• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    山羊分子生物學研究進展駱美蓉

    2014-07-18 21:05:24江明鋒張鵬王永
    江蘇農(nóng)業(yè)科學 2014年1期
    關鍵詞:轉(zhuǎn)錄組分子標記山羊

    江明鋒 張鵬 王永

    摘要:綜述了近年來國內(nèi)外關于山羊分子生物學方面的研究進展,介紹了山羊起源分化和遺傳多樣性的分子標記研究、山羊相關經(jīng)濟性狀的主要功能基因以及山羊在基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組方面的研究進展,討論了山羊研究存在的問題和發(fā)展趨勢。

    關鍵詞:山羊;分子標記;功能基因;基因組;轉(zhuǎn)錄組;蛋白質(zhì)組

    中圖分類號: S827.2文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2014)01-0046-04

    收稿日期:2013-04-22

    資助項目:國家科技支撐計劃(編號:2012BAD13B06);教育部科學技術研究重點項目(編號:210265);四川省科技創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)鏈示范工程重大項目(編號:2011NZ0003);西南民族大學研究生創(chuàng)新型科研項目(編號:CX2011SP44)。

    作者簡介:駱美蓉(1987—),女,河南信陽人,碩士研究生,主要從事羊遺傳育種方面的研究。E-mail:xygzlmr@126.com。

    通信作者:王永,博士,教授,博士生導師,研究方向為動物遺傳育種。E-mail:wangyong010101@swun.cn。山羊是世界上最早馴養(yǎng)的家畜之一,其品種多樣,適應性強,分布廣泛,經(jīng)濟效益大。據(jù)聯(lián)合國糧食和農(nóng)業(yè)組織統(tǒng)計,目前世界上共有1 000多個山羊品種,近8.3億只山羊。近年來,發(fā)展中國家養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展迅速。我國已成為世界上山羊飼養(yǎng)量、出欄量、羊肉產(chǎn)量最多的國家。同時山羊產(chǎn)業(yè)成為我國大部分地區(qū)畜牧業(yè)的重要支柱。但是國內(nèi)外關于山羊的研究尤其是功能基因的研究大多是通過牛和綿羊相關研究成果來進行的。山羊在分子生物學上的研究遠落后于豬、牛、綿羊等家畜。隨著山羊全基因組測序的完成和全基因組圖譜的公布,山羊的科學研究隨之進入到一個全新時代。

    1山羊分子標記及遺傳多樣性分析

    分子標記是以DNA多態(tài)性為基礎的遺傳標記,是DNA水平上遺傳變異的直接反映,目前已發(fā)展到第3代分子標記。在山羊產(chǎn)業(yè)中應用廣泛的分子標記技術包括限制性片段長度多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)、隨機擴增多態(tài)性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)、單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNP)標記、簡單重復序列(simple sequence repeat,SSR)等。

    山羊分子標記研究主要應用于山羊的起源分化和遺傳多樣性分析。雖然科研人員早在1962年就開始研究家山羊的起源和遺傳多樣性,但至今家山羊的起源和遺傳多樣性仍具有不確定性[1]。近10年來,家山羊起源分化和遺傳多樣性的研究主要是通過線粒體DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)進行的。mtDNA基因組序列一般無間隔、結(jié)構簡單、突變率高、嚴格的母系遺傳,而這是其成為首要研究對象的主要原因??蒲腥藛T通過對mtDNA的研究發(fā)現(xiàn)山羊有7個支系起源(A至G),其中B支系只存在于亞洲東南部。因此Lin等對東南亞12個國家共計1 661只山羊mtDNA進行RFLP分析,以期進一步探究亞洲山羊的起源[1]。結(jié)果表明,亞洲家山羊可分為4個支系:A和B支系山羊占主導地位,C和D支系山羊頻率低且只存在于中國、巴基斯坦和印度。近期,A支系山羊向東南亞地區(qū)滲透,但B支系山羊在東南亞仍具有優(yōu)勢,且有向東南方向增加的趨勢。王杰等也根據(jù)前人的研究對我國7個山羊品種的mtDNA D-loop區(qū)進行了RFLP標記,發(fā)現(xiàn)我國山羊有4個支系起源(A至D)且具有很高的遺傳多樣性[2]。王志剛等對我國39個地方山羊品種進行SSR標記,其關于我國山羊遺傳多樣性的分析與王杰一致[3]??偟膩碚f,我國山羊具有較高水平的遺傳多樣性,其中北方地區(qū)山羊遺傳多樣性最為豐富。遺傳變異主要存在于品種內(nèi),品種間遺傳分化處于中等水平,選育潛力大。在遺傳資源保護方面,應防止盲目雜交并選取具有代表性的山羊品種進行保護。

