PDR患者血漿、眼內(nèi)組織纖溶酶原激活物及其抑制劑與VEGF的表達(dá)及相關(guān)性△

武淑玲 楊默遲 袁進(jìn)萍

PDR患者血漿、眼內(nèi)組織纖溶酶原激活物及其抑制劑與VEGF的表達(dá)及相關(guān)性△

武淑玲 楊默遲 袁進(jìn)萍

糖尿病視網(wǎng)膜病變；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；組織纖溶酶原激活物；纖溶酶原激活物抑制劑

目的探討增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者血漿、房水、玻璃體中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)與組織纖溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA)及t-PA抑制劑(plasminogen activator inhibitor,PAI)的表達(dá)，并評(píng)價(jià)VEGF表達(dá)與t-PA、PAI的相關(guān)性。方法采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法定量檢測(cè)來自寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院眼科的PDR組及對(duì)照組患者血漿、房水、玻璃體中VEGF、t-PA、PAI的含量。結(jié)果PDR組血漿中VEGF(63.12±16.25)pg·mL-1、PAI(10.27±7.62)ng·mL-1的表達(dá)均高于對(duì)照組(14.39±10.48)pg·mL-1、(0.28±0.11)ng·mL-1，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.051；PDR組血漿中t-PA(19.91±9.90)ng·mL-1與對(duì)照組(12.00±2.61)ng·mL-1比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。PDR組房水中VEGF(291.21±45.04)pg·mL-1、t-PA(5.38±2.40)ng·mL-1、PAI(0.53±0.31)ng·mL-1均高于對(duì)照組(30.60±11.70)pg·mL-1、(3.87±1.32)ng·mL-1、(0.16±0.09)ng·mL-1，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)；PDR組玻璃體中VEGF(527.62±79.00)pg·mL-1、t-PA(10.41±6.33)ng·mL-1、PAI(7.72±2.32)ng·mL-1的表達(dá)濃度均高于對(duì)照組(37.58±8.31)pg·mL-1、(3.68±2.48)ng·mL-1、(0.27±0.13)ng·mL-1，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均勻P<0.05)。PDR組自身血漿、房水、玻璃體三者比較，VEGF表達(dá):玻璃體>房水>血漿；t-PA表達(dá):血漿>玻璃體>房水；PAI表達(dá):血漿、玻璃體均高于房水，但血漿和玻璃體比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。PDR組血漿、房水、玻璃體中VEGF 的表達(dá)與t-PA及PAI的表達(dá)均存在顯著相關(guān)性(均為P<0.05)。結(jié)論VEGF、t-PA、PAI可能參與了PDR視網(wǎng)膜新生血管的發(fā)生過程；VEGF與t-PA、PAI在PDR 的發(fā)展中可能具有相互促進(jìn)的作用。

[眼科新進(jìn)展，2014，34(7):647-651]

增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(proliferative diabetic retinopathy，PDR)是糖尿病晚期最為常見和嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，其病理特征是新生血管及纖維組織增生，在引起視網(wǎng)膜新生血管的眾多因素中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前被認(rèn)為與PDR關(guān)系最密切的一個(gè)因子[1-2]，在血管增生的過程中，除VEGF外亦有許多生物活性物質(zhì)參與，如組織纖溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator，t-PA)和纖溶酶原激活物的抑制劑(plasminogen activator inhibitor，PAI)也通過降解血管內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)等機(jī)制誘導(dǎo)新生血管生成[3]。同時(shí)，糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)患者纖溶功能低下，t-PA及PAI是纖溶系統(tǒng)活性的重要調(diào)節(jié)成分，它們之間的動(dòng)態(tài)失衡可加重視網(wǎng)膜的缺血缺氧，從而加速DR的發(fā)展[4]。本研究檢測(cè)PDR患者血漿、房水、玻璃體中 VEGF、t-PA、PAI濃度的變化，分析并探討t-PA、PAI與VEGF之間是否存在相關(guān)性及其在PDR發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 資料與方法

