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    新城疫病毒LaSota株的毒株復(fù)壯鑒定試驗(yàn)

    2014-07-16 08:24:00戴建華馬晨輝王永娟
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年3期
    關(guān)鍵詞:鑒定新城疫

    戴建華+馬晨輝+王永娟

    摘要:將凍存已久的新城疫病毒LaSota株在雞胚中連傳5代,獲得E1~E5代病毒,選取代表性的E1和E5病毒進(jìn)行病毒生物學(xué)與免疫原性鑒定。通過透射電鏡法觀察病毒粒子形態(tài),利用血凝試驗(yàn)測定病毒的血凝價(jià),借助1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間、雞胚致病率、雞胚半數(shù)感染量等指標(biāo)判定病毒的毒力或致病率,以雛雞免疫試驗(yàn)確定病毒的安全性與免疫原性。結(jié)果表明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面,均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

    關(guān)鍵詞:新城疫;LaSota株;復(fù)壯;鑒定

    中圖分類號: S858.315.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)03-0164-02

    新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽類急性致死性傳染病,傳播速度快,長期以來對我國的養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成了巨大威脅[1-5]。為了防治新城疫,除應(yīng)用嚴(yán)格的生物安全措施、防止新城疫病毒強(qiáng)毒進(jìn)入禽群外,疫苗免疫是必不可少的手段。在我國,使用低毒力活疫苗和油乳劑滅活苗已成為大多數(shù)禽場防制新城疫的常規(guī)手段[6]。新城疫病毒LaSota株是我國普遍使用的疫苗株,本試驗(yàn)復(fù)壯的毒株是1986年從英國中央獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所保存的凍干毒,作為疫苗毒種,筆者對其生物學(xué)和免疫學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定,現(xiàn)將有關(guān)試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    新城疫病毒LaSota株由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所提供;新城疫病毒標(biāo)準(zhǔn)株F48E8購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;SPF雞胚購自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司;SPF雞購自山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院SPF雞場。

    1.2 LaSota毒株的復(fù)壯與傳代

    對保存的凍干毒以生理鹽水稀釋100倍后,接種 0.1 mL 于10日齡SPF雞胚,收集24 h后死亡雞胚尿囊液為E0代毒,后將E0代毒按同樣方法在10日齡SPF雞胚中續(xù)傳5次得到E1至E5代病毒。

    1.3 形態(tài)學(xué)觀察

    收集E5代病毒尿囊液,15 000 r/min離心60 min,取沉淀懸液滴于有支持膜的銅網(wǎng)上,10 min后用干凈濾紙從網(wǎng)邊吸去液體,另滴加3%磷鎢酸(pH值6.0)染色2~3 min,之后吸去液體立即進(jìn)行透射電鏡觀察。

    1.4 病毒血凝試驗(yàn)

    參考文獻(xiàn)[7]的方法,用微量法在V型反應(yīng)板上測定 E0至E5 代病毒的血凝價(jià)。

    1.5 病毒毒力測定

    參考文獻(xiàn)[8]的方法,測定新城疫病毒E1代和E5代病毒的1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)與最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)。雞或雞胚的樣本數(shù)均為10。

    1.6 病毒EID50測定

    參考文獻(xiàn)[9]的方法,對E1代和E5代病毒用滅菌生理鹽水作10倍梯度稀釋,各取0.1 mL 10-7、10-8、10-9 3個稀釋度病毒液尿囊腔內(nèi)接種10日齡SPF雞胚5個,棄去48 h前死亡的雞胚,隨時(shí)取出48~120 h死亡的雞胚,2~8 ℃冷卻后收獲尿囊液,同一稀釋度的尿囊液等量混合,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),至120 h取出所有活胚,逐個收獲尿囊液,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),紅細(xì)胞凝集價(jià)≥1 ∶ 128者判為感染,計(jì)算雞胚半數(shù)感染量(EID50)。