    2山羊主要功能基因研究

    山羊在分子生物學方面研究最多的是山羊疾病及其抗病基因,其次是山羊經(jīng)濟性狀相關基因的研究。據(jù)此,將山羊功能基因劃分為毛、肉、乳、繁殖、免疫5個性狀進行闡述。表1列舉了山羊這5個性狀的主要相關基因。表1山羊候選基因及其與性狀間的關系

    候選基因1性狀1候選基因與性狀的相關性1 文獻生長激素基因1體重1AACD基因型抑制體重增加1[4]肌肉生長抑制素1肉產(chǎn)量1AB基因型和ABCD基因型促進體重增加1[5]促性腺激素釋放激素1繁殖性狀1CC和CT基因型能增加產(chǎn)羔數(shù)1[7]酪蛋白相關基因1產(chǎn)乳量及風味1豐富的SNP可增加產(chǎn)乳量,乳糖、脂肪、蛋白的含量1[8]POU1F11產(chǎn)乳量、質(zhì)量及絨產(chǎn)量1豐富的SNP可提高產(chǎn)乳量,提高乳質(zhì)量;其TT基因型增加絨產(chǎn)量1[9,11]泌乳素基因1絨長度1其X76049:g.576位點為C時增加絨長1[10]褪黑激素受體基因1絨產(chǎn)量1其基因型為AA時增加絨產(chǎn)量1[12]主要組織相容性復合體1免疫性狀1對動物抗病、抗逆性和免疫調(diào)節(jié)有重要作用1[13]

    2.1影響山羊產(chǎn)肉性狀的功能基因

    波爾山羊作為優(yōu)秀的肉用山羊品種被引進我國,以期提高我國本地山羊的產(chǎn)肉性能。為找到增加山羊產(chǎn)肉量的主效基因以更好地進行山羊繁殖育種工作,Hua等對波爾山羊的生長激素基因進行了研究[4],Zhang等對其肌肉生長抑制素基因進行了變異分析[5],結(jié)果發(fā)現(xiàn),生長激素基因的AACD基因型對體重的增加有抑制作用而其他基因型對體重、體長的影響不明顯;肌肉生長抑制素基因的AB基因型和合并基因型ABCD能夠顯著促進山羊體重的增加。

    2.2影響山羊繁殖性狀的功能基因

    對山羊繁殖性狀功能基因的研究主要集中在綿羊多胎的分子標記基因上,如骨形態(tài)發(fā)生蛋白及其受體基因和生長分化因子9等。而Ahlawat等研究發(fā)現(xiàn)印度本地山羊中并未發(fā)現(xiàn)這些基因存在與多胎性狀相關的突變,這與我國科研人員在研究本地山羊多胎相關基因時情況相似[6]。據(jù)此可看出依靠綿羊繁殖性狀的基因?qū)ι窖蚍敝诚嚓P功能基因的研究具有一定的局限性。嚴泉梅等對促性腺激素釋放激素(GnRH)基因遺傳變異的研究突破這一局限,發(fā)現(xiàn)在人類中與性早熟相關的GnRH的CC基因型和CT基因型能使西農(nóng)薩能奶山羊和布爾山羊的產(chǎn)羔數(shù)顯著增加[7]。

    2.3影響泌乳性狀的功能基因

    近期科研人員在尋找人類代乳品時發(fā)現(xiàn)山羊奶最為適合。這一結(jié)論促使羊奶相關特性和功能基因得到進一步的研究。Dagnachew等進行了酪蛋白相關基因單核苷酸多態(tài)性與山羊泌乳量相關性的研究,結(jié)果顯示CSN1S1和CSN3的單核苷酸多態(tài)性對山羊乳產(chǎn)量、風味及質(zhì)量有顯著的加性效益且起主導作用[8]。Daga等通過POU1F1基因多態(tài)性研究發(fā)現(xiàn),其第2外顯子17位點的變異可使乳產(chǎn)量增加;58位點的變異通過增加乳中蛋白質(zhì)和脂肪的含量來提高羊奶質(zhì)量[9]??偟膩碚f,改善山羊奶風味是目前奶山羊育種面臨的最迫切也是最重要的問題,而這也是將來開展相關研究的方向。

