Annexin A1表達水平與骨巨細胞瘤術(shù)后復發(fā)相關(guān)性

李穎智,金海鴻,楊 彬,秦悅洋,李成鎮(zhèn),胡惠靜,李 敏,季宏波,王 全,毛 鐵

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

骨巨細胞瘤是一種原發(fā)性、溶骨性骨腫瘤,侵襲性較強。多發(fā)生于青壯年,病灶多位于骨骺端,且多為單發(fā)病灶；多中心發(fā)生率低[1]?；颊咄ǔ８贻p,多見于女性和骨骼未成熟患者[2,3]。骨巨細胞瘤治療方案選擇存在困難和爭議,本研究對骨巨細胞瘤復發(fā)前后Annexin A1表達水平進行檢測,探討Annexin A1與骨巨細胞瘤術(shù)后復發(fā)相關(guān)性。

1 一般資料

1.1臨床資料2003年9月至2009年9月收治13例復發(fā)的四肢部位單發(fā)骨巨細胞瘤。男4 例,女 9例；發(fā)病年齡21-45 歲,平均年齡 27.5 歲；發(fā)病部位：股骨遠端4例,脛骨近端5例,肱骨遠端1例,橈骨遠端3例。

1.2主要試劑鼠抗人Annexin A1單克隆抗體購自臺灣Abnova公司,即用型快捷免疫組化MaxVisionTM試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3免疫組織化學染色用已知染色陽性的組織切片作為陽性對照,PBS代替一抗作為陰性對照。按試劑盒說明書操作。

1.4結(jié)果判定觀察結(jié)果采用雙盲法,陽性判定以染色強度及陽性細胞數(shù)綜合判定。按照陽性細胞比例計分：≤10%為1分,10%-50%為2分,>50%為3分；按染色強弱計分：陰性為0分,淡黃色染色為1分,中度黃色染色為2分,棕褐色染色為3分。以二者之積計總分：總分0-1為陰性,2-3分為弱陽性,4-5為陽性,>5分為強陽性。

2 結(jié)果

Annexin A1在所有骨巨細胞瘤組織中均有表達,以單核基質(zhì)細胞表達為主,均為細胞漿染色,細胞染色數(shù)目較多,強度為弱陽性或陽性,多核巨細胞不表達或弱表達,復發(fā)后 Annexin A1表達8例增強,2例減弱,3例無明顯改變。采用秩相關(guān)分析(P=0.0636,無統(tǒng)計學差異),詳見表1、 圖1、圖2。

圖1AnnexinA1在骨巨細胞瘤中的表達圖2骨巨細胞瘤復發(fā)后Annexin A1的表達增強

表1 復發(fā)前后Annexin A1表達差異

3 討論

研究表明Annexin A1在不同來源腫瘤中作用不盡相同：Annexin A1 抑制低轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞遷移能力,表達下調(diào)能促進低轉(zhuǎn)移細胞的遷移能力[4]；通過siRNA 阻斷Annexin A1表達,能顯著降低結(jié)、直腸癌細胞系SKCO-15 細胞侵襲能力,抗Annexin A1血清也能得到相似的結(jié)果,在系統(tǒng)中加入重組 Annexin A1 和Annexin A1 N末端肽 Ac2-26 時,SKCO-15 細胞的侵襲能力可增大2倍[5]。 Annexin A1在不同來源腫瘤中表達水平不盡相同：Annexin A1在肺鱗癌[6]、胰腺癌組織中表達明顯升高[7]；Annexin-A1在膽管癌中高表達,肝細胞癌中低表達[8]。頭頸鱗狀細胞癌中,Annexin A1表達存在著高頻率的下調(diào)/缺失[9]；Annexin A1在口腔鱗癌中表達下降[10]。Annexin A1基因表達上調(diào)能提高結(jié)、直腸癌細胞遷移和侵襲能力[11]；Annexin A1高表達是胃癌病人預后差的獨立危險因子[12]；Annexin A1與胃癌遠處轉(zhuǎn)移、患者早期死亡密切相關(guān)[13]。