1.1資料與分組PDR組:隨機(jī)選擇2012年6月至2013年4月就診于寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬總醫(yī)院眼科符合PDR組納入標(biāo)準(zhǔn)的患者40例(40眼)，其中男18例，女22例，年齡38～89(61±12)歲，糖尿病病程3～28 a，共收集血漿標(biāo)本40例，房水標(biāo)本20眼(右眼11例，左眼9例)，玻璃體標(biāo)本20眼(右眼11例，左眼9例)，血漿、房水、玻璃體標(biāo)本均來自同一個(gè)PDR患者的共20例。PDR組患者納入標(biāo)準(zhǔn):(1)根據(jù)1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為2型糖尿病者；(2)對(duì)所有診斷為2型糖尿病的患者進(jìn)行充分散瞳后詳細(xì)檢查眼底并做眼底熒光血管造影檢查；(3)按照2002年國(guó)際眼科學(xué)術(shù)會(huì)議制定的DR臨床分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)由同一眼科醫(yī)師作出PDR的診斷。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有糖尿病腎病、糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病高滲昏迷等糖尿病急性并發(fā)癥；(2)合并其他內(nèi)分泌代謝疾病和腫瘤疾病者；(3)有影響血漿t-PA、PAI活性的血液性疾??；(4)行眼內(nèi)手術(shù)、視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)者，青光眼，虹膜紅變，嚴(yán)重玻璃體積血，玻璃體切割術(shù)后；(5)眼內(nèi)注射過抗VEGF制劑。對(duì)照組:血漿及房水標(biāo)本選擇同期于寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬總醫(yī)院眼科就診的除老年性白內(nèi)障外無全身其他疾病的患者共40例(40眼)，男18例，女22例，年齡46～85(61±13)歲，收集到血漿標(biāo)本40例，房水標(biāo)本19眼(右眼10眼，左眼9眼)，玻璃體標(biāo)本取自40例患者中需行手術(shù)治療的孔源性視網(wǎng)膜脫離患者，均除外全身及眼部其他疾病，共10例(右眼6例，左眼4例)，男6例,女4例，年齡19～72(57±16)歲。PDR組及對(duì)照組所有患者均知情同意，兩組入選對(duì)象的年齡、性別及眼別分布差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)。

1.2方法

1.2.1取材(1)血漿標(biāo)本:抽取晨空腹靜脈血4 mL，乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)抗凝，3000 r·min-1離心10 min，提取血漿分裝移入已消毒Eppendorf管中，-80 ℃密封保存待測(cè)。(2)房水標(biāo)本:術(shù)中作眼球切口前用1.0 mL注射器直接抽取前房房水0.15～0.20 mL，移入已消毒Eppendorf管中，-80 ℃密封保存待測(cè)。(3)玻璃體標(biāo)本:行玻璃體切割手術(shù)時(shí)，以玻璃體切割頭進(jìn)入眼內(nèi)至玻璃體中央，于切割器開口處用無菌1 mL注射器吸引玻璃體0.5～0.8 mL，分裝移入已消毒Eppendorf 管中，-80 ℃密封保存待測(cè)。