    2.4影響產(chǎn)絨或產(chǎn)毛性狀的功能基因

    除去研究人員普遍認同的角蛋白基因和角蛋白輔助蛋白基因外,Lan等將對乳產(chǎn)量有顯著影響的泌乳素(PRL)基因和對PRL有正調(diào)節(jié)作用的POU1F1基因多態(tài)性與山羊絨性狀進行相關性分析[10-11],結(jié)果發(fā)現(xiàn)PRL基因有一特殊變異與絨長度相關,且其等位基因為C時山羊絨更長;POU1F1的TT基因型與山羊絨產(chǎn)量正相關。Lan等發(fā)現(xiàn)能提高乳產(chǎn)量的功能基因也與絨產(chǎn)量相關,從而為白絨山羊產(chǎn)絨量的提高提供了輔助選擇的分子標記。繁殖性狀相關功能基因與絨產(chǎn)量關系的探討也是十分重要的。劉斌等選擇褪黑激素受體(melatonin receptor,MTNR)基因來進行研究,結(jié)果在MTR1b基因外顯子2中檢測到AA、AB、BB 3種基因型[12]。通過與山羊絨相關性分析發(fā)現(xiàn):AA基因型對絨產(chǎn)量有顯著影響;與年齡的互作效應對山羊絨厚度有顯著影響,對絨細度存在邊際顯著影響。

    2.5山羊免疫相關功能基因

    主要組織相容性復合體(MHC)在動物免疫應答反應中起著重要作用。更為重要的是MHC可識別并清除外在抗原且有多個高度多態(tài)的基因位點都與免疫相關。以前關于山羊MHC的研究多集中在Class II區(qū)DR和DQ亞區(qū)基因的多態(tài)性上,而最近公布的山羊全基因組圖譜對山羊MHC進行了整體研究。研究發(fā)現(xiàn),山羊MHC位于23號染色體,由2個大小分別為2.25 Mb和360 kb的區(qū)域組成。與綿羊MHC相比,山羊MHC含有160個基因,比綿羊MHC少了16個。Dong等通過基因注釋對綿羊、山羊和人MHC上的保守基因進行分析,發(fā)現(xiàn)有些保守基因有倒置情況,但總體來說它們的保守基因表現(xiàn)出高度共線性[13]。它們比較分析的具體情況見圖1。

    3山羊基因組學研究進展

    3.1山羊遺傳連鎖圖譜構建

    遺傳圖譜能夠顯示遺傳標記在連鎖群上的相對位置,也能幫助非模式生物運用比較基因組學進行相關研究。遺傳圖譜的構建是發(fā)現(xiàn)近緣物種間適應表型差異遺傳機制的第一步。因此,Vaiman等早在1996年時就用12個半同胞家系山羊(薩能奶山羊和阿爾卑斯山羊參與雜交)構建得到山羊低分辨率連鎖圖譜[14]。該連鎖圖譜全長為2 300 cM,由219個微衛(wèi)星標記組成,標記物種來源于牛(占總標記數(shù)的74.9%)、綿羊(占總標記數(shù)的20.5%)和山羊(占總標記數(shù)的 4.6%)。其中204個微衛(wèi)星標記整合進了連鎖群,其余的用熒光原位雜交(FISH)法得以物理定位。該山羊連鎖圖譜雖然分辨率低,卻是目前構建最完整的山羊遺傳連鎖圖譜,占山羊基因組的80%。此外,徐磊等、王敏等對絨山羊的11號

    染色體和X染色體用SSR技術構建了連鎖圖譜,其中徐磊等構建的X染色體遺傳連鎖圖譜與英國羅斯林研究所公布的SM 47綿羊連鎖圖標記順序一致[15-16]。他們與Vaiman等所構建的遺傳圖譜的比較見圖2。

    3.2山羊基因組測序

    3.2.1山羊線粒體基因組Parma等在2003年首次完成了長度為16 640 bp的山羊線粒體基因組的全部測序工作[17]。其中包括了rRNA(12S和16S)、22個tRNA和13個蛋白編碼區(qū)的基因序列。通過比較山羊、牛和綿羊的蛋白編碼區(qū)基因,發(fā)現(xiàn)山羊與牛之間的差異為1.2%~12.2%(均值為73%);山羊與綿羊之間的差異范圍是0~15.6%(均值為47%)。只從差異均值來看,山羊與綿羊的親緣關系更近。Hassanin等[18]對山羊線粒體基因組進行了重測序,通過與Parma等公布的序列比較發(fā)現(xiàn)其測序結(jié)果存在很多錯誤:Parma等所測基因組序列僅占總長度的44.5%;1 201 nt 和 2 384 nt 片段測序錯誤率極高。此外,Hassanin還發(fā)現(xiàn)了核線粒體假基因(Numt)的存在,并通過克隆最終得到2個Numt序列。通過對髯羊(Ammotragus)、山羊(Capra)、塔爾羊(Hemitragus)和巖羊(Pseudois)假基因系統(tǒng)發(fā)育學方面的分析,推測出它們擁有共同的祖先。

