不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)性成分的GC—MS分析

杜成智　馮旭　王卉等

摘要：比較與分析不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分。采用HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱，程序升溫，以EI離子源和四極桿質(zhì)量分析器進(jìn)行分析，質(zhì)譜圖用NIST02和Wiley275譜庫檢索，鑒定金銀花揮發(fā)油的各種成分，并用色譜峰面積歸一化法測(cè)定各成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果表明：廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出35種化學(xué)成分，主要成分為亞麻酸甲酯、軟脂酸、ζ-依蘭油烯等；湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出18種化學(xué)成分，主要成分為軟脂酸、亞油酸、α-姜黃烯等；可見不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的主要成分存在差異。

關(guān)鍵詞：金銀花；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜；不同產(chǎn)地

中圖分類號(hào)： R284.1；O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）07-0313-03

收稿日期：2013-10-06

基金項(xiàng)目：廣西省自然科學(xué)基金（編號(hào)：2011GXNSFF018006）

作者簡(jiǎn)介：杜成智（1980—），男，廣西賓陽人，碩士，講師，從事藥物分析研究。E-mail：276561774@qq.com。

通信作者：馮旭，男，副教授，研究方向?yàn)橹兴?、天然藥物及其制劑的成分分析。Tel：（0771）-2219877；E-mail：gxnnfx@gmail.com。金銀花（Lonicera Japonica）又名忍冬、金銀藤、銀藤、二色花藤等，為忍冬科（Caprifoliaceae）多年生草本植物金銀花的干燥花蕾，原產(chǎn)于我國(guó)各省，目前在我國(guó)廣西、湖南等地有栽培[1]，其主要化學(xué)成分為綠原酸、異綠原酸、軟脂酸、ζ-依蘭油烯、亞油酸等[2]。金銀花味甘，性寒，具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱、消暑除煩的作用，并具有止血、抗?jié)兊榷喾N藥理作用[3]，可治療暑熱癥、瀉痢、流感、瘡癤腫毒、急慢性扁桃體炎、牙周炎等病。本試驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)廣西、湖南產(chǎn)的金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了分析研究，以期為金銀花揮發(fā)油的開發(fā)利用提供重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

金銀花（產(chǎn)地廣西）購自廣西南寧老百姓大藥房；金銀花（產(chǎn)地湖南）購自廣西南寧康全藥業(yè)有限公司。試驗(yàn)所用的金銀花樣品均被廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室李斌副教授鑒定為忍冬科植物金銀花的干燥花蕾。

1.2儀器與試劑

6890N-5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國(guó)Agilent公司；HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×250 μm×0.25 μm）；G1701DA MSD化學(xué)工作站；揮發(fā)油提取器；LG16-W 離心機(jī)，北京醫(yī)用離心廠；農(nóng)殘級(jí)正己烷，批號(hào)：HA-1721，美國(guó)天地公司）；分析純無水硫酸鈉，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：HW6586701。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1揮發(fā)油的提取參照2010版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄XD的“揮發(fā)油測(cè)定法”甲法[4]，先取適量藥材搗碎，稱取100 g置于2 000 mL圓底燒瓶中，加1 000 mL水振搖均勻，浸泡1 h；連接揮發(fā)油提取器與回流冷凝管，保持回流5 h，冷卻1 h；開啟揮發(fā)油提取器下端活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0線以上5 mm處為止，讀取揮發(fā)油量；將揮發(fā)油用正己烷溶解后，置于冰箱密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2樣品處理取1 mL揮發(fā)油的正己烷溶液于離心管中，加入適量無水硫酸鈉脫水，然后于離心機(jī)中以 1 000 r/min 的速度離心20 min，取上清液為供試品溶液。

1.3.3氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析氣相色譜條件：進(jìn)樣量：1 μL；分流進(jìn)樣，分流比：10 ∶1；載氣：氦氣；流速：1.0 mL/min；柱溫：100～240 ℃。升溫程序：初始溫度100 ℃，保留3 min；以10 ℃/min升溫至150 ℃；再以5 ℃/min升溫至200 ℃，最后以10 ℃/min升溫至240 ℃，保持3 min。

質(zhì)譜條件：電離方式：EI；電子能量：70 eV；接口溫度：250 ℃；離子源溫度：230 ℃；四極桿溫度：150 ℃；倍增電壓：1 482 V；發(fā)射電流：34.6 μA；掃描質(zhì)量范圍：50～550 amu。

