核桃青皮中胡桃醌的提取工藝

魏赫楠+譚紅+包娜+李占彬+袁鑫+李青+何錦林

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗(yàn)對(duì)超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進(jìn)行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無(wú)水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關(guān)鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)： R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項(xiàng)目：貴州省林業(yè)廳項(xiàng)目（編號(hào)：黔林科合[2012]18 號(hào)）；國(guó)家國(guó)際科技合作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2011DFB41640）。

作者簡(jiǎn)介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向?yàn)榛瘜W(xué)工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國(guó)傳統(tǒng)中藥及臨床上有用核桃青皮來(lái)治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環(huán)境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類(lèi)、多酚類(lèi)、多糖、二芳基庚烷類(lèi)等[3]，在核桃楸樹(shù)皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報(bào)道較少。目前，天然產(chǎn)物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗(yàn)采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細(xì)胞破碎作用下可以將細(xì)胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達(dá)到提高產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)率的作用。本研究以胡桃醌含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)其在核桃青皮中的提取方法及工藝進(jìn)行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價(jià)值提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國(guó)Sigma公司；甲醇，色譜純，美國(guó)Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無(wú)水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機(jī)（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫(yī)療設(shè)備廠）；THS-10智能型超級(jí)恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（湖南長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；超聲提取儀（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預(yù)處理

將核桃鮮果進(jìn)行稱(chēng)重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱(chēng)重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進(jìn)行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，棄去過(guò)大的顆粒，即得試驗(yàn)所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱(chēng)取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘?jiān)^續(xù)加入10倍量的溶劑進(jìn)行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮（溫度不超過(guò)40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測(cè)定

胡桃醌得率的計(jì)算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗(yàn)

浸提時(shí)間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時(shí)間為10、20、30、40、50 min，所有試驗(yàn)提取 1次，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，根據(jù)胡桃醌得率選擇合適的提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)。

1.7正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)選出的浸提時(shí)間、浸提溫度、固液比、超聲時(shí)間條件下進(jìn)行正交試驗(yàn)，因?yàn)樘崛囟仍诔貐^(qū)間對(duì)提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時(shí)間、固液比和超聲時(shí)間作為正交試驗(yàn)的3個(gè)因素，進(jìn)行L9（33）正交試驗(yàn)，因素水平如表1所示。

2結(jié)果與分析

2.1浸提時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來(lái)越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來(lái)，所以胡桃醌得率的升高趨勢(shì)不明顯。因此，提取時(shí)間宜為8 h。

2.2浸提溫度對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當(dāng)提取溫度低于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率沒(méi)有明顯的變化；而當(dāng)提取溫度高于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率明顯下降。這是因?yàn)楹阴S著提取溫度的升高會(huì)隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對(duì)胡桃醌含量影響并不大，考慮到節(jié)約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當(dāng)固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率上升較快；但當(dāng)固液比低于1 g ∶10 mL時(shí)，胡桃醌得率增長(zhǎng)趨勢(shì)比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產(chǎn)成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當(dāng)超聲時(shí)間在10～40 min范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率逐漸增加，這是因?yàn)殡S著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，超聲波對(duì)底物產(chǎn)生的攪拌和空化作用增強(qiáng)，進(jìn)而使溶出物質(zhì)增多；而當(dāng)時(shí)間超過(guò)40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續(xù)的超聲波作用使已經(jīng)溶出的胡桃醌分子結(jié)構(gòu)遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時(shí)間宜選擇40 min。

2.5正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳工藝組合

根據(jù)L9（33）正交試驗(yàn)原理進(jìn)行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗(yàn)，以確定最佳的提取工藝條件。試驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理如表2所示。

3結(jié)論

對(duì)核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進(jìn)行單因素試

驗(yàn)，再根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時(shí)間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學(xué)、合理的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2005.

[2]趙巖，劉淑萍，呂朝霞. 核桃青皮的化學(xué)成分與綜合利用[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工，2008（11）：66-68.

[3]李海洋，韓軍岐，李志西. 核桃青皮有效化學(xué)成分提取分離研究綜述[J]. 現(xiàn)代園藝，2012（15）：9-11.

[4]Toma M，Vinatoru M，Paniwnyk L，et al. Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J]. Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（2）：137-142.

[5]徐懷德. 天然產(chǎn)物提取工藝學(xué)[M]. 北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2006.

