乙肝疫苗研究進展

馮 利， 趙 歡

（河北工業(yè)職業(yè)技術學院 環(huán)境與化學工程系，河北 石家莊 050091）

乙型病毒性肝炎，是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，縮寫為HBV）引發(fā)的世界分布性傳染疾病，目前尚無治愈此病的特效藥物.接種乙肝疫苗是預防和阻斷HBV感染的重要措施.

目前普遍推行的乙肝疫苗主要是由重組的釀酒酵母、漢遜酵母或中國倉鼠卵巢（chinese hamster overy，縮寫為CHO）細胞表達的乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen，縮寫為 HBsAg）［1］添加到氫氧化鋁或磷酸鋁佐劑中制備而成.全程免疫后，95%的免疫人群均可產生TH2型體液免疫應答，從而起到抗感染的保護作用［2］.然而，它對于早期細胞免疫，阻斷病毒母嬰傳播并不能發(fā)揮有效作用，對于肝細胞內寄生的HBV，亦不能發(fā)揮細胞免疫作用，也不能有效清除病毒.此外，仍有4%的健康人接種后體內無法達到保護性抗體水平（抗體滴度≤10mIU／mL），一些特定人群如老人、體胖者、煙民、免疫缺陷病人、慢性腎病或血液透析病人、肝移植患者、腹瀉病人、糖尿病患者等接種疫苗后仍表現為低應答或無應答［3－6］.現行乙肝疫苗全程免疫一般需要多次注射，不斷加強免疫效果，才能誘發(fā)機體產生長效的免疫應答.但是對于一些發(fā)展中國家或地區(qū)，由于條件所限，很難保證全程免疫三針.我國自2002年開展乙肝疫苗計劃免疫以來，雖然乙肝病毒感染率從1992年的9.75%下降到2006年的7.2%，但仍未實現全程覆蓋的全面疫苗接種，在中東部發(fā)達地區(qū)三針全程覆蓋率為80%～90%，而在西部貧困地區(qū)甚至要低于40%［7－8］.因此，簡化免疫程序，發(fā)展更有免疫效果，甚至具有一定治療作用的新型乙肝疫苗，已成為各國近年來關注的主題之一.本文針對乙肝疫苗存在的問題，就乙肝疫苗的研究進展進行綜述.

1 1018ISS佐劑疫苗

1018免疫刺激序列（1018immunostimulatory sequence，縮寫為1018ISS）是采用標準的固相化學技術制備的Toll樣9受體激動劑，由22個堿基組成 （5′－TGACTGTGAACGTTCGAGGATGA－3′），屬于單鏈的硫代磷酸寡脫氧核苷酸.免疫刺激序列作為信號分子對機體的重要生理功能產生調控作用.1018ISS與HBsAg混合同時接種，能發(fā)揮較好的佐劑效能，增強抗原特異性免疫應答水平.特別是對于低應答或無應答的特定人群，能顯示出快速免疫應答和較高的免疫保護作用.作為一種新疫苗，除具有很好的免疫原性外，安全性和反應原性也是重要的評價參數.在Ⅱ期和Ⅲ期臨床試驗過程中發(fā)現，注射部位的痛感和紅腫程度與對照的上市疫苗無顯著差異，除有易疲勞、腹瀉、頭痛、上呼吸道感染、鼻咽炎等個例外，不良反應均比較溫和，發(fā)生的頻次和嚴重程度與對照的上市疫苗相比無顯著差異，亦無嚴重不良反應產生.它具有很好的市場前景［9－11］.