    3.2.2山羊全基因組雖然我國山羊分布范圍及經(jīng)濟效益明顯大于綿羊,但與綿羊相比山羊基因組的研究嚴重滯后。近期中國科學院昆明動物研究所聯(lián)合國內(nèi)外大學展開了山羊基因組的研究,并于2012年12月公布了全球首個山羊全基因組圖譜,同時建立了山羊基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。研究中,Dong等采用第2代測序技術(NGS)對1只雌性云南黑山羊2.66 Gb的基因組進行了測序[13]。測序所得短序列通過基因組酶切圖譜(whole-genome mapping)技術和傳統(tǒng)的組裝方法進行拼接得到超長scaffold,然后利用與牛的保守共線性(conserved synteny)將scaffold定位到染色體上。將所測基因組從蛋白編碼基因、非蛋白編碼基因、轉(zhuǎn)座子和基因家族4個方面進行基因注釋,共得到22 175個蛋白編碼基因,其中 17 927 個基因也在轉(zhuǎn)錄組測序中檢測到。對注釋基因的分析主要從基因家族進化和正選擇基因2個方面進行。

    從基因家族進化方面分析注釋基因發(fā)現(xiàn)山羊與牛有 17 129 對直系同源基因,與人類有16 771對直系同源基因。在所構建的系統(tǒng)樹圖中可以看出山羊和牛在2 300萬年前有共同祖先。但在將與基因組和基因進化相關的轉(zhuǎn)座子進行比較時發(fā)現(xiàn),?;蚪M中SINE-BovA型的轉(zhuǎn)座子多,而山羊基因組中則是SINE-tRNA轉(zhuǎn)座子數(shù)量大。在將山羊基因組中各種類型的轉(zhuǎn)座子分化程度進行分析時發(fā)現(xiàn)較近時期分化的轉(zhuǎn)座子很少。在正選擇基因方面主要研究了和免疫相關的主要組織相容性復合體(MHC)。MHC的詳細信息對山羊的免疫和接種具有重要價值。

    4山羊轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學研究進展

    基于山羊的重要經(jīng)濟價值,山羊轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學研究集中在山羊絨。Dong等通過對絨山羊初級毛囊和次級毛囊轉(zhuǎn)錄組的比較分析得到山羊絨的功能基因[13]。研究表明,2個角蛋白基因和10個角蛋白輔助蛋白基因在羊絨纖維結(jié)構中起著重要作用;纖維母細胞生長因子21基因、酪蛋白激酶Iε基因與山羊絨性狀相關;天冬氨酰合成酶、磷酸絲氨酸轉(zhuǎn)氨酶、α-1蛋白、橋粒芯蛋白等與毛囊發(fā)育和毛囊形態(tài)發(fā)生有關。其中角蛋白輔助蛋白可分為高硫角蛋白輔助蛋白、超高硫角蛋白輔助蛋白和高甘氨酸酪氨酸蛋白三大類[13]。他們在3類角蛋白輔助蛋白的進一步研究中發(fā)現(xiàn)超高硫角蛋白輔助蛋白對羊絨的形成起著十分重要的作用。松杰等通過構建絨山羊皮膚蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜,對絨山羊皮膚的蛋白質(zhì)分布和表達情況有了全面了解,為絨山羊皮膚蛋白質(zhì)組成和差異蛋白質(zhì)的研究奠定了基礎[19]。

    5小結(jié)與展望

    雖然山羊分子生物學方面的研究在逐年增加并取得了不少的成績,但仍不能滿足山羊市場快速增加所產(chǎn)生的需求。最近山羊全基因組序列的公布和轉(zhuǎn)錄組方面的研究拓展了山羊功能基因的研究方法,為山羊生長發(fā)育、生理機理、抗病機理分子機制的研究奠定了基礎,為構建山羊基因芯片、分析預測基因功能拓展了研究空間。但不可否認的是山羊基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組的研究起步較晚,還有很多相關信息需要進一步地分析鑒定。現(xiàn)如今山羊功能基因的研究被局限在了功能基因單核苷酸多態(tài)性與生產(chǎn)性能相關性的研究上,而其研究方法多是根據(jù)牛和綿羊的相關研究成果進行的。更不利的是,功能基因多態(tài)性的研究因山羊品種、所處環(huán)境等存在差異。就目前的研究而言,山羊主效功能基因仍未被發(fā)現(xiàn)。因此,還必須對大量未知的和已知的基因和蛋白進行更為詳盡的分析和鑒定,從而為山羊主要經(jīng)濟性狀的遺傳改良提供理論依據(jù)和技術支撐,為山羊的良種繁育、遺傳多樣性的保護奠定基礎。

    參考文獻:

    [1]Lin BZ,Odahara S,Ishida M,et al. Molecular phylogeography and genetic diversity of East Asian goats[J]. Animal Genetics,2013,44(1):79-85.