[6]陳尚钘，劉誠(chéng)，范國(guó)榮，等.天然產(chǎn)物中活性成分提取分離及分析技術(shù)[J]. 江西林業(yè)科技，2005（3）：32-36.

[7]Vinatoru M，Toma M，Radu O，et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J]. Ultrasonics Sonochemistry，1997，4（2）：135-139.endprint

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗(yàn)對(duì)超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進(jìn)行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無(wú)水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關(guān)鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)： R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項(xiàng)目：貴州省林業(yè)廳項(xiàng)目（編號(hào)：黔林科合[2012]18 號(hào)）；國(guó)家國(guó)際科技合作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2011DFB41640）。

作者簡(jiǎn)介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向?yàn)榛瘜W(xué)工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國(guó)傳統(tǒng)中藥及臨床上有用核桃青皮來(lái)治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環(huán)境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類(lèi)、多酚類(lèi)、多糖、二芳基庚烷類(lèi)等[3]，在核桃楸樹(shù)皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報(bào)道較少。目前，天然產(chǎn)物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗(yàn)采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細(xì)胞破碎作用下可以將細(xì)胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達(dá)到提高產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)率的作用。本研究以胡桃醌含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)其在核桃青皮中的提取方法及工藝進(jìn)行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價(jià)值提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國(guó)Sigma公司；甲醇，色譜純，美國(guó)Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無(wú)水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機(jī)（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫(yī)療設(shè)備廠）；THS-10智能型超級(jí)恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（湖南長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；超聲提取儀（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預(yù)處理

將核桃鮮果進(jìn)行稱(chēng)重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱(chēng)重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進(jìn)行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，棄去過(guò)大的顆粒，即得試驗(yàn)所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱(chēng)取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘?jiān)^續(xù)加入10倍量的溶劑進(jìn)行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮（溫度不超過(guò)40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測(cè)定

胡桃醌得率的計(jì)算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗(yàn)

浸提時(shí)間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時(shí)間為10、20、30、40、50 min，所有試驗(yàn)提取 1次，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，根據(jù)胡桃醌得率選擇合適的提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)。

1.7正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)選出的浸提時(shí)間、浸提溫度、固液比、超聲時(shí)間條件下進(jìn)行正交試驗(yàn)，因?yàn)樘崛囟仍诔貐^(qū)間對(duì)提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時(shí)間、固液比和超聲時(shí)間作為正交試驗(yàn)的3個(gè)因素，進(jìn)行L9（33）正交試驗(yàn)，因素水平如表1所示。

2結(jié)果與分析

2.1浸提時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來(lái)越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來(lái)，所以胡桃醌得率的升高趨勢(shì)不明顯。因此，提取時(shí)間宜為8 h。

2.2浸提溫度對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當(dāng)提取溫度低于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率沒(méi)有明顯的變化；而當(dāng)提取溫度高于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率明顯下降。這是因?yàn)楹阴S著提取溫度的升高會(huì)隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對(duì)胡桃醌含量影響并不大，考慮到節(jié)約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當(dāng)固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率上升較快；但當(dāng)固液比低于1 g ∶10 mL時(shí)，胡桃醌得率增長(zhǎng)趨勢(shì)比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產(chǎn)成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當(dāng)超聲時(shí)間在10～40 min范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率逐漸增加，這是因?yàn)殡S著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，超聲波對(duì)底物產(chǎn)生的攪拌和空化作用增強(qiáng)，進(jìn)而使溶出物質(zhì)增多；而當(dāng)時(shí)間超過(guò)40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續(xù)的超聲波作用使已經(jīng)溶出的胡桃醌分子結(jié)構(gòu)遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時(shí)間宜選擇40 min。

2.5正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳工藝組合

根據(jù)L9（33）正交試驗(yàn)原理進(jìn)行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗(yàn)，以確定最佳的提取工藝條件。試驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理如表2所示。

3結(jié)論

對(duì)核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進(jìn)行單因素試

驗(yàn)，再根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時(shí)間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學(xué)、合理的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2005.

[2]趙巖，劉淑萍，呂朝霞. 核桃青皮的化學(xué)成分與綜合利用[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工，2008（11）：66-68.

[3]李海洋，韓軍岐，李志西. 核桃青皮有效化學(xué)成分提取分離研究綜述[J]. 現(xiàn)代園藝，2012（15）：9-11.

[4]Toma M，Vinatoru M，Paniwnyk L，et al. Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J]. Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（2）：137-142.