2 YIC治療疫苗

重組酵母表達的HBsAg與其相應的高滴度人特異性抗－HBs免疫球蛋白（human high－titer anti－HBs immunoglobin，縮寫為HBIG）的Fab段結合，組成免疫復合物，在鋁佐劑輔佐下制備成YIC治療疫苗（yeast－derived recombinant HBsAg complexed with human anti－HBs immunoglobulin immunogenic complex，縮寫為YIC）.此治療疫苗抗體分子的Fc段可與抗原提呈細胞（Antigen presenting cells，縮寫為APCs）表面的Fc段受體結合，促使HBsAg易被巨噬細胞或樹突狀細胞等的APCs攝取，進而有效激活T細胞，誘導機體產生特異性體液免疫和細胞免疫應答.臨床試驗過程中，YIC治療疫苗可誘使慢性乙肝患者產生高效價的乙型肝炎病毒表面抗體（抗－HBs）、細胞因子干擾素－γ（interferon－gamma，縮寫為IFN－γ）與白細胞介素（interlukin，縮寫為IL－2），并清除機體內一定的HBsAg，使患者血清中HBV的DNA有所降低，因此，它具有一定的免疫保護和清除病毒的治療作用.患者的乙型肝炎e抗原（Hepatitis B e antigen，縮寫為HBeAg）轉陰和產生抗－HBe抗體是評價疫苗是否具有治療效果的重要指標.YIC治療疫苗在臨床試驗中的患者HBeAg轉陰率和產生抗－HBe抗體水平雖高于患者自發(fā)的轉陰率和抗－HBe抗體水平，但低于鋁佐劑的實驗對照組水平.因此，YIC治療疫苗雖表現了一定的預防和治療效果，但在免疫、治療方案以及免疫學評價方面尚需一定的上市前臨床研究工作［12－15］.

3 單劑緩控釋微球

單劑緩控釋微球是將HBsAg 溶解或分散在可生物降解的高分子聚酯材料基質中而形成的微小球狀實體.這些聚酯材料如聚乳酸（Poly lactic acid，縮寫為PLA）、聚乳酸／乙醇酸共聚物（Poly lactic co glycolic acid，縮寫為PLGA）、聚己內酯（Polycaprolactone，縮寫為PCL）等是經FDA批準的可生物降解材料，有很好的生物兼容性和非毒性，在體內的降解為非酶水解過程.降解過程為：水擴散進入高分子材料（最先進入比較無定型的區(qū)域），自由水解，高分子材料溶蝕，經過細胞內吞、代謝，高分子材料骨架解體，水解的產物——乳酸進入體內代謝的三羧酸循環(huán)，最終降解成二氧化碳、水或乙醇酸直接排泄或被酶解為其他代謝產物.通過選擇不同聚酯材料的分子量大小、分子量分布、含親水性基團的多少以及單體材料的旋光性來控制微球的大小和體內降解速度，進而控制微球疫苗釋放HBsAg，誘發(fā)體內產生預期的免疫效果.一般選擇制備粒徑小于10μm的微球疫苗，以利于APCs有效攝取鋁吸附抗原，誘發(fā)機體產生TH2型體液免疫應答.HBsAg微球單劑免疫小鼠時，相對速釋的微球能夠在免疫早期于小鼠體內誘發(fā)產生較高的抗體應答，起到“primingdose”作用.而在后續(xù)的時間，相對緩釋的微球在體內緩慢降解，持續(xù)釋放HBsAg，成為很好的“booster－dose”，形成對小鼠持續(xù)有效的免疫刺激.這種具有“Autobooster”性質的投遞系統(tǒng)，很好地模擬了現行鋁佐劑疫苗在體內的免疫行為，有效地簡化了免疫方式，為開發(fā)可以替代傳統(tǒng)的需要全程免疫三針的鋁佐劑疫苗奠定了基礎［16－19］.

4 結束語

乙型肝炎病毒感染是嚴重危害我國乃至全球的重要公共衛(wèi)生問題之一，目前尚無有效的方法治愈.推行乙肝疫苗接種是預防和阻斷HBV傳播的有效方法.提高乙肝疫苗的免疫原性，增強各人群對疫苗的應答水平，簡化免疫程序，改變給藥方式，既能發(fā)揮免疫預防作用，又可以有效清除病毒并達到治療效果，是有效遏制乙型肝炎的發(fā)展趨勢.

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