11種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

陳小均等

摘要：為篩選高效、安全的殺菌劑用于生產(chǎn)防治，采用菌絲生長(zhǎng)速率法在室內(nèi)進(jìn)行了11種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病病原菌的毒力測(cè)定。篩選出了6種殺菌劑對(duì)Fusarium oxysporum菌絲有顯著的抑制作用，其毒力順序?yàn)椋?5%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑；EC50-EC90分別為0020 9 μg/mL-0.305 3 μg/mL、0.100 7 μg/mL-3.851 2 μg/mL、0.153 9 μg/mL-8.380 9 μg/mL、0.235 5 μg/mL-5.029 6 μg/mL、0.337 μg/mL-83766 μg/mL和0.998 3 μg/mL-1.882 4 μg/mL。F. oxysporum對(duì)50%多菌靈可濕性粉劑敏感。

關(guān)鍵詞：殺菌劑；白術(shù)根腐病；尖孢鐮刀菌；毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)： S435.672 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）03-0084-02

白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz.）屬菊科草本植物，被列為中醫(yī)四大名貴藥材之一，主要以根入藥，具有健脾益氣、燥濕利水之功效[1]。近年來(lái)，貴州省白術(shù)種植面積不斷擴(kuò)大，由于連作，導(dǎo)致白術(shù)根腐病發(fā)生日趨嚴(yán)重，成為白術(shù)生產(chǎn)栽培中主要的病害之一。白術(shù)根腐病主要病原菌為尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）[2-4]，引起干腐。然而，劉英慧等[3]、臧少先等[4]、段明華等[5]報(bào)道還包括半裸鐮刀菌（F.semitectum）、茄病鐮刀菌（F.solani）、燕麥鐮刀菌（F.avenaceum）、木賊鐮刀菌（F. equiseti）、串珠鐮刀菌（F. moniliforme Sheldon）和立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）等病原，常引起根莖腐爛致死苗，重病田塊死苗率高達(dá)80%以上，嚴(yán)重制約了貴州白術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了篩選出防治白術(shù)根腐病的殺菌劑，本試驗(yàn)在室內(nèi)選擇了幾種殺菌劑對(duì)F. osysporum進(jìn)行了毒力測(cè)定，為田間防治提供依據(jù)。

1 材料方法

1.1 供試病原菌

白術(shù)根腐病標(biāo)樣采自貴州省開(kāi)陽(yáng)縣，用組織分離法[6]獲得病原菌。在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，純化后將試管保存于4 ℃下備用。經(jīng)鑒定為尖孢鐮刀菌F. oxysporum。

1.2 供試藥劑

供試藥劑共11種，藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及試驗(yàn)濃度詳見(jiàn)表1。

1.3 毒力測(cè)定

利用生長(zhǎng)速率法對(duì)菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。確定藥劑試驗(yàn)濃度后并配制供試藥劑母液，按照系列稀釋的方法將供試藥劑加入溶化并冷卻至60 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后制成不同濃度梯度（表1）的含藥平板。

將待測(cè)定菌株接種于PDA平板上于28 ℃培養(yǎng)4 d，用打孔器在菌落邊緣打塊，菌餅直徑為5 mm，將這些菌餅轉(zhuǎn)接于有毒培養(yǎng)基中央，帶菌絲一面朝下，以加等量無(wú)菌水的PDA培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每個(gè)藥劑設(shè)6個(gè)處理，4次重復(fù)，28 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，待對(duì)照的菌落接近長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿，用“十”字交叉法測(cè)量各處理菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。利用統(tǒng)計(jì)軟件DPS 7.05進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成幾率值作為縱坐標(biāo)，以藥劑濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，求毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)（r），計(jì)算出各藥劑對(duì)病原菌的抑制中濃度 EC50和EC90。

1.4 計(jì)算公式

抑制率=（對(duì)照菌落直徑-5 mm）-（處理菌落直徑-5 mm）對(duì)照菌落直徑-5 mm×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病尖孢鐮刀菌的毒力活性