    [2]王杰,陳玉林,楊朝霞. 中國山羊mtDNA D-loop遺傳多態(tài)性研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學,2010,38(4):1743-1745.

    [3]王志剛,吳建平,劉丑生,等. 用微衛(wèi)星標記分析中國山羊品種的遺傳多樣性和群體遺傳結(jié)構[J]. 農(nóng)業(yè)生物技術學報,2010,18(5):836-845.

    [4]Hua GH,Chen SL,Yu JN,et al. Polymorphism of the growth hormone gene and its association with growth traits in Boer goat bucks[J]. Meat Science,2009,81(2):391-395.

    [5]Zhang C,Liu Y,Xu D,et al. Polymorphisms of myostatin gene(MSTN) in four goat breeds and their effects on Boer goat growth performance[J]. Molecular Biology Reports,2012,39(3):3081-3087.

    [6]Ahlawat S,Sharma R,Maitra A. Screening of indigenous goats for prolificacy associated DNA markers of sheep[J]. Gene,2013,517(1):128-131.

    [7]顏泉梅,陳秋菊,崔易虹,等. 西農(nóng)莎能奶山羊和布爾山羊GnRH基因多態(tài)性與產(chǎn)羔數(shù)的相關分析[J]. 中國獸醫(yī)學報,2011,31(11):1667-1671.

    [8]Dagnachew B S,Thaller G,Lien S,et al. Casein SNP in norwegian goats:additive and dominance effects on milk composition and quality[J]. Genetics Selection Evolution,2011,43:31.

    [9]Daga C,Paludo M,Luridiana S,et al. Identification of novel SNPs in the Sarda breed goats POU1F1 gene and their association with milk productive performance[J]. Molecular Biology Reports,2013,40(4):2829-2835.

    [10]Lan X Y,Pan Ch Y,Chen H,et al. Novel SNP of the goat prolactin gene(PRL)associated with cashmere traits[J]. Journal of Applied Genetics,2009,50(1):51-54.

    [11]Lan X Y,Shu J H,Chen H,et al. A PstI polymorphism at 3UTR of goat POU1F1 gene and its effect on cashmere production[J]. Molecular Biology Reports,2009,36(6):1371-1374.

    [12]劉斌,李金泉,趙存發(fā),等. 內(nèi)蒙古白絨山羊褪黑激素受體基因SNP與產(chǎn)絨性狀的關聯(lián)[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學,2012,45(19):4092-4101.

    [13]Dong Y,Xie M,Jiang Y,et al. Sequencing and automated whole-genome optical mapping of the genome of a domestic goat(Capra hircus)[J]. Nature Biotechnology,2013,31(2):135-141.

    [14]Vaiman D,Schibler L,Bourgeois F,et al. A genetic linkage map of the male goat genome[J]. Genetics,1996,144(1):279-305.

    [15]徐磊,姚繼廣,楊子森,等. 絨山羊X染色體7個微衛(wèi)星標記的遺傳連鎖圖譜的構建[J]. 中國畜牧獸醫(yī),2010,37(7):109-112.

    [16]王敏,賴雙英,喬峰,等. 絨山羊11號染色體7個微衛(wèi)星標記的連鎖圖譜的構建[J]. 中國畜牧獸醫(yī),2011,38(4):132-136.

    [17]Parma P,F(xiàn)eligini M,Greeppi G,et al. The complete nucleotide sequence of goat(Capra hircus) mitochondrial genome[J]. DNA Seq,2003,14(3):199-203.

    [18]Hassanin A,Bonillo C,Nguyen B X,et al. Comparisons between mitochondrial genomes of domestic goat(Capra hircus) reveal the presence of numts and multiple sequencing errors[J]. Mitochondrial DNA,2010,21(3-4):68-76.

    [19]松杰,董揚,孟麗云,等. 內(nèi)蒙古絨山羊皮膚蛋白質(zhì)雙向電泳條件優(yōu)化及圖譜建立[J]. 中國畜牧獸醫(yī),2012,39(7):11-14.湯雪燕,趙統(tǒng)利,邵小斌,等. 植物組織培養(yǎng)的污染防治[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學,2014,42(1):50-52.