1.2.2VEGF、t-PA、PAI測(cè)定采用ELISA法定量檢測(cè)，從冰箱中取出標(biāo)本，置于室溫下10 min后待測(cè)。人VEGF酶聯(lián)免疫試劑盒購自北京欣博盛公司，其靈敏度為8 pg·mL-1，根據(jù)試劑盒操作說明書進(jìn)行操作。37 ℃溫箱孵育90 min，再用稀釋好的洗滌液清洗5次，充分甩干；在各孔中加入生物素化抗體工作液100 μL，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37 ℃溫箱孵育60 min；清洗5次后每孔再加入酶結(jié)合物工作液100 μL，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37 ℃孵箱孵育30 min；然后清洗5次，在每孔中加入顯色劑100 μL，37 ℃避光孵育10～15 min后在每孔中加入終止液100 μL，混勻，酶標(biāo)儀450 nm處讀數(shù)，在5 min內(nèi)測(cè)定各孔吸光度(OD)值，根據(jù)定比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值和標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算VEGF含量。人t-PA及PAI酶聯(lián)免疫試劑盒購自武漢優(yōu)爾生公司，其靈敏度分別為0.2 ng·mL-1和4.9 ng·mL-1，t-PA及PAI的檢測(cè)步驟與VEGF相同。實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按其說明書操作程序進(jìn)行測(cè)定，且每份標(biāo)本均設(shè)置復(fù)孔。

2 結(jié)果

2.1兩組血漿、房水、玻璃體中VEGF、t-PA和PAI的表達(dá)PDR組血漿中VEGF、PAI的表達(dá)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05，見表1)，PDR組血漿中t-PA的表達(dá)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。PDR組房水、玻璃體中VEGF、t-PA、PAI的表達(dá)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。

表1 兩組血漿、房水、玻璃體中VEGF、t-PA 和PAI的表達(dá)Table 1 Expression of VEGF,t-PA and PAI in plasma,aqueous humor and vitreous of two groups(±s)

PDR組自身血漿、房水、玻璃體三者比較:VEGF表達(dá):玻璃體>房水>血漿(均為P<0.05)；t-PA表達(dá):血漿>玻璃體>房水(均為P<0.05)；血漿及玻璃體中PAI表達(dá)均高于房水(均為P<0.05)，但血漿和玻璃體比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)照組血漿、房水、玻璃體中VEGF、t-PA、PAI表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)。

2.2PDR組血漿、房水、玻璃體中VEGF表達(dá)與t-PA及PAI表達(dá)的相關(guān)性PDR組血漿中VEGF與t-PA的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.659，P<0.01，見圖1)；VEGF與PAI的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.705，P<0.01，見圖2)。PDR組房水中VEGF與t-PA的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.527，P<0.05，見圖3)；VEGF與PAI的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.648，P<0.01，見圖4)。PDR組玻璃體中VEGF與t-PA的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.798，P<0.01，見圖5)；VEGF與PAI的表達(dá)顯著相關(guān)(r=0.694，P<0.01，見圖6)。對(duì)照組血漿、房水、玻璃體中VEGF表達(dá)與t-PA及PAI的表達(dá)均無明顯相關(guān)性(均為P>0.05)。

Figure 1 Correlation of VEGF and t-PA in plasma of PDR.Figure 2 Correlation of VEGF and PAI in plasma of PDR.Figure 3 Correlation of VEGF and t-PA in aqueous humor of PDR.Figure 4 Correlation of VEGF and PAI in aqueous humor of PDR.Figure 5 Correlation of VEGF and t-PA in vitreous of PDR.Figure 6 Correlation of VEGF and PAI in vitreous of PDR 圖1 PDR組血漿中VEGF與t-PA表達(dá)的相關(guān)性。圖2 PDR組血漿中VEGF與PAI表達(dá)的相關(guān)性。圖3 PDR組房水中VEGF與t-PA表達(dá)的相關(guān)性。圖4 PDR組房水中VEGF與PAI表達(dá)的相關(guān)性。圖5 PDR組玻璃體中VEGF與t-PA表達(dá)的相關(guān)性。圖6 PDR組玻璃體中VEGF與PAI表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