供試藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌F. osysporum表現(xiàn)出一定的毒力作用。結(jié)果（表2）顯示，不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同處理濃度之間均表現(xiàn)出不同的殺菌效果，相關(guān)系數(shù)均達(dá)到顯著水平。25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、10%苯醚甲唑水分散粒劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和50%多菌靈可濕性粉劑等6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒力活性，EC50、EC90分別為0.020 9、0.305 3 μg/mL，0100 7、3.851 2 μg/mL，0.337、3.766 μg/mL，0.153 9、8.380 9 μg/mL，0.235 5、5.029 6 μg/mL，0.998 3、1.882 4 μg/mL。其中25%咪鮮胺乳油對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力最強(qiáng)，毒力回歸方程為y=1.099 8x+6.848 4；其次，1%申嗪霉素懸浮劑，毒力回歸方程為y=0.809 7x+5807 4。

2.2 白術(shù)根腐病菌F. oxysporum對(duì)殺菌劑敏感性比較

表1和圖1的EC50值及斜率綜合結(jié)果表明，F(xiàn). oxysporum對(duì)多種殺菌劑均有不同程度的敏感性，其中50%多菌靈可濕性粉劑的斜率最大，表明F. oxysporum對(duì)其敏感性最強(qiáng)；對(duì)25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑的EC50和斜率比較接近，表明這4種藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力相當(dāng)。雖然24%噻呋酰胺懸浮劑和45%敵磺鈉可濕性粉劑的斜率較大，但EC50非常大，表明病原菌對(duì)這2種藥的敏感性較弱，對(duì)菌絲的抑制能力不理想。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，供試藥劑中有6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌有很強(qiáng)的毒力活性，從EC50數(shù)值來(lái)看，不同殺菌劑的毒力依次為：25%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑。其中，25%咪鮮胺乳油對(duì)F. oxysporum菌絲的抑制效果最好；其次，為1%申嗪霉素懸浮劑。以上6種殺菌劑均為高效、低毒、低殘留和廣譜等特點(diǎn)，為了防止連續(xù)單一用藥使病原產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)，因此應(yīng)根據(jù)這些藥的作用機(jī)制不同進(jìn)行輪流施用，以延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生。

化學(xué)防治是農(nóng)業(yè)病害控制一種重要的防治措施，然而，白術(shù)作為特殊的經(jīng)濟(jì)作物，對(duì)農(nóng)藥的殘留要求很嚴(yán)格。但是選擇適宜的防治時(shí)間和防治方法，可以有效地防治白術(shù)根腐病等土傳病害，同時(shí)也可以降低農(nóng)藥在白術(shù)中的殘留。引起白術(shù)根腐病的病原較為復(fù)雜，因此應(yīng)選殺菌譜較廣的殺菌劑才能有效控制不同病原。土壤帶菌和白術(shù)栽培材料帶菌是引起白術(shù)根腐病的初侵染源，對(duì)土壤和白術(shù)栽培材料進(jìn)行藥劑處理，減少初侵染源是有效的防治技術(shù)。結(jié)合生態(tài)學(xué)考慮，以農(nóng)業(yè)防治技術(shù)為主，合理運(yùn)用化學(xué)、生物防治技術(shù)實(shí)行綜合防治，達(dá)到控制病害的目的。

本研究在室內(nèi)采用病原菌菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行毒力測(cè)定，但是在大田中環(huán)境條件復(fù)雜，因此，篩選出的藥劑劑量直接應(yīng)用于大田防治有無(wú)明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]朱意麟，易 蔚，黃克南. 新編中草藥彩色圖譜[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2011：495.

[2]俞永信. 白術(shù)根腐病及其防治[J]. 中草藥，1980，11（2）：81-82.

[3]劉英慧，趙來(lái)順.白術(shù)根腐病研究初報(bào)[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，1991，1（1）：38.

[4]臧少先，安信伯，石麗軍，等. 白術(shù)根腐病癥狀類型及病原鑒定[J]. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，28（3）：73-76.

[5]段明華，原雅玲，趙錦麗，等. 白術(shù)根莖腐爛與栽培措施的相關(guān)性[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，1996，16（5）：24-27.

[6]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998：122.