本研究采用秩相關(guān)分析(P=0.0636),13例骨巨細胞瘤復發(fā)前后病理組織Annexin A1表達差異無統(tǒng)計學意義。本文不足之處：(1)實驗方法相對簡單,尚需其他技術(shù)方法進一步驗證；(2)樣本數(shù)量小,尚需多中心、大樣本研究；(3)以下因素有可能干擾實驗結(jié)論：①腫瘤復發(fā)及轉(zhuǎn)移不僅僅取于與腫瘤自身性質(zhì),手術(shù)水平存在一定的干擾,不充分的術(shù)前計劃、不良的外科技術(shù)導致取骨區(qū)腫瘤移植[14]；②手術(shù)越徹底復發(fā)可能性越小,腫瘤實際范圍大于肉眼及影像學檢查所見,術(shù)后復發(fā)可能與腫瘤組織殘留有關(guān)； ③局部軟組織侵潤影響刮除術(shù)后局部復發(fā)[15]。④骨水泥聚合熱是否對腫瘤活性有影響,以往認為骨水泥聚合熱對腫瘤細胞有直接的細胞毒作用,啟動程序化死亡即細胞凋亡并減弱腫瘤活性,筆者認為這一觀點或需進一步研究證實,而高溫損傷局部血管影響腫瘤血供可能是導致腫瘤壞死重要原因之一。如本實驗觀察到2例采用病灶擴大刮除骨水泥填充病例復發(fā)后Annexin A表達增強,1例采用骨水泥固定人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后復發(fā)病例Annexin A表達減弱?？傊?Annexin A1表達水平是否與骨巨細胞瘤術(shù)后復發(fā)相關(guān)有必要進一步深入研究。

參考文獻：

[1]Hoch B,Inwards C,Sundaram M,et al. Multicentric giant cell tumor of bone:clinicopathologic analysis of thirty cases[J]. Journal of Bone and Joint Surgery,2006,88(9):1998.

[2]Park IH,Jeon IH. Multicentric giant cell tumor of bone:ten lesions at presentation[J]. Skeletal Radiology,2003,32(9):526.

[3]Zahid M,Asif N,Bin Sabir A,et al. Metachronous multicentric giant cell tumour of the upper extremity in a skeletally immature girl:a rare presentation[J]. Acta Orthopaedica Belgica,2010,76(5):694.

[4]湯曉東,周家華. Annexin A1 調(diào)控胰腺癌細胞遷移[J]. 東南大學學報 ( 醫(yī)學版),2013,32( 1) :10.

[5]Babbin BA,Lee WY,Parkos CA,et al. Annexin I regulates SKCO-15 cell invasion by signaling through formyl peptide receptors [J]. J Biol Chem,2006,281:19588.

[6]燕 貞,劉桂芝,王建設(shè),等. 蛋白質(zhì)組學方法篩選早期肺鱗癌相關(guān)蛋白[J]. 腫瘤,2010,30(2):130.

[7]倪曉光,白曉楓,王貴奇,等. 膜聯(lián)蛋白A1和Ki67抗原在胰腺癌組織中的表達及其相互關(guān)系[J]. 中國腫瘤,2010,19(8):549.

[8]Hongsrichan N,Rucksaken R,Chamgramol Y,et,al. Annexin A1:A new immunohistological marker of cholangiocarcinoma[J]. World J Gastroenterol,2013,19 (16):2456.

[9]Garcia Pedrero JM,Fernandez MP,Morgan RO,et al. Annexin A1 down-regulation in head and neck cancer is associated with epithelial differentiation status [J]. Am J Pathol,2004,164:73.

[10]張 雷,楊 筱,鐘來平,等. 膜聯(lián)蛋白A1表達下降在口腔癌中的意義[J].中國口腔頜面外科雜志,2008,6(1):22.

[11]楊曉群,葛慧娟,汪佳祺. pcDNA3.1-Annexin A1真核表達載體對結(jié)直腸癌細胞遷移、侵襲的影響[J]. 第二軍醫(yī)大學學報,2010,31(3):264.

[12]Cheng TY,Wu MS,Lin JT,et al. Annexin A1 is associated with gastric cancer survival and promotes gastric cancer cell invasiveness through the formyl peptide receptor/extracellular signal-regulated kinase/integrin beta-1-binding protein 1 pathway[J]. Cancer,2012,118(23):5757.

[13]張瓏涓,李 斌,謝 至,等. Annexin A1在胃癌中的表達及其與胃癌預后的關(guān)系[J]. 中山大學學報(醫(yī)學科學版),2011,32(2):237.

[14]Zile S Kundu,Vinay Gupta,Sukhbir S Sangwan,et al. Iatrogenic giant cell tumor at bone graft harvesting site[J]. Indian J Orthop,2013,47(1):107.

[15]L van der Heijden,MA van de Sande,PD Dijkstra. Soft tissue extension increases the risk of local recurrence after curettage with adjuvants for giant-cell tumor of the long bones:A retrospective study of 93 patients[J]. Acta Orthop,2012,83(4):401.