    1.7 雞胚致病率測定

    取E1代和E5代病毒,用滅菌生理鹽水稀釋100倍,按照每胚0.1 mL劑量尿囊腔接種10日齡SPF雞胚10個,置 37 ℃ 繼續(xù)孵育,記錄24~120 h內(nèi)死亡雞胚數(shù)和胎兒病變。

    1.8 安全性測定

    將20羽5日齡SPF雛雞隨機(jī)分為2組,每組10羽。其中一組用滴鼻法[8]接種0.05 mL 5倍濃縮的含毒尿囊液,另一組作空白對照。相同條件下隔離飼養(yǎng)10 d,每天記錄雞群情況。

    1.9 免疫原性測定

    取病毒含量不同的E1代和E5代病毒,經(jīng)0.1%甲醛滅活,按LaSota滅活苗質(zhì)量起草說明書方法制備成單苗,按 10 000 EID50、5 000 EID50、1 000 EID50、500 EID50的劑量免疫7日齡SPF雛雞,每個劑量10羽。28日齡時(shí)用100 000 EID50的F48E8強(qiáng)毒株攻擊,120 h內(nèi)記錄死亡率和疫苗的保護(hù)率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果

    通過透射電鏡觀察復(fù)壯后的新城疫病毒粒子,結(jié)果顯示新城疫病毒粒子呈圓形或橢圓形,直徑100~500 nm,外周有囊膜,囊膜上有長約10 nm的纖突(圖1)。

    3 結(jié)論與討論

    透射電鏡觀察結(jié)果顯示,病毒粒子具有明顯的新城疫病毒特征,說明病毒存在,并初步認(rèn)為毒株正確。引進(jìn)的LaSota株經(jīng)復(fù)壯后能在雞胚良好繁殖,在雞胚中連傳5代,雞胚尿囊液中血凝滴度均達(dá)29以上,說明毒株是穩(wěn)定的。從對該毒株系統(tǒng)鑒定的結(jié)果看,其紅細(xì)胞凝集價(jià)、1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)、對雞胚毒力、安全性、免疫原性等都符合新城疫低毒力活疫苗株的要求。

    上述系統(tǒng)的鑒定試驗(yàn)證明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

    參考文獻(xiàn):

    [1]童光志. 動物傳染病學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005.

    [2]梁淑珍,郭 兵,王海風(fēng). 中藥復(fù)方對雞新城疫疫苗免疫效果的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(2):176-178.

    [3]段志強(qiáng),胡 嬌,胡增壘,等. 鵝源新城疫病毒M基因的原核表達(dá)及其多克隆抗體制備[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,28(1):125-130.

    [4]魏 寧,桂文龍,李巨銀,等. 新城疫疫苗及免疫程序?qū)Φ半u免疫效果的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(11):232-234.

    [5]于 洋,封 振,何孔旺,等. 新城疫病毒毒力分子機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013,29(2):435-439.

    [6]楊 煦,劉玉芬,劉懷然. 新城疫疫苗的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2012,2(2):325-327.

    [7]Saif Y M. 禽病學(xué)[M]. 蘇敬良,高福,索勛主,譯. 11版. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:711-733.

    摘要:將凍存已久的新城疫病毒LaSota株在雞胚中連傳5代,獲得E1~E5代病毒,選取代表性的E1和E5病毒進(jìn)行病毒生物學(xué)與免疫原性鑒定。通過透射電鏡法觀察病毒粒子形態(tài),利用血凝試驗(yàn)測定病毒的血凝價(jià),借助1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間、雞胚致病率、雞胚半數(shù)感染量等指標(biāo)判定病毒的毒力或致病率,以雛雞免疫試驗(yàn)確定病毒的安全性與免疫原性。結(jié)果表明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面,均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

