不同生長調(diào)節(jié)劑對康乃馨組織培養(yǎng)的影響

張婷　代容春

摘 要 [目的]利用3種植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA、NAA、2，4-D探究其對植物組織培養(yǎng)的促進作用。[方法]配置不同濃度不同功能的培養(yǎng)基，利用無菌技術(shù)接種康乃馨外植體并定期觀察植物組織生長情況。[結(jié)果]6-BA與NAA對康乃馨叢生芽的生長具有顯著促進作用。[結(jié)論]植物生長調(diào)節(jié)劑對康乃馨植物組織培養(yǎng)的生長具有不可或缺的重要作用，可以在生產(chǎn)實踐中運用不同植物生長調(diào)節(jié)劑配比以提高康乃馨花卉產(chǎn)率。

關(guān)鍵詞 康乃馨；組織培養(yǎng)；愈傷組織；生長調(diào)節(jié)劑

中圖分類號：S682.19 文獻標志碼：A 文章編號：

康乃馨別名麝香石竹，香石竹（Dianthuscaryophyllus L），石竹科，多年生草本植物[1]。分為露地栽培種和溫室栽培種2大類，為世界5大切花之一。溫室栽培可四季開花，切花保存時間長，花直徑5～10 cm，花色鮮艷，有白、紅、桃紅、桔黃、紫及雜色[2]?；ò耆缃?，鑲邊疊褶，勻稱地包卷在筒狀的花萼之內(nèi)，香味宜人，在世界各地被人們廣泛栽培。但目前，用常規(guī)扦插方法繁殖，繁殖系數(shù)低，速度慢，難以滿足市場需求。同時，因為花長期經(jīng)過無性繁殖，病毒侵染嚴重，造成切花的商品品質(zhì)下降。近年來，人們逐漸開始重視康乃馨的快速繁殖，并有多篇報道現(xiàn)世。為解決康乃馨生產(chǎn)上的問題，采用植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)植物組織培養(yǎng)康乃馨優(yōu)良新品種。最常使用的生長調(diào)節(jié)劑是生長素和細胞分裂素，這2類生長調(diào)節(jié)劑在植物生長過程中起到重要作用。生長素包括：1-萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）等；細胞分裂素包括6-芐基腺嘌呤（6-BA）及玉米素等。本次實驗使用NAA、6-BA、2，4-D 3種植物生長調(diào)節(jié)劑對康乃馨進行組織培養(yǎng)，以期為康乃馨組織培養(yǎng)生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

生長旺盛無病害的康乃馨小型盆栽。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基配制方法

1.2.1.1 植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制

按照比例配置好培養(yǎng)基原液，并將原液均分，往液體中滴加植物生長調(diào)節(jié)劑，本次實驗共配制3種不同濃度的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基3種，分別為：①6-BA 2.0；②6-BA 2.0+NAA 0.5；③6-BA 2.0+NAA 1.0；。均勻攪拌后將各種培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)瓶，并貼上對應(yīng)標簽進行滅菌。

1.2.2 無菌操作

1.2.2.1 操作準備

將培養(yǎng)基、無菌水、及各種接種用具放入超凈工作臺，打開紫外燈，照射消毒20～30 min后，打開無菌風開關(guān)，關(guān)紫外燈，打開照明日光燈。清洗雙手，用棉花吸取75%酒精擦手，自內(nèi)向外擦拭超凈臺，點燃酒精燈。

1.2.2.2 外植體消毒

選取康乃馨健康新鮮莖段或葉片為外殖體，用剪刀切取所需組織，將植物組織在70%～75%酒精中浸泡消毒30 s，之后移入0.1%升汞溶液浸泡10 min，在超凈臺內(nèi)用無菌水沖洗5～6次后即完成外植體消毒過程。

1.2.2.3 外植體的接種

叢生芽誘導(dǎo)接種：在無菌超凈臺內(nèi)將消毒好的康乃馨接種材料在培養(yǎng)皿內(nèi)用無菌濾紙吸去多余水份，借助剪刀剪取長度約1 cm左右?guī)в星o節(jié)莖段，用鑷子將莖段一半斜插入培養(yǎng)基中，蓋好瓶蓋。以上無菌操作均需在酒精燈火焰旁進行。

1.2.3 培養(yǎng)及記錄

將接種后培養(yǎng)瓶放入恒溫光照箱中培養(yǎng)，溫度（28±1）℃ 、光強2 000～2 500 Ix、每天光照14 h，愈傷組織需遮光培養(yǎng)。每周固定時間取出培養(yǎng)瓶查看植物組織生長情況清除染菌培養(yǎng)瓶并記錄數(shù)據(jù)并制成表格。

2 結(jié)果與分析

2.1 6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導(dǎo)的影響

從生長狀態(tài)來看，單獨添加6-BA時，叢生芽生長狀況不佳，芽小而疏松。當培養(yǎng)基中添加的6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2：1或4：1時，叢生芽生長狀況良好，芽強壯而密集，且接種莖段成活率較高，生長旺盛。從出芽率來看，單獨添加6-BA時出芽率為75%，出芽率介于添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基與6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2的培養(yǎng)基之間；添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基出芽率最高，為90%；添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基出芽率最低，約為57.1%。因此本實驗證明，合適的6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)，但添加NAA的培養(yǎng)基不一定有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)。

2.2 分析

本次實驗結(jié)果與孫駿威等和沈?qū)帠|等的實驗結(jié)果有較大出入。他們實驗結(jié)果表明，6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2：1和4：1都有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)，從生長狀況與出芽率方面考慮，2種實驗方案都相差不大。經(jīng)反思，認為所得結(jié)果與他人不同的原因可能為實驗材料的限制，如培養(yǎng)瓶數(shù)量少要平均分配給11種不同濃度溶液配制叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基、愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和分化培養(yǎng)基，且接種中部分培養(yǎng)基染菌，故培養(yǎng)數(shù)量不夠大，且只配置了3種不同生長調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度配比的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，造成結(jié)果不夠準確，下次實驗時需要改進。

3 討論

本實驗分別研究了6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比、NAA質(zhì)量濃度搭配、6-BA和2，4-D質(zhì)量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導(dǎo)的影響。從結(jié)果得知，6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導(dǎo)具有明顯促進效果，且6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4：1的時候具有最佳出芽效果，出芽率約為90%；但因為實驗時間以及實驗環(huán)境限制等問題，對康乃馨出芽率造成了較大的影響，這也提醒在日常的生產(chǎn)生活中，康乃馨需要大量時間以及適宜的環(huán)境進行組織培養(yǎng)，并且培養(yǎng)量較大時出芽率應(yīng)會稍微提高，偏差較小。本次實驗成功證明了植物生長調(diào)節(jié)劑對康乃馨植物組織培養(yǎng)具有顯著促進作用，2種植物生長調(diào)節(jié)劑共同作用能有效提高叢生芽出芽率，可運用在生產(chǎn)變異新種康乃馨植株中，本實驗也將繼續(xù)培養(yǎng)觀察康乃馨，能為今后大批利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)觀賞康乃馨提供理論及技術(shù)上的支持。

參考文獻

[1]王蓮英，朱秀珍，虞佩珍.中國名貴花卉鑒賞與栽培[M].合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，1997：77-79.

[2]聶慶娟，王進茂，梁海勇，等.康乃馨的繁殖[J].河北林果研究，1997，（1）：50-52.

（責任編輯：趙中正）