    猜你喜歡
    轉(zhuǎn)錄組分子標記山羊
    夏季如何讓山羊增膘
    山羊受騙
    聰明的山羊
    基于轉(zhuǎn)錄組測序的山茱萸次生代謝生物合成相關基因的挖掘
    金釵石斛轉(zhuǎn)錄組SSR位點信息分析
    軟棗獼猴桃性別相關的SRAP分子標記
    人參屬藥用植物轉(zhuǎn)錄組研究進展
    大白菜種質(zhì)資源抗根腫病基因CRa和CRb的分子標記鑒定與分析
    玉米大斑病的研究進展
    大豆轉(zhuǎn)錄組測序研究進展綜述
    日韩av在线大香蕉| 在线天堂最新版资源| av国产免费在线观看| 亚洲无线在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久99久视频精品免费| 99久久成人亚洲精品观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 小说图片视频综合网站| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲av熟女| 国产69精品久久久久777片| 看黄色毛片网站| 两个人的视频大全免费| 国国产精品蜜臀av免费| 欧美xxxx性猛交bbbb| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 欧美精品啪啪一区二区三区| 一a级毛片在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲欧美精品综合久久99| 午夜日韩欧美国产| 午夜影院日韩av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| www.www免费av| 亚洲不卡免费看| 免费看光身美女| 波多野结衣高清无吗| 长腿黑丝高跟| 国产中年淑女户外野战色| 99久久精品一区二区三区| 国产午夜福利久久久久久| 我的女老师完整版在线观看| 毛片女人毛片| 国产精品野战在线观看| 欧美日韩黄片免| 色吧在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 日本一本二区三区精品| 日韩欧美 国产精品| 亚洲av美国av| 日本一二三区视频观看| 久久久精品大字幕| 中文字幕av成人在线电影| 国产国拍精品亚洲av在线观看| videossex国产| 免费黄网站久久成人精品| 国产探花极品一区二区| 一级a爱片免费观看的视频| 嫩草影院精品99| 很黄的视频免费| 久久久久久久久中文| 亚洲专区中文字幕在线| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲四区av| 老女人水多毛片| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 亚洲七黄色美女视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 色5月婷婷丁香| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲内射少妇av| 在现免费观看毛片| 在线国产一区二区在线| 美女大奶头视频| 黄色视频,在线免费观看| 成人av在线播放网站| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲精品在线观看二区| 99九九线精品视频在线观看视频| 韩国av在线不卡| 国产在线男女| 国产精品福利在线免费观看| 97超视频在线观看视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 免费看av在线观看网站| 少妇高潮的动态图| 久久这里只有精品中国| 好男人在线观看高清免费视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 日韩欧美 国产精品| 麻豆国产97在线/欧美| 1024手机看黄色片| 国产精品人妻久久久久久| 日本五十路高清| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品永久免费网站| 1000部很黄的大片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 午夜激情欧美在线| 日韩欧美在线乱码| 日本五十路高清| 免费看美女性在线毛片视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 伦理电影大哥的女人| 国产伦精品一区二区三区视频9| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美最新免费一区二区三区| 看黄色毛片网站| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲专区中文字幕在线| 99国产极品粉嫩在线观看| 波多野结衣高清无吗| 亚洲精品成人久久久久久| www.色视频.com| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 我要看日韩黄色一级片| 一夜夜www| 最后的刺客免费高清国语| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲人成网站在线播| 亚洲第一电影网av| 国产大屁股一区二区在线视频| 九色国产91popny在线| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲男人的天堂狠狠| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国内精品一区二区在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 精品久久久久久久久亚洲 | 色哟哟·www| 日本 欧美在线| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲精品456在线播放app | 少妇丰满av| 亚洲最大成人av| 欧美在线一区亚洲| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产精品野战在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 午夜福利成人在线免费观看| 久久精品91蜜桃| 久久久久久久午夜电影| 成年女人毛片免费观看观看9| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 在线观看一区二区三区| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品国产高清国产av| 色吧在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲av免费在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美成人性av电影在线观看| 免费观看精品视频网站| 亚洲美女黄片视频| 一本久久中文字幕| 尾随美女入室| 国产精品免费一区二区三区在线| 一级黄片播放器| 看免费成人av毛片| 精品久久国产蜜桃| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 很黄的视频免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 一区福利在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲中文字幕日韩| 综合色av麻豆| 亚洲国产精品久久男人天堂| 大型黄色视频在线免费观看| 日韩欧美精品免费久久| 色综合婷婷激情| 一区福利在线观看| aaaaa片日本免费| 国产精品98久久久久久宅男小说| 在线免费观看的www视频| bbb黄色大片| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 99久久成人亚洲精品观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 