    關(guān)鍵詞:新城疫;LaSota株;復(fù)壯;鑒定

    中圖分類號: S858.315.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)03-0164-02

    新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽類急性致死性傳染病,傳播速度快,長期以來對我國的養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成了巨大威脅[1-5]。為了防治新城疫,除應(yīng)用嚴(yán)格的生物安全措施、防止新城疫病毒強(qiáng)毒進(jìn)入禽群外,疫苗免疫是必不可少的手段。在我國,使用低毒力活疫苗和油乳劑滅活苗已成為大多數(shù)禽場防制新城疫的常規(guī)手段[6]。新城疫病毒LaSota株是我國普遍使用的疫苗株,本試驗(yàn)復(fù)壯的毒株是1986年從英國中央獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所保存的凍干毒,作為疫苗毒種,筆者對其生物學(xué)和免疫學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定,現(xiàn)將有關(guān)試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    新城疫病毒LaSota株由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所提供;新城疫病毒標(biāo)準(zhǔn)株F48E8購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;SPF雞胚購自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司;SPF雞購自山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院SPF雞場。

    1.2 LaSota毒株的復(fù)壯與傳代

    對保存的凍干毒以生理鹽水稀釋100倍后,接種 0.1 mL 于10日齡SPF雞胚,收集24 h后死亡雞胚尿囊液為E0代毒,后將E0代毒按同樣方法在10日齡SPF雞胚中續(xù)傳5次得到E1至E5代病毒。

    1.3 形態(tài)學(xué)觀察

    收集E5代病毒尿囊液,15 000 r/min離心60 min,取沉淀懸液滴于有支持膜的銅網(wǎng)上,10 min后用干凈濾紙從網(wǎng)邊吸去液體,另滴加3%磷鎢酸(pH值6.0)染色2~3 min,之后吸去液體立即進(jìn)行透射電鏡觀察。

    1.4 病毒血凝試驗(yàn)

    參考文獻(xiàn)[7]的方法,用微量法在V型反應(yīng)板上測定 E0至E5 代病毒的血凝價(jià)。

    1.5 病毒毒力測定

    參考文獻(xiàn)[8]的方法,測定新城疫病毒E1代和E5代病毒的1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)與最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)。雞或雞胚的樣本數(shù)均為10。

    1.6 病毒EID50測定

    參考文獻(xiàn)[9]的方法,對E1代和E5代病毒用滅菌生理鹽水作10倍梯度稀釋,各取0.1 mL 10-7、10-8、10-9 3個稀釋度病毒液尿囊腔內(nèi)接種10日齡SPF雞胚5個,棄去48 h前死亡的雞胚,隨時(shí)取出48~120 h死亡的雞胚,2~8 ℃冷卻后收獲尿囊液,同一稀釋度的尿囊液等量混合,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),至120 h取出所有活胚,逐個收獲尿囊液,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),紅細(xì)胞凝集價(jià)≥1 ∶ 128者判為感染,計(jì)算雞胚半數(shù)感染量(EID50)。

    1.7 雞胚致病率測定

    取E1代和E5代病毒,用滅菌生理鹽水稀釋100倍,按照每胚0.1 mL劑量尿囊腔接種10日齡SPF雞胚10個,置 37 ℃ 繼續(xù)孵育,記錄24~120 h內(nèi)死亡雞胚數(shù)和胎兒病變。

    1.8 安全性測定

    將20羽5日齡SPF雛雞隨機(jī)分為2組,每組10羽。其中一組用滴鼻法[8]接種0.05 mL 5倍濃縮的含毒尿囊液,另一組作空白對照。相同條件下隔離飼養(yǎng)10 d,每天記錄雞群情況。

    1.9 免疫原性測定

    取病毒含量不同的E1代和E5代病毒,經(jīng)0.1%甲醛滅活,按LaSota滅活苗質(zhì)量起草說明書方法制備成單苗,按 10 000 EID50、5 000 EID50、1 000 EID50、500 EID50的劑量免疫7日齡SPF雛雞,每個劑量10羽。28日齡時(shí)用100 000 EID50的F48E8強(qiáng)毒株攻擊,120 h內(nèi)記錄死亡率和疫苗的保護(hù)率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果

    通過透射電鏡觀察復(fù)壯后的新城疫病毒粒子,結(jié)果顯示新城疫病毒粒子呈圓形或橢圓形,直徑100~500 nm,外周有囊膜,囊膜上有長約10 nm的纖突(圖1)。