2結(jié)果與分析

2.1GC-MS試驗(yàn)結(jié)果

將2個(gè)產(chǎn)地的金銀花所提取的揮發(fā)油分別按照上述試驗(yàn)條件進(jìn)行GC-MS分析，測(cè)得總離子流圖后，結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫（Nist 02和Wiley 275）檢索，同時(shí)用峰面積歸一法確定樣品中各組分的相對(duì)含量。揮發(fā)油總離子流色譜圖見圖1、圖2，其成分分析結(jié)果見表1、表2。

2.2不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的共有成分

通過以上GC-MS總離子流圖分析可見，廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出54個(gè)色譜峰，鑒定出35種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的84.63%。其主要成分有軟脂酸（占揮發(fā)油總量2979%，）、ζ-依蘭油烯（5.33%）、亞麻酸甲酯（451%）等。湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出29個(gè)色譜峰，鑒定出18種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的86.49%。其主要成分有α-姜黃烯（499%）、亞油酸（11.00%）、軟脂酸（3842%）等。在2個(gè)產(chǎn)地金銀花的揮發(fā)油化學(xué)成分中，有13種成分是兩者的共有成分，具體見表3。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：529-536.

[2]畢躍峰，田野，裴姍姍，等. 金銀花化學(xué)成分分析[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：理學(xué)版，2007，39（2）：184-186.

[3]何顯忠，蘭榮德. 金銀花的藥理作用與臨床應(yīng)用[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2004，15（12）：865-867.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：57-58.endprint

摘要：比較與分析不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分。采用HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱，程序升溫，以EI離子源和四極桿質(zhì)量分析器進(jìn)行分析，質(zhì)譜圖用NIST02和Wiley275譜庫檢索，鑒定金銀花揮發(fā)油的各種成分，并用色譜峰面積歸一化法測(cè)定各成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果表明：廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出35種化學(xué)成分，主要成分為亞麻酸甲酯、軟脂酸、ζ-依蘭油烯等；湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出18種化學(xué)成分，主要成分為軟脂酸、亞油酸、α-姜黃烯等；可見不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的主要成分存在差異。

關(guān)鍵詞：金銀花；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜；不同產(chǎn)地

中圖分類號(hào)： R284.1；O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）07-0313-03

收稿日期：2013-10-06

基金項(xiàng)目：廣西省自然科學(xué)基金（編號(hào)：2011GXNSFF018006）

作者簡(jiǎn)介：杜成智（1980—），男，廣西賓陽人，碩士，講師，從事藥物分析研究。E-mail：276561774@qq.com。

通信作者：馮旭，男，副教授，研究方向?yàn)橹兴?、天然藥物及其制劑的成分分析。Tel：（0771）-2219877；E-mail：gxnnfx@gmail.com。金銀花（Lonicera Japonica）又名忍冬、金銀藤、銀藤、二色花藤等，為忍冬科（Caprifoliaceae）多年生草本植物金銀花的干燥花蕾，原產(chǎn)于我國(guó)各省，目前在我國(guó)廣西、湖南等地有栽培[1]，其主要化學(xué)成分為綠原酸、異綠原酸、軟脂酸、ζ-依蘭油烯、亞油酸等[2]。金銀花味甘，性寒，具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱、消暑除煩的作用，并具有止血、抗?jié)兊榷喾N藥理作用[3]，可治療暑熱癥、瀉痢、流感、瘡癤腫毒、急慢性扁桃體炎、牙周炎等病。本試驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)廣西、湖南產(chǎn)的金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了分析研究，以期為金銀花揮發(fā)油的開發(fā)利用提供重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

金銀花（產(chǎn)地廣西）購自廣西南寧老百姓大藥房；金銀花（產(chǎn)地湖南）購自廣西南寧康全藥業(yè)有限公司。試驗(yàn)所用的金銀花樣品均被廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室李斌副教授鑒定為忍冬科植物金銀花的干燥花蕾。

