討 論

子宮內(nèi)膜癌在老年人中多見，常表現(xiàn)為侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在腫瘤形成過程中，間質(zhì)的血管豐富。研究認(rèn)為其進(jìn)展時(shí)多種基因和蛋白表達(dá)失?！?,5〕。NRP1、2是一種跨膜糖蛋白，最初是作為軸突導(dǎo)向分子Semaphorin的受體而發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)細(xì)胞導(dǎo)向、軸突生長(zhǎng)方面發(fā)揮重要作用〔6〕。研究顯示非神經(jīng)源性組織中NRP1、2的表達(dá)很低，但是當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)不典型增生或癌變時(shí)，其表達(dá)明顯升高，尤其高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞中〔7,8〕。龔宇等〔9〕通過研究NRP1對(duì)喉癌HEP2細(xì)胞的增殖特點(diǎn)后認(rèn)為，NRP1可以在腫瘤血管生成中起重要促進(jìn)作用，其對(duì)癌細(xì)胞自身增殖和遷移有明顯影響，并認(rèn)為有效拮抗NRP1可能成為腫瘤治療的新途徑。也有學(xué)者認(rèn)為NRP1在作用過程中可以減少細(xì)胞凋亡，同時(shí)對(duì)間質(zhì)的血管生成有一定價(jià)值〔10,11〕。ZEB是一類具有鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白，包含2個(gè)成員，即ZEB-1和2，ZEB-2又稱Smad相互作用蛋白，由于都具有相同鋅指結(jié)構(gòu)而能與含有CACCT的盒序列結(jié)合，可以有效調(diào)控靶基因的表達(dá)。目前研究顯示ZEB-1可以和上皮細(xì)胞內(nèi)的鈣結(jié)合蛋白結(jié)合抑制其轉(zhuǎn)錄，有效促進(jìn)上皮和間質(zhì)的轉(zhuǎn)化過程〔12,13〕。研究顯示ZEB-1的表達(dá)具有多樣性，但是重點(diǎn)參與腫瘤邊緣上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過程〔14,15〕，因此腫瘤中ZEB-1表達(dá)增高，但是腫瘤邊緣區(qū)的細(xì)胞表達(dá)尤為強(qiáng)烈，并對(duì)部分間質(zhì)形成一定影響，即間質(zhì)也可以見到ZEB-1的表達(dá)。也有觀點(diǎn)認(rèn)為ZEB-1可能調(diào)控腫瘤進(jìn)展過程中的多項(xiàng)功能，如細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移〔16,17〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示NRP1、2和ZEB-1蛋白可以有效促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。NRP1、2和ZEB-1均為腫瘤的誘導(dǎo)和促進(jìn)蛋白起明顯的作用。NRP1、2和ZEB-1高表達(dá)時(shí)腫瘤處于進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。NRP1和2對(duì)腫瘤的作用是與腫瘤的脈管形成相關(guān)的，而NRP1、2可以針對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行刺激和產(chǎn)生活化作用，使腫瘤間質(zhì)的血管生成更快，腫瘤體積增加的明顯。本實(shí)驗(yàn)提示NRP1、2和ZEB-1三者可以有效地促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增生和繁殖過程，也是腫瘤進(jìn)展中獨(dú)特的作用。NRP1、2和ZEB-1的表達(dá)與腫瘤的預(yù)后相關(guān)，即NRP1、2和ZEB-1高表達(dá)患者的預(yù)后差。NRP1、2對(duì)腫瘤的調(diào)節(jié)作用和ZEB-1對(duì)腫瘤的作用通路不是在一個(gè)水平上，但是三者均與血管生成相關(guān)，因此三者的聯(lián)系可能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子相關(guān)，也可能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體相關(guān)，但是其作用機(jī)制有待更多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

4 參考文獻(xiàn)

1焦勝敏. 喉鱗癌患者術(shù)后組織中神經(jīng)纖毛蛋白1、2的表達(dá)及對(duì)血管生成的作用〔J〕. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2013;33(5):1037-8.

2王璐璐, 吳小翎, 劉 波, 等. 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3和神經(jīng)纖毛蛋白2對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖和凋亡的影響〔J〕. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志, 2012;25(12): 1631-3.

3陳枝嵐, 王 晶, 宋成文, 等. 卵巢上皮性癌中ZEB1的表達(dá)及其臨床意義〔J〕. 中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué), 2013;13(7): 863-4.

4王杏茶, 閻玉梅, 張玉娟. 缺氧誘導(dǎo)因子-1a和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及相關(guān)性〔J〕. 中國(guó)婦幼保健, 2008;23(7): 978-80.

5舒寬勇, 艾小燕, 黃山鷹. 子宮內(nèi)膜癌組織中COX-2表達(dá)、血管生成和細(xì)胞增殖及其相互關(guān)系〔J〕. 中國(guó)婦幼保健, 2007;22(12): 1656-8.

6趙琴月, 黃梅芳, 王紅玲, 等. 大腸腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和神經(jīng)纖毛蛋白-2的表達(dá)〔J〕. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2010;31(3): 352-3.

7陳 潔, 張紅闖, 宋曉萌, 等. NRP1、NRP2及SEMA3F在口腔癌組織及TCa、ACC細(xì)胞系中的表達(dá)及其可能的作用〔J〕. 口腔醫(yī)學(xué), 2009;29(5): 235-7.

8張更琳, 孔維佳. Neuropilin-1在喉癌組織及喉癌細(xì)胞系中的表達(dá)〔J〕. 臨床耳鼻咽喉科雜志, 2006;20(14): 634-6.

9龔 宇, 胡國(guó)華, 湯為學(xué), 等. NRP1對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖侵襲及體外癌細(xì)胞促血管形成的影響〔J〕. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2008;33(12):1479-82.

10連海峰, 吳小翎, 彭 陽. RNA干擾NRP2基因表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞SGC7901裸鼠移植瘤的抑制作用〔J〕. 中國(guó)生物工程雜志,2010;30(7): 28-32.

11毛 東, 付曉光, 陸航. ADV-SHRNA抑制NRP2表達(dá)對(duì)胃癌SGC7901細(xì)胞增殖的影響〔J〕. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2012；32(11):2309-11.

12朱洪旭, 王單松. 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與胰腺癌關(guān)系的研究進(jìn)展〔J〕. 中國(guó)臨床醫(yī)學(xué), 2013;20(3):422-3.

13仲 樓, 史加海, 曹 飛, 等. ZEB1的表達(dá)與肺鱗狀細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕. 吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2012;38(4):761-4.

14夏玉紅, 張占薪, 姚 麗, 等. 宮頸癌組織中ZEB1表達(dá)及其臨床意義〔J〕. 中實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志, 2013;29(7):559-61.

15段春燕, 嚴(yán)冬梅, 劉友平, 等. 轉(zhuǎn)錄因子ZEB1與乙醛刺激后大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的關(guān)系分析〔J〕. 瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2013;36(1):43-5.

16韓 冰, 謝汝佳, 洪 琴, 等. 肝纖維化病理過程中ZEB1和ZEB2的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化及意義〔J〕. 中國(guó)病理生理雜志, 2012；28(9):1639-43.

17吳開杰, 曾 津, 朱國(guó)棟, 等. 兩種不同前列腺癌上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化模型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的比較及意義〔J〕. 中華男科學(xué)雜志, 2010;16(2):137-41.