摘要：為篩選高效、安全的殺菌劑用于生產(chǎn)防治，采用菌絲生長(zhǎng)速率法在室內(nèi)進(jìn)行了11種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病病原菌的毒力測(cè)定。篩選出了6種殺菌劑對(duì)Fusarium oxysporum菌絲有顯著的抑制作用，其毒力順序?yàn)椋?5%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑；EC50-EC90分別為0020 9 μg/mL-0.305 3 μg/mL、0.100 7 μg/mL-3.851 2 μg/mL、0.153 9 μg/mL-8.380 9 μg/mL、0.235 5 μg/mL-5.029 6 μg/mL、0.337 μg/mL-83766 μg/mL和0.998 3 μg/mL-1.882 4 μg/mL。F. oxysporum對(duì)50%多菌靈可濕性粉劑敏感。

關(guān)鍵詞：殺菌劑；白術(shù)根腐??；尖孢鐮刀菌；毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)： S435.672 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）03-0084-02

白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz.）屬菊科草本植物，被列為中醫(yī)四大名貴藥材之一，主要以根入藥，具有健脾益氣、燥濕利水之功效[1]。近年來(lái)，貴州省白術(shù)種植面積不斷擴(kuò)大，由于連作，導(dǎo)致白術(shù)根腐病發(fā)生日趨嚴(yán)重，成為白術(shù)生產(chǎn)栽培中主要的病害之一。白術(shù)根腐病主要病原菌為尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）[2-4]，引起干腐。然而，劉英慧等[3]、臧少先等[4]、段明華等[5]報(bào)道還包括半裸鐮刀菌（F.semitectum）、茄病鐮刀菌（F.solani）、燕麥鐮刀菌（F.avenaceum）、木賊鐮刀菌（F. equiseti）、串珠鐮刀菌（F. moniliforme Sheldon）和立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）等病原，常引起根莖腐爛致死苗，重病田塊死苗率高達(dá)80%以上，嚴(yán)重制約了貴州白術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了篩選出防治白術(shù)根腐病的殺菌劑，本試驗(yàn)在室內(nèi)選擇了幾種殺菌劑對(duì)F. osysporum進(jìn)行了毒力測(cè)定，為田間防治提供依據(jù)。

1 材料方法

1.1 供試病原菌

白術(shù)根腐病標(biāo)樣采自貴州省開(kāi)陽(yáng)縣，用組織分離法[6]獲得病原菌。在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，純化后將試管保存于4 ℃下備用。經(jīng)鑒定為尖孢鐮刀菌F. oxysporum。

1.2 供試藥劑

供試藥劑共11種，藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及試驗(yàn)濃度詳見(jiàn)表1。

1.3 毒力測(cè)定

利用生長(zhǎng)速率法對(duì)菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。確定藥劑試驗(yàn)濃度后并配制供試藥劑母液，按照系列稀釋的方法將供試藥劑加入溶化并冷卻至60 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后制成不同濃度梯度（表1）的含藥平板。

將待測(cè)定菌株接種于PDA平板上于28 ℃培養(yǎng)4 d，用打孔器在菌落邊緣打塊，菌餅直徑為5 mm，將這些菌餅轉(zhuǎn)接于有毒培養(yǎng)基中央，帶菌絲一面朝下，以加等量無(wú)菌水的PDA培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每個(gè)藥劑設(shè)6個(gè)處理，4次重復(fù)，28 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，待對(duì)照的菌落接近長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿，用“十”字交叉法測(cè)量各處理菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。利用統(tǒng)計(jì)軟件DPS 7.05進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成幾率值作為縱坐標(biāo)，以藥劑濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，求毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)（r），計(jì)算出各藥劑對(duì)病原菌的抑制中濃度 EC50和EC90。

1.4 計(jì)算公式

抑制率=（對(duì)照菌落直徑-5 mm）-（處理菌落直徑-5 mm）對(duì)照菌落直徑-5 mm×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病尖孢鐮刀菌的毒力活性

供試藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌F. osysporum表現(xiàn)出一定的毒力作用。結(jié)果（表2）顯示，不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同處理濃度之間均表現(xiàn)出不同的殺菌效果，相關(guān)系數(shù)均達(dá)到顯著水平。25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、10%苯醚甲唑水分散粒劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和50%多菌靈可濕性粉劑等6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒力活性，EC50、EC90分別為0.020 9、0.305 3 μg/mL，0100 7、3.851 2 μg/mL，0.337、3.766 μg/mL，0.153 9、8.380 9 μg/mL，0.235 5、5.029 6 μg/mL，0.998 3、1.882 4 μg/mL。其中25%咪鮮胺乳油對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力最強(qiáng)，毒力回歸方程為y=1.099 8x+6.848 4；其次，1%申嗪霉素懸浮劑，毒力回歸方程為y=0.809 7x+5807 4。