1.2儀器與試劑

6890N-5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國(guó)Agilent公司；HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×250 μm×0.25 μm）；G1701DA MSD化學(xué)工作站；揮發(fā)油提取器；LG16-W 離心機(jī)，北京醫(yī)用離心廠；農(nóng)殘級(jí)正己烷，批號(hào)：HA-1721，美國(guó)天地公司）；分析純無水硫酸鈉，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：HW6586701。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1揮發(fā)油的提取參照2010版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄XD的“揮發(fā)油測(cè)定法”甲法[4]，先取適量藥材搗碎，稱取100 g置于2 000 mL圓底燒瓶中，加1 000 mL水振搖均勻，浸泡1 h；連接揮發(fā)油提取器與回流冷凝管，保持回流5 h，冷卻1 h；開啟揮發(fā)油提取器下端活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0線以上5 mm處為止，讀取揮發(fā)油量；將揮發(fā)油用正己烷溶解后，置于冰箱密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2樣品處理取1 mL揮發(fā)油的正己烷溶液于離心管中，加入適量無水硫酸鈉脫水，然后于離心機(jī)中以 1 000 r/min 的速度離心20 min，取上清液為供試品溶液。

1.3.3氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析氣相色譜條件：進(jìn)樣量：1 μL；分流進(jìn)樣，分流比：10 ∶1；載氣：氦氣；流速：1.0 mL/min；柱溫：100～240 ℃。升溫程序：初始溫度100 ℃，保留3 min；以10 ℃/min升溫至150 ℃；再以5 ℃/min升溫至200 ℃，最后以10 ℃/min升溫至240 ℃，保持3 min。

質(zhì)譜條件：電離方式：EI；電子能量：70 eV；接口溫度：250 ℃；離子源溫度：230 ℃；四極桿溫度：150 ℃；倍增電壓：1 482 V；發(fā)射電流：34.6 μA；掃描質(zhì)量范圍：50～550 amu。

2結(jié)果與分析

2.1GC-MS試驗(yàn)結(jié)果

將2個(gè)產(chǎn)地的金銀花所提取的揮發(fā)油分別按照上述試驗(yàn)條件進(jìn)行GC-MS分析，測(cè)得總離子流圖后，結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫（Nist 02和Wiley 275）檢索，同時(shí)用峰面積歸一法確定樣品中各組分的相對(duì)含量。揮發(fā)油總離子流色譜圖見圖1、圖2，其成分分析結(jié)果見表1、表2。

2.2不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的共有成分

通過以上GC-MS總離子流圖分析可見，廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出54個(gè)色譜峰，鑒定出35種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的84.63%。其主要成分有軟脂酸（占揮發(fā)油總量2979%，）、ζ-依蘭油烯（5.33%）、亞麻酸甲酯（451%）等。湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出29個(gè)色譜峰，鑒定出18種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的86.49%。其主要成分有α-姜黃烯（499%）、亞油酸（11.00%）、軟脂酸（3842%）等。在2個(gè)產(chǎn)地金銀花的揮發(fā)油化學(xué)成分中，有13種成分是兩者的共有成分，具體見表3。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999：529-536.

[2]畢躍峰，田野，裴姍姍，等. 金銀花化學(xué)成分分析[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：理學(xué)版，2007，39（2）：184-186.

[3]何顯忠，蘭榮德. 金銀花的藥理作用與臨床應(yīng)用[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2004，15（12）：865-867.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：57-58.endprint

摘要：比較與分析不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分。采用HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱，程序升溫，以EI離子源和四極桿質(zhì)量分析器進(jìn)行分析，質(zhì)譜圖用NIST02和Wiley275譜庫檢索，鑒定金銀花揮發(fā)油的各種成分，并用色譜峰面積歸一化法測(cè)定各成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果表明：廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出35種化學(xué)成分，主要成分為亞麻酸甲酯、軟脂酸、ζ-依蘭油烯等；湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油中鑒定出18種化學(xué)成分，主要成分為軟脂酸、亞油酸、α-姜黃烯等；可見不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的主要成分存在差異。

關(guān)鍵詞：金銀花；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜；不同產(chǎn)地

中圖分類號(hào)： R284.1；O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）07-0313-03

收稿日期：2013-10-06

基金項(xiàng)目：廣西省自然科學(xué)基金（編號(hào)：2011GXNSFF018006）

作者簡(jiǎn)介：杜成智（1980—），男，廣西賓陽人，碩士，講師，從事藥物分析研究。E-mail：276561774@qq.com。

通信作者：馮旭，男，副教授，研究方向?yàn)橹兴?、天然藥物及其制劑的成分分析。Tel：（0771）-2219877；E-mail：gxnnfx@gmail.com。金銀花（Lonicera Japonica）又名忍冬、金銀藤、銀藤、二色花藤等，為忍冬科（Caprifoliaceae）多年生草本植物金銀花的干燥花蕾，原產(chǎn)于我國(guó)各省，目前在我國(guó)廣西、湖南等地有栽培[1]，其主要化學(xué)成分為綠原酸、異綠原酸、軟脂酸、ζ-依蘭油烯、亞油酸等[2]。金銀花味甘，性寒，具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱、消暑除煩的作用，并具有止血、抗?jié)兊榷喾N藥理作用[3]，可治療暑熱癥、瀉痢、流感、瘡癤腫毒、急慢性扁桃體炎、牙周炎等病。本試驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)廣西、湖南產(chǎn)的金銀花揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了分析研究，以期為金銀花揮發(fā)油的開發(fā)利用提供重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