    3 結(jié)論與討論

    透射電鏡觀察結(jié)果顯示,病毒粒子具有明顯的新城疫病毒特征,說明病毒存在,并初步認(rèn)為毒株正確。引進(jìn)的LaSota株經(jīng)復(fù)壯后能在雞胚良好繁殖,在雞胚中連傳5代,雞胚尿囊液中血凝滴度均達(dá)29以上,說明毒株是穩(wěn)定的。從對該毒株系統(tǒng)鑒定的結(jié)果看,其紅細(xì)胞凝集價(jià)、1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)、對雞胚毒力、安全性、免疫原性等都符合新城疫低毒力活疫苗株的要求。

    上述系統(tǒng)的鑒定試驗(yàn)證明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

    參考文獻(xiàn):

    [1]童光志. 動物傳染病學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005.

    [2]梁淑珍,郭 兵,王海風(fēng). 中藥復(fù)方對雞新城疫疫苗免疫效果的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(2):176-178.

    [3]段志強(qiáng),胡 嬌,胡增壘,等. 鵝源新城疫病毒M基因的原核表達(dá)及其多克隆抗體制備[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,28(1):125-130.

    [4]魏 寧,桂文龍,李巨銀,等. 新城疫疫苗及免疫程序?qū)Φ半u免疫效果的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(11):232-234.

    [5]于 洋,封 振,何孔旺,等. 新城疫病毒毒力分子機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013,29(2):435-439.

    [6]楊 煦,劉玉芬,劉懷然. 新城疫疫苗的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2012,2(2):325-327.

    [7]Saif Y M. 禽病學(xué)[M]. 蘇敬良,高福,索勛主,譯. 11版. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:711-733.

    摘要:將凍存已久的新城疫病毒LaSota株在雞胚中連傳5代,獲得E1~E5代病毒,選取代表性的E1和E5病毒進(jìn)行病毒生物學(xué)與免疫原性鑒定。通過透射電鏡法觀察病毒粒子形態(tài),利用血凝試驗(yàn)測定病毒的血凝價(jià),借助1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間、雞胚致病率、雞胚半數(shù)感染量等指標(biāo)判定病毒的毒力或致病率,以雛雞免疫試驗(yàn)確定病毒的安全性與免疫原性。結(jié)果表明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面,均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

    關(guān)鍵詞:新城疫;LaSota株;復(fù)壯;鑒定

    中圖分類號: S858.315.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)03-0164-02

    新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽類急性致死性傳染病,傳播速度快,長期以來對我國的養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成了巨大威脅[1-5]。為了防治新城疫,除應(yīng)用嚴(yán)格的生物安全措施、防止新城疫病毒強(qiáng)毒進(jìn)入禽群外,疫苗免疫是必不可少的手段。在我國,使用低毒力活疫苗和油乳劑滅活苗已成為大多數(shù)禽場防制新城疫的常規(guī)手段[6]。新城疫病毒LaSota株是我國普遍使用的疫苗株,本試驗(yàn)復(fù)壯的毒株是1986年從英國中央獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所保存的凍干毒,作為疫苗毒種,筆者對其生物學(xué)和免疫學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定,現(xiàn)將有關(guān)試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    新城疫病毒LaSota株由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所提供;新城疫病毒標(biāo)準(zhǔn)株F48E8購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;SPF雞胚購自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司;SPF雞購自山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院SPF雞場。

    1.2 LaSota毒株的復(fù)壯與傳代

    對保存的凍干毒以生理鹽水稀釋100倍后,接種 0.1 mL 于10日齡SPF雞胚,收集24 h后死亡雞胚尿囊液為E0代毒,后將E0代毒按同樣方法在10日齡SPF雞胚中續(xù)傳5次得到E1至E5代病毒。