PDR是糖尿病患者最常見的致盲眼病，其基本病理過程是視網(wǎng)膜微血管病變。新生血管形成是PDR的主要標(biāo)志，在引起視網(wǎng)膜新生血管的眾多因素中，VEGF是目前所知最強(qiáng)的內(nèi)皮細(xì)胞選擇性促有絲分裂因子和血管生成因子，由于視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮存在VEGF高親和力受體，其可以通過直接或間接誘導(dǎo)VEGF及其受體的表達(dá)來發(fā)揮刺激血管生成的作用[5-6]，并且通過增加血管的通透性[7]、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖[8]、增加內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)[9]、改變細(xì)胞外基質(zhì)[10]、上調(diào)細(xì)胞間黏附分子-1[11]的基因表達(dá)等途徑破壞血-視網(wǎng)膜屏障，使視網(wǎng)膜血管通透性增高、視網(wǎng)膜水腫，加重視網(wǎng)膜局部缺血、缺氧，促使新生血管形成。本研究中，PDR患者血漿、房水、玻璃體中VEGF顯著高于對(duì)照組，且PDR患者自身血漿、房水、玻璃體中VEGF水平呈明顯增高趨勢(shì)，這與國(guó)外研究結(jié)果一致[12-13]。VEGF是PDR發(fā)展過程中一個(gè)強(qiáng)有力的刺激因子，而且其發(fā)揮刺激新生血管生長(zhǎng)的作用主要在眼局部，PDR患者玻璃體中高水平的VEGF并非來自于血漿，而是主要來自缺血缺氧的視網(wǎng)膜，由于缺氧刺激視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞等分泌大量的VEGF，并釋放到玻璃體中，通過玻璃體的支架作用使新生血管逐漸長(zhǎng)入玻璃體,引起玻璃體反復(fù)出血、牽拉性視網(wǎng)膜脫離等一系列并發(fā)癥發(fā)生，玻璃體中VEGF繼續(xù)向前擴(kuò)散，引起房水中VEGF含量增加。血漿中VEGF升高可能是由于在糖尿病長(zhǎng)期高血糖及代謝紊亂狀態(tài)下，導(dǎo)致廣泛組織缺氧，刺激VEGF分泌增多，這提示我們檢測(cè)血漿VEGF含量并不能真正反映玻璃體中VEGF的含量變化，因此，不能作為監(jiān)測(cè)眼內(nèi)新生血管生長(zhǎng)的指標(biāo)。

然而，視網(wǎng)膜新生血管的發(fā)生是一個(gè)十分復(fù)雜的病理過程，血管內(nèi)皮細(xì)胞需首先借助于某些酶的激活，并通過這些酶類降解其基底膜后才能發(fā)生有絲分裂并游走，而細(xì)胞基質(zhì)的降解是血管內(nèi)皮細(xì)胞增生和游走的一個(gè)重要前提條件[14]。有學(xué)者對(duì)腫瘤血管組織的研究結(jié)果顯示，t-PA在血管內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)的降解過程中發(fā)揮了主要的作用[15-17]。本研究結(jié)果顯示，PDR患者血漿中t-PA與對(duì)照組無明顯差異，但房水、玻璃體中t-PA高于對(duì)照組，這表明t-PA參與了PDR的發(fā)生發(fā)展。PAI也主要是由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌，本研究中PAI在PDR患者血漿、房水、玻璃體中亦有明顯表達(dá)，這表明PAI與PDR的發(fā)生發(fā)展也存在著必然的聯(lián)系，也有研究發(fā)現(xiàn)PAI-1對(duì)血管重構(gòu)同樣起重要作用，它可導(dǎo)致纖維蛋白在血管壁內(nèi)沉積，從而刺激血管壁平滑肌細(xì)胞增生，同時(shí)，這些平滑肌細(xì)胞可以合成大量的PAI-1，從而影響血管壁的重塑[18]。Czekay等[19]認(rèn)為PAI-1阻止整合素和玻連蛋白相互作用,使細(xì)胞從基層松解而促進(jìn)細(xì)胞遷移。因此，可設(shè)想PAI-1有誘導(dǎo)腫瘤新生血管生成的作用[3]。除此之外，在微循環(huán)水平上DR發(fā)病機(jī)制的實(shí)質(zhì)是血栓性微血管病變，而作為纖溶系統(tǒng)的關(guān)鍵部分——血漿中t-PA與PAI之間的動(dòng)態(tài)平衡在防止血栓形成、維持正常微循環(huán)等方面發(fā)揮重要作用。本研究中，PDR患者血漿中t-PA較對(duì)照組無明顯變化，而血漿中PAI的水平較對(duì)照組升高，表明PDR患者血漿中t-PA和PAI合成和分泌失衡，破壞了正常的纖溶功能，一方面使血-視網(wǎng)膜屏障破壞；另一方面降低排除血管內(nèi)纖維蛋白的功能，使大片毛細(xì)血管閉塞和無灌注，導(dǎo)致繼發(fā)性血栓形成，加重血管內(nèi)皮損傷，從而促進(jìn)DR的發(fā)展[4]。本研究結(jié)果顯示，t-PA及PAI在PDR患者自身血漿、房水、玻璃體的比較中，均為血漿中最高，由此我們可以猜測(cè)，t-PA和PAI參與PDR發(fā)展更多的是體現(xiàn)在對(duì)PDR患者血液纖溶功能的影響上。