金銀花（產(chǎn)地廣西）購自廣西南寧老百姓大藥房；金銀花（產(chǎn)地湖南）購自廣西南寧康全藥業(yè)有限公司。試驗(yàn)所用的金銀花樣品均被廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室李斌副教授鑒定為忍冬科植物金銀花的干燥花蕾。

1.2儀器與試劑

6890N-5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國(guó)Agilent公司；HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×250 μm×0.25 μm）；G1701DA MSD化學(xué)工作站；揮發(fā)油提取器；LG16-W 離心機(jī)，北京醫(yī)用離心廠；農(nóng)殘級(jí)正己烷，批號(hào)：HA-1721，美國(guó)天地公司）；分析純無水硫酸鈉，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：HW6586701。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1揮發(fā)油的提取參照2010版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄XD的“揮發(fā)油測(cè)定法”甲法[4]，先取適量藥材搗碎，稱取100 g置于2 000 mL圓底燒瓶中，加1 000 mL水振搖均勻，浸泡1 h；連接揮發(fā)油提取器與回流冷凝管，保持回流5 h，冷卻1 h；開啟揮發(fā)油提取器下端活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0線以上5 mm處為止，讀取揮發(fā)油量；將揮發(fā)油用正己烷溶解后，置于冰箱密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2樣品處理取1 mL揮發(fā)油的正己烷溶液于離心管中，加入適量無水硫酸鈉脫水，然后于離心機(jī)中以 1 000 r/min 的速度離心20 min，取上清液為供試品溶液。

1.3.3氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析氣相色譜條件：進(jìn)樣量：1 μL；分流進(jìn)樣，分流比：10 ∶1；載氣：氦氣；流速：1.0 mL/min；柱溫：100～240 ℃。升溫程序：初始溫度100 ℃，保留3 min；以10 ℃/min升溫至150 ℃；再以5 ℃/min升溫至200 ℃，最后以10 ℃/min升溫至240 ℃，保持3 min。

質(zhì)譜條件：電離方式：EI；電子能量：70 eV；接口溫度：250 ℃；離子源溫度：230 ℃；四極桿溫度：150 ℃；倍增電壓：1 482 V；發(fā)射電流：34.6 μA；掃描質(zhì)量范圍：50～550 amu。

2結(jié)果與分析

2.1GC-MS試驗(yàn)結(jié)果

將2個(gè)產(chǎn)地的金銀花所提取的揮發(fā)油分別按照上述試驗(yàn)條件進(jìn)行GC-MS分析，測(cè)得總離子流圖后，結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫（Nist 02和Wiley 275）檢索，同時(shí)用峰面積歸一法確定樣品中各組分的相對(duì)含量。揮發(fā)油總離子流色譜圖見圖1、圖2，其成分分析結(jié)果見表1、表2。

2.2不同產(chǎn)地金銀花揮發(fā)油的共有成分

通過以上GC-MS總離子流圖分析可見，廣西產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出54個(gè)色譜峰，鑒定出35種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的84.63%。其主要成分有軟脂酸（占揮發(fā)油總量2979%，）、ζ-依蘭油烯（5.33%）、亞麻酸甲酯（451%）等。湖南產(chǎn)金銀花揮發(fā)油分離出29個(gè)色譜峰，鑒定出18種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的86.49%。其主要成分有α-姜黃烯（499%）、亞油酸（11.00%）、軟脂酸（3842%）等。在2個(gè)產(chǎn)地金銀花的揮發(fā)油化學(xué)成分中，有13種成分是兩者的共有成分，具體見表3。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999：529-536.

[2]畢躍峰，田野，裴姍姍，等. 金銀花化學(xué)成分分析[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：理學(xué)版，2007，39（2）：184-186.

[3]何顯忠，蘭榮德. 金銀花的藥理作用與臨床應(yīng)用[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2004，15（12）：865-867.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：57-58.endprint