[5]徐懷德. 天然產(chǎn)物提取工藝學(xué)[M]. 北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2006.

[6]陳尚钘，劉誠(chéng)，范國(guó)榮，等.天然產(chǎn)物中活性成分提取分離及分析技術(shù)[J]. 江西林業(yè)科技，2005（3）：32-36.

[7]Vinatoru M，Toma M，Radu O，et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J]. Ultrasonics Sonochemistry，1997，4（2）：135-139.endprint

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗(yàn)對(duì)超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進(jìn)行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無(wú)水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關(guān)鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)： R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項(xiàng)目：貴州省林業(yè)廳項(xiàng)目（編號(hào)：黔林科合[2012]18 號(hào)）；國(guó)家國(guó)際科技合作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2011DFB41640）。

作者簡(jiǎn)介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向?yàn)榛瘜W(xué)工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國(guó)傳統(tǒng)中藥及臨床上有用核桃青皮來(lái)治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環(huán)境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類(lèi)、多酚類(lèi)、多糖、二芳基庚烷類(lèi)等[3]，在核桃楸樹(shù)皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報(bào)道較少。目前，天然產(chǎn)物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗(yàn)采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細(xì)胞破碎作用下可以將細(xì)胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達(dá)到提高產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)率的作用。本研究以胡桃醌含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)其在核桃青皮中的提取方法及工藝進(jìn)行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價(jià)值提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國(guó)Sigma公司；甲醇，色譜純，美國(guó)Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無(wú)水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機(jī)（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫(yī)療設(shè)備廠）；THS-10智能型超級(jí)恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（湖南長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；超聲提取儀（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預(yù)處理

將核桃鮮果進(jìn)行稱(chēng)重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱(chēng)重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進(jìn)行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，棄去過(guò)大的顆粒，即得試驗(yàn)所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱(chēng)取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘?jiān)^續(xù)加入10倍量的溶劑進(jìn)行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮（溫度不超過(guò)40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測(cè)定

胡桃醌得率的計(jì)算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗(yàn)

浸提時(shí)間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時(shí)間為10、20、30、40、50 min，所有試驗(yàn)提取 1次，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，根據(jù)胡桃醌得率選擇合適的提取時(shí)間、提取溫度、固液比、超聲時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)。

1.7正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)選出的浸提時(shí)間、浸提溫度、固液比、超聲時(shí)間條件下進(jìn)行正交試驗(yàn)，因?yàn)樘崛囟仍诔貐^(qū)間對(duì)提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時(shí)間、固液比和超聲時(shí)間作為正交試驗(yàn)的3個(gè)因素，進(jìn)行L9（33）正交試驗(yàn)，因素水平如表1所示。

2結(jié)果與分析

2.1浸提時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來(lái)越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來(lái)，所以胡桃醌得率的升高趨勢(shì)不明顯。因此，提取時(shí)間宜為8 h。

2.2浸提溫度對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當(dāng)提取溫度低于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率沒(méi)有明顯的變化；而當(dāng)提取溫度高于50 ℃時(shí)，胡桃醌得率明顯下降。這是因?yàn)楹阴S著提取溫度的升高會(huì)隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對(duì)胡桃醌含量影響并不大，考慮到節(jié)約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當(dāng)固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率上升較快；但當(dāng)固液比低于1 g ∶10 mL時(shí)，胡桃醌得率增長(zhǎng)趨勢(shì)比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產(chǎn)成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時(shí)間對(duì)胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當(dāng)超聲時(shí)間在10～40 min范圍內(nèi)時(shí)，胡桃醌得率逐漸增加，這是因?yàn)殡S著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，超聲波對(duì)底物產(chǎn)生的攪拌和空化作用增強(qiáng)，進(jìn)而使溶出物質(zhì)增多；而當(dāng)時(shí)間超過(guò)40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續(xù)的超聲波作用使已經(jīng)溶出的胡桃醌分子結(jié)構(gòu)遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時(shí)間宜選擇40 min。

2.5正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳工藝組合

根據(jù)L9（33）正交試驗(yàn)原理進(jìn)行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗(yàn)，以確定最佳的提取工藝條件。試驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理如表2所示。

3結(jié)論

對(duì)核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進(jìn)行單因素試

驗(yàn)，再根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時(shí)間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時(shí)間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學(xué)、合理的理論依據(jù)。

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