本研究中，PDR組血漿、房水、玻璃體中VEGF與t-PA、PAI的表達(dá)均存在顯著的相關(guān)性，我們可以推測(cè)在PDR患者視網(wǎng)膜新生血管的發(fā)生過程中不僅有VEGF，同時(shí)還有多種生物活性物質(zhì)的參與。首先，這可能與VEGF是一個(gè)多功能的細(xì)胞因子有關(guān)，它在使血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂、游走、視網(wǎng)膜毛細(xì)血管通透性增加、血管內(nèi)纖維蛋白成分外滲的同時(shí)，也刺激了血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)t-PA和PAI分泌的增加，t-PA承擔(dān)了降解細(xì)胞外基質(zhì)和血管內(nèi)皮細(xì)胞基底膜的任務(wù)，PAI也發(fā)揮了促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生、細(xì)胞遷移和血管重構(gòu)的作用。其次，PDR患者存在血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、凝血功能障礙、纖溶活性變化[20]，導(dǎo)致血漿中t-PA與PAI的動(dòng)態(tài)失衡，造成血管腔變窄、閉塞，使血流灌注不足，血管壁出現(xiàn)小的缺血區(qū)域，導(dǎo)致繼發(fā)性血栓形成，從而引起視網(wǎng)膜缺血缺氧。Bainbridge等[21]報(bào)道，因視網(wǎng)膜耗氧量大，因此對(duì)缺氧特別敏感，而缺氧又是刺激VEGF mRNA表達(dá)的關(guān)鍵信號(hào)[22]，使VEGF生成進(jìn)一步增加，從而促進(jìn)視網(wǎng)膜新生血管的生成，加速DR的發(fā)展，如此便形成了惡性循環(huán)。以上三者共同參與到血管增生的過程中，起到了加速視網(wǎng)膜新生血管形成的作用。至于三者之間確切的激活和作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，t-PA、PAI在新生血管及PDR的病理過程中同樣具有重要地位，且與VEGF之間存在交互作用，共同導(dǎo)致了PDR的發(fā)生，相信今后對(duì)VEGF、t-PA、PAI等生物因子研究的不斷深入，可為DR的早期診斷和防治提供新思路和新途徑。

1 Morarski CJ,Skinner SL,Stubbs AJ,Sarlos S,Kelly DJ,Cooper ME,etal.The rennill-angiotensin system influences ocular endothelial cell proliferation in diabetes:transgenic and interventional studies[J].AmJPathol,2003,162(1):151-160.

2 Ray D,Mishra M,Ralph S,Read L,Davies R,Brenchley P,etal.Association of the VEGF gene with proliferative diabetic retinopathy but not proteinuria in diabetes[J].Diabetes,2004,53(3):861-864.