乱人视频在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲乱码一区二区免费版| videossex国产| 成人精品一区二区免费| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 中国美女看黄片| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日韩人妻高清精品专区| 最后的刺客免费高清国语| 色综合婷婷激情| 久久亚洲精品不卡| 国产亚洲欧美98| 小说图片视频综合网站| 18禁在线播放成人免费| 中文字幕久久专区| 丰满的人妻完整版| 国产精品伦人一区二区| 亚洲 国产 在线| 亚洲av熟女| 精品国内亚洲2022精品成人| 搡老岳熟女国产| 日本欧美国产在线视频| 亚洲av二区三区四区| 久久久久久国产a免费观看| 中文字幕免费在线视频6| av在线蜜桃| 一区二区三区四区激情视频 | 免费看日本二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 性欧美人与动物交配| 国产精品久久久久久久电影| 男女那种视频在线观看| 在线观看一区二区三区| 美女 人体艺术 gogo| 国产精品乱码一区二三区的特点| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲男人的天堂狠狠| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 偷拍熟女少妇极品色| 观看免费一级毛片| 国产精品无大码| 精品欧美国产一区二区三| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久成人免费电影| 在线看三级毛片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 精品免费久久久久久久清纯| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品,欧美在线| 亚洲欧美激情综合另类| ponron亚洲| 欧美zozozo另类| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 久久精品国产自在天天线| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产黄a三级三级三级人| 九九爱精品视频在线观看| 波多野结衣高清无吗| 最后的刺客免费高清国语| 成人永久免费在线观看视频| 久久久久久国产a免费观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲天堂国产精品一区在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 午夜爱爱视频在线播放| 国产极品精品免费视频能看的| 深爱激情五月婷婷| 中文字幕av在线有码专区| 丰满人妻一区二区三区视频av| xxxwww97欧美| 午夜福利高清视频| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产精品三级大全| 天堂影院成人在线观看| 久久这里只有精品中国| 如何舔出高潮| 人人妻人人澡欧美一区二区| 美女 人体艺术 gogo| 麻豆成人av在线观看| 一个人免费在线观看电影| 美女被艹到高潮喷水动态| 99热网站在线观看| 日本三级黄在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲专区中文字幕在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 看十八女毛片水多多多| 免费大片18禁| 久久久久久久久中文| 88av欧美| 老女人水多毛片| 黄片wwwwww| 久久久久性生活片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精华一区二区三区| 精品不卡国产一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 18+在线观看网站| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲人成网站在线播| av在线观看视频网站免费| 日韩亚洲欧美综合| 一级黄色大片毛片| 国产精品久久久久久av不卡| 内射极品少妇av片p| 久久久久久大精品| 日日夜夜操网爽| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品久久久久久成人av| 亚洲精品成人久久久久久| 国产中年淑女户外野战色| 色哟哟哟哟哟哟| 中国美女看黄片| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 搡老妇女老女人老熟妇| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 免费观看精品视频网站| 深夜精品福利| av在线老鸭窝| 久久中文看片网| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲最大成人av| 免费在线观看日本一区| 国产精品人妻久久久影院| 色尼玛亚洲综合影院| 五月伊人婷婷丁香| 成年免费大片在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 波野结衣二区三区在线| 观看美女的网站| 在线播放无遮挡| 成年女人永久免费观看视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲av.av天堂| 午夜福利成人在线免费观看| 午夜福利欧美成人| 精品日产1卡2卡| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 免费看美女性在线毛片视频| 赤兔流量卡办理| 久久精品影院6| 精品久久久久久久久久免费视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 1000部很黄的大片| 亚洲最大成人手机在线| 99视频精品全部免费 在线| 欧美激情在线99| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 我要看日韩黄色一级片| 国产伦精品一区二区三区四那| 一本精品99久久精品77| 搡老岳熟女国产| 久久久色成人| 日本成人三级电影网站| 99久久无色码亚洲精品果冻| 一个人看视频在线观看www免费| 精品乱码久久久久久99久播| 精品日产1卡2卡| av中文乱码字幕在线| 精品欧美国产一区二区三| 在线a可以看的网站| 日日干狠狠操夜夜爽| 搡老熟女国产l中国老女人| 男女边吃奶边做爰视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 他把我摸到了高潮在线观看| 性欧美人与动物交配| 日韩欧美国产一区二区入口| 无人区码免费观看不卡| 欧美+亚洲+日韩+国产| 好男人在线观看高清免费视频| 一个人看视频在线观看www免费| 久久久久久久午夜电影| 中文字幕久久专区| 亚洲av成人av| 精品久久久噜噜| 国产精品,欧美在线| 亚洲图色成人| 成人国产麻豆网| 午夜激情欧美在线| 男人舔奶头视频| 国产精品一区www在线观看 | 在现免费观看毛片| 国产午夜福利久久久久久| 日韩欧美精品免费久久| 国产黄片美女视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产亚洲精品av在线| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久人妻av系列| 精品一区二区免费观看| 级片在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品永久免费网站| www.