    1.3 形態(tài)學(xué)觀察

    收集E5代病毒尿囊液,15 000 r/min離心60 min,取沉淀懸液滴于有支持膜的銅網(wǎng)上,10 min后用干凈濾紙從網(wǎng)邊吸去液體,另滴加3%磷鎢酸(pH值6.0)染色2~3 min,之后吸去液體立即進(jìn)行透射電鏡觀察。

    1.4 病毒血凝試驗(yàn)

    參考文獻(xiàn)[7]的方法,用微量法在V型反應(yīng)板上測定 E0至E5 代病毒的血凝價(jià)。

    1.5 病毒毒力測定

    參考文獻(xiàn)[8]的方法,測定新城疫病毒E1代和E5代病毒的1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)與最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)。雞或雞胚的樣本數(shù)均為10。

    1.6 病毒EID50測定

    參考文獻(xiàn)[9]的方法,對E1代和E5代病毒用滅菌生理鹽水作10倍梯度稀釋,各取0.1 mL 10-7、10-8、10-9 3個稀釋度病毒液尿囊腔內(nèi)接種10日齡SPF雞胚5個,棄去48 h前死亡的雞胚,隨時(shí)取出48~120 h死亡的雞胚,2~8 ℃冷卻后收獲尿囊液,同一稀釋度的尿囊液等量混合,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),至120 h取出所有活胚,逐個收獲尿囊液,分別測定紅細(xì)胞凝集價(jià),紅細(xì)胞凝集價(jià)≥1 ∶ 128者判為感染,計(jì)算雞胚半數(shù)感染量(EID50)。

    1.7 雞胚致病率測定

    取E1代和E5代病毒,用滅菌生理鹽水稀釋100倍,按照每胚0.1 mL劑量尿囊腔接種10日齡SPF雞胚10個,置 37 ℃ 繼續(xù)孵育,記錄24~120 h內(nèi)死亡雞胚數(shù)和胎兒病變。

    1.8 安全性測定

    將20羽5日齡SPF雛雞隨機(jī)分為2組,每組10羽。其中一組用滴鼻法[8]接種0.05 mL 5倍濃縮的含毒尿囊液,另一組作空白對照。相同條件下隔離飼養(yǎng)10 d,每天記錄雞群情況。

    1.9 免疫原性測定

    取病毒含量不同的E1代和E5代病毒,經(jīng)0.1%甲醛滅活,按LaSota滅活苗質(zhì)量起草說明書方法制備成單苗,按 10 000 EID50、5 000 EID50、1 000 EID50、500 EID50的劑量免疫7日齡SPF雛雞,每個劑量10羽。28日齡時(shí)用100 000 EID50的F48E8強(qiáng)毒株攻擊,120 h內(nèi)記錄死亡率和疫苗的保護(hù)率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果

    通過透射電鏡觀察復(fù)壯后的新城疫病毒粒子,結(jié)果顯示新城疫病毒粒子呈圓形或橢圓形,直徑100~500 nm,外周有囊膜,囊膜上有長約10 nm的纖突(圖1)。

    3 結(jié)論與討論

    透射電鏡觀察結(jié)果顯示,病毒粒子具有明顯的新城疫病毒特征,說明病毒存在,并初步認(rèn)為毒株正確。引進(jìn)的LaSota株經(jīng)復(fù)壯后能在雞胚良好繁殖,在雞胚中連傳5代,雞胚尿囊液中血凝滴度均達(dá)29以上,說明毒株是穩(wěn)定的。從對該毒株系統(tǒng)鑒定的結(jié)果看,其紅細(xì)胞凝集價(jià)、1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI)、最小致死量病毒致死雞胚的平均時(shí)間(MDT)、對雞胚毒力、安全性、免疫原性等都符合新城疫低毒力活疫苗株的要求。

    上述系統(tǒng)的鑒定試驗(yàn)證明,引入的LaSota株經(jīng)過復(fù)壯,無論從形態(tài)還是從生化特性、免疫學(xué)特性方面均符合低毒力活疫苗株的要求,可以用作單聯(lián)苗或多聯(lián)苗的制備。

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