3 Horrevoets AJ.Plasminogen activat or inhibitor1(PAI-1):invitroactivities and clinical relevance [J].BrJHaematol,2004,125(1):12-23.

4 王少波,施秉銀,王養(yǎng)維,吳貴福.糖尿病視網(wǎng)膜病變時(shí)t-PA和PAI-1活性變化的臨床意義[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2006,12(8):46-47.

5 徐萍.糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)因素分析[J].國(guó)際眼科雜志,2009,9(3):501.

6 Shams N,Ianchulev T.Role of vascular endothelial growth factor inocular angiogenesis[J].OphthalmolClinNorthAm,2006,19(3):335-344.

7 Banai S,Shweiki D,Pinson A,Chandra M,Lazarovici G,Keshet E.Upregulation of vascular endothelial growth factor expression induced by myocardial ischaemia:implications for coronary angiogenesis[J].CardiovascRes,1994,28(8):1176-1179.

8 盧海,張惠榮.生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用的研究[J].眼科研究,2001,19(4):297-300.

9 Sone H,Deo BK,Kumagai AK.Enhancement of glucose transport by vascular endothelial growth factor in retinalendothelial cells[J].InvestOphthalmolVisSci,2000,41(7):1876-1884.

10 Spirin KS,Saghizadeh M,Lewin SL,Zardi L,Kenney M,Cristina,etal.Basement membrane and growth factor gene expression in normal and diabetic human retinas[J].CurrEyeRes,1999,18(6):490-499.

11 Lu M,Perez VL,Ma N,Miyamoto K,Peng HB,Liao JK,etal.VEGF increases retinal vascular ICAM-l expressioninvivo[J].InvestOphthalmolVisSci,1999,40(8):1808-1812.

12 Izuta H,Matsunaga N,Shimazawa M,Sugiyama T,Lkeda T,Hara H.Proliferative diabetic retinopathy and relations among antioxidant activity,oxidative stress,and VEGF in the vitreous body[J].MolVis，2010,16(16):130-136.

13 Izuta H,Chikaraishi Y,Adachi T,Shimazawa M,Sugiyama T,Lkeda T,etal.Extracellular SOD and VEGF are increased in vitreous bodies from proliferative diabetic retinopathy patients[J].MolVis,2009,10(15):2663-2672.

14 Folkman J,Shing Y.Angiogenesis[J].JBiolChem,1992,267(16):10931-10934.

15 Dvorak HF,Brown LF,Detmar M,Dvorak AM.Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor,microvascular hyperpermeability,and angiogenesis[J].AmJPathol,1995,146(5):1029-1039.

16 Dvorak HF.Tumors:wounds that do not heal.Similarities between tumor stroma generation and wound healing[J].NEnglJMed,1986,315(26):1650-1659.

17 Li CR,Sun SG,Jiang DY,Hong W.The role of ginkgo biloba extract in treating diabetic retinopathy[J].IntJOphthalmol,2006,6(1):78-81.

18 Hagiwara H,Kaizu K,Uriu K,Noguchi T,Takagi L,Qie YL，etal.Expression of type-1 plasminogen activator inhibitor in the kidney of diabetic rat models[J].ThrombRes,2003,111(4-5):301-309.

19 Czekay RP,Aertgeerts K,Curriden SA,Loskutoff DJ.Plasminogen activator inhibitor-1 detaches cells from extracellular matrices by inactivating integrins[J].JCellBiol,2003,160(5):781-791.

20 寧靜,鄭劍波.糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血漿脂聯(lián)素與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、血小板活化的關(guān)系[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2009,23(8):762-764.

21 Bainbridge JW,Mistry A,Binley K,De Alwis M,Thrasher AJ,Naylor S，etal.Hypoxia-regulated transgene expression in experimental retinal and choroidal neovascularisation[J].GeneTher,2003,10(12):1049-1054.