色视频.com| 别揉我奶头 嗯啊视频| avwww免费| 精品日产1卡2卡| 色噜噜av男人的天堂激情| 如何舔出高潮| 日韩精品有码人妻一区| 国产久久久一区二区三区| 99久久精品热视频| 天堂影院成人在线观看| 日韩欧美三级三区| 国内精品久久久久精免费| 亚洲av免费在线观看| 观看免费一级毛片| 波多野结衣高清作品| 精品久久久噜噜| 天堂√8在线中文| 中文字幕久久专区| 亚洲无线在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 九九爱精品视频在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美丝袜亚洲另类 | 99热6这里只有精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 成人av在线播放网站| 久久热精品热| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲专区中文字幕在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产爱豆传媒在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 国产男靠女视频免费网站| 男人的好看免费观看在线视频| 国产真实乱freesex| 99热6这里只有精品| 午夜激情福利司机影院| 国产精品久久久久久久久免| 熟女人妻精品中文字幕| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲欧美激情综合另类| 久久人妻av系列| netflix在线观看网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 最后的刺客免费高清国语| 中出人妻视频一区二区| 在线播放无遮挡| 日本免费一区二区三区高清不卡| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美xxxx性猛交bbbb| 精品一区二区三区av网在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 又爽又黄无遮挡网站| 美女免费视频网站| 日韩欧美在线二视频| 久久久成人免费电影| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产黄a三级三级三级人| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美精品国产亚洲| 少妇的逼水好多| 国产精品精品国产色婷婷| 伦精品一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频 | 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 精品日产1卡2卡| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲av成人av| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| av在线亚洲专区| 日日干狠狠操夜夜爽| 在线a可以看的网站| 1024手机看黄色片| 神马国产精品三级电影在线观看| aaaaa片日本免费| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久久久久伊人网av| 亚洲在线自拍视频| 久久久久久大精品| 日韩国内少妇激情av| 岛国在线免费视频观看| 欧美区成人在线视频| 麻豆成人午夜福利视频| av在线观看视频网站免费| 99热这里只有是精品在线观看| 波多野结衣高清无吗| 日本黄色片子视频| 日韩精品有码人妻一区| 精品久久久噜噜| 丰满乱子伦码专区| av在线亚洲专区| 性插视频无遮挡在线免费观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 身体一侧抽搐| 亚洲人与动物交配视频| 国产 一区精品| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产高清激情床上av| 内地一区二区视频在线| 亚洲自偷自拍三级| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国内精品一区二区在线观看| 午夜免费激情av| 日韩欧美 国产精品| 国产成人av教育| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲真实伦在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 日韩人妻高清精品专区| 91精品国产九色| 久久久久久久久久黄片| 午夜日韩欧美国产| 丝袜美腿在线中文| 国内精品美女久久久久久| 成年免费大片在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 国产精品久久电影中文字幕| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 欧美丝袜亚洲另类 | 国产高清三级在线| 91久久精品国产一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 最近最新免费中文字幕在线| 成人av一区二区三区在线看| 欧美3d第一页| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 久久久久久久久中文| 啪啪无遮挡十八禁网站| 色哟哟哟哟哟哟| 麻豆av噜噜一区二区三区| 久久这里只有精品中国| 午夜视频国产福利| 日本 欧美在线| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 天堂动漫精品| 国产精品乱码一区二三区的特点| 精品久久久久久久末码| ponron亚洲| 中出人妻视频一区二区| 欧美精品国产亚洲| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲成人久久性| 99热这里只有是精品在线观看| avwww免费| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产精品1区2区在线观看.| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久精品国产亚洲网站| 丰满的人妻完整版| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日韩欧美国产一区二区入口| 日韩欧美国产在线观看| 欧美一区二区亚洲| 国产精品久久久久久久电影| 99热这里只有是精品在线观看| 成人国产麻豆网| 国产在线男女| 亚洲精华国产精华精| 日韩欧美国产一区二区入口| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品久久国产蜜桃| 白带黄色成豆腐渣| 熟女人妻精品中文字幕| 久久久成人免费电影| 国产成人一区二区在线| 日本欧美国产在线视频| 精品久久久久久久久亚洲 | 亚洲av一区综合| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久草成人影院| 久久精品影院6| 色综合色国产| 国产成人av教育| 免费电影在线观看免费观看| 成人永久免费在线观看视频| 成年人黄色毛片网站| www日本黄色视频网| 国产av麻豆久久久久久久| 欧美成人a在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 观看免费一级毛片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 三级国产精品欧美在线观看| 日韩欧美在线二视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 永久网站在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美3d第一页| 精品乱码久久久久久99久播| 真人做人爱边吃奶动态| 免费大片18禁| 精品福利观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 1000部很黄的大片| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产不卡一卡二| 一本精品99久久精品77| 亚洲七黄色美女视频| 国产乱人视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久6这里有精品| 免费看a级黄色片|