22 Goodsell DS.The molecular perspective:VEGF and angiogenesis[J].Oncologist,2002,7(6):569-570.

date:Sep 22，2013

Correlation study of t-PA,PAI and VEGF expression in plasma and intraocular tissue in proliferative diabetic retinopathy

WU Shu-Ling，YANG Mo-Chi，YUAN Jin-Ping

diabetic retinopathy;vascular endothelial growth factor;tissue-type plasminogen activator;plasminogen activator inhibitor

ObjectiveTo evaluate the correlation between tissue-type plasminogen activator (t-PA),plasminogen activator inhibitor (PAI) and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in plasma aqueous humor and vitreous of proliferative diabetic retinopathy(PDR).MethodsThe concentrations of VEGF,t-PA and PAI in plasma,aqueous humor and vitreous body in PDR and normal group were detected by ELISA.ResultsThe levels of VEGF(63.12±16.25)pg·mL-1and PAI (10.27±7.62)ng·mL-1in the plasma of PDR patients were higher than control group (14.39±10.48)pg·mL-1and PAI (0.28±0.11)ng·mL-1,and there were significant statistically differences (allP<0.01).The levels of t-PA in plasma of PDR patients (19.91±9.90)ng·mL-1and control group (12.00±2.61)ng·mL-1was no statistically different (P>0.05).The levels of VEGF (291.21±45.04)pg·mL-1,t-PA (5.38±2.40)ng·mL-1and PAI (0.53±0.31)ng·mL-1in the aqueous humor of PDR patients were higher than control group (30.60±11.70)pg·mL-1,(3.87±1.32)ng·mL-1and (0.16±0.09)ng·mL-1,and there were statistical differences (allP<0.05).The levels of VEGF(527.62±79.00)pg·mL-1,t-PA (10.41±6.33)ng·mL-1and PAI (7.72±2.32)ng·mL-1in the vitreous of PDR patients were higher than control group (37.58±8.31)pg·mL-1,(3.68±2.48)ng·mL-1and (0.27±0.13)ng·mL-1,and there were statistical differences (allP<0.05).Compared among plasma,aqueous humor and vitreous of PDR patients,the levels of VEGF in vitreous was more than that in aqueous humor,and aqueous humor was more than plasma;The levels of t-PA in plasma was more than that in vitreous,and vitreous was more than aqueous humor;The levels of PAI in plasma and vitreous were more than that in aqueous humor,and there was no statistical difference between plasma and vitreous (P>0.05).The expression of VEGF was highly correlated with t-PA and PAI in plasma,aqueous humor and vitreous of PDR (allP<0.05).ConclusionVEGF,t-PA and PAI may be involved in the pathogenesis of angiogenesis in PDR,VEGF and t-PA PAI play interdependant roles in the development of PDR.

武淑玲,女，1966年1月出生，主任醫(yī)師。聯(lián)系電話:0951-6743251；E-mail:shulingwtt@sina.com

AboutWUShu-Ling:Female,born in January,1966.Tel:+86-951-6743251；E-mail:shulingwtt@sina.com

2013-09-22

寧夏自然科學(xué)基金資助(編號(hào):NZ10129)

750004 寧夏回族自治區(qū)銀川市，寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬總醫(yī)院眼科

Accepteddate:Dec 26,2013Foundationitem:Supported by Natural Science Foundation of Ningxia(No:NZ10129)From theDepartmentofOphthalmology,GeneralHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,NingxiaHuiAutunomousRegion,China

武淑玲，楊默遲，袁進(jìn)萍．PDR患者血漿、眼內(nèi)組織纖溶酶原激活物及其抑制劑與VEGF的表達(dá)及相關(guān)性[J]．眼科新進(jìn)展，2014，34(7)：647?651．

10．13389/j．cnki．rao．2014．0177

【應(yīng)用研究】

修回日期:2013-12-26

本文編輯:付中靜

[RecAdvOphthalmol，2014，34(7):647-651]