2.2 白術(shù)根腐病菌F. oxysporum對(duì)殺菌劑敏感性比較

表1和圖1的EC50值及斜率綜合結(jié)果表明，F(xiàn). oxysporum對(duì)多種殺菌劑均有不同程度的敏感性，其中50%多菌靈可濕性粉劑的斜率最大，表明F. oxysporum對(duì)其敏感性最強(qiáng)；對(duì)25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑的EC50和斜率比較接近，表明這4種藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力相當(dāng)。雖然24%噻呋酰胺懸浮劑和45%敵磺鈉可濕性粉劑的斜率較大，但EC50非常大，表明病原菌對(duì)這2種藥的敏感性較弱，對(duì)菌絲的抑制能力不理想。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，供試藥劑中有6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌有很強(qiáng)的毒力活性，從EC50數(shù)值來(lái)看，不同殺菌劑的毒力依次為：25%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑。其中，25%咪鮮胺乳油對(duì)F. oxysporum菌絲的抑制效果最好；其次，為1%申嗪霉素懸浮劑。以上6種殺菌劑均為高效、低毒、低殘留和廣譜等特點(diǎn)，為了防止連續(xù)單一用藥使病原產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)，因此應(yīng)根據(jù)這些藥的作用機(jī)制不同進(jìn)行輪流施用，以延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生。

化學(xué)防治是農(nóng)業(yè)病害控制一種重要的防治措施，然而，白術(shù)作為特殊的經(jīng)濟(jì)作物，對(duì)農(nóng)藥的殘留要求很嚴(yán)格。但是選擇適宜的防治時(shí)間和防治方法，可以有效地防治白術(shù)根腐病等土傳病害，同時(shí)也可以降低農(nóng)藥在白術(shù)中的殘留。引起白術(shù)根腐病的病原較為復(fù)雜，因此應(yīng)選殺菌譜較廣的殺菌劑才能有效控制不同病原。土壤帶菌和白術(shù)栽培材料帶菌是引起白術(shù)根腐病的初侵染源，對(duì)土壤和白術(shù)栽培材料進(jìn)行藥劑處理，減少初侵染源是有效的防治技術(shù)。結(jié)合生態(tài)學(xué)考慮，以農(nóng)業(yè)防治技術(shù)為主，合理運(yùn)用化學(xué)、生物防治技術(shù)實(shí)行綜合防治，達(dá)到控制病害的目的。

本研究在室內(nèi)采用病原菌菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行毒力測(cè)定，但是在大田中環(huán)境條件復(fù)雜，因此，篩選出的藥劑劑量直接應(yīng)用于大田防治有無(wú)明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]朱意麟，易 蔚，黃克南. 新編中草藥彩色圖譜[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2011：495.

[2]俞永信. 白術(shù)根腐病及其防治[J]. 中草藥，1980，11（2）：81-82.

[3]劉英慧，趙來(lái)順.白術(shù)根腐病研究初報(bào)[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，1991，1（1）：38.

[4]臧少先，安信伯，石麗軍，等. 白術(shù)根腐病癥狀類型及病原鑒定[J]. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，28（3）：73-76.

[5]段明華，原雅玲，趙錦麗，等. 白術(shù)根莖腐爛與栽培措施的相關(guān)性[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，1996，16（5）：24-27.

[6]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998：122.

摘要：為篩選高效、安全的殺菌劑用于生產(chǎn)防治，采用菌絲生長(zhǎng)速率法在室內(nèi)進(jìn)行了11種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病病原菌的毒力測(cè)定。篩選出了6種殺菌劑對(duì)Fusarium oxysporum菌絲有顯著的抑制作用，其毒力順序?yàn)椋?5%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑；EC50-EC90分別為0020 9 μg/mL-0.305 3 μg/mL、0.100 7 μg/mL-3.851 2 μg/mL、0.153 9 μg/mL-8.380 9 μg/mL、0.235 5 μg/mL-5.029 6 μg/mL、0.337 μg/mL-83766 μg/mL和0.998 3 μg/mL-1.882 4 μg/mL。F. oxysporum對(duì)50%多菌靈可濕性粉劑敏感。

關(guān)鍵詞：殺菌劑；白術(shù)根腐??；尖孢鐮刀菌；毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)： S435.672 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）03-0084-02

白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz.）屬菊科草本植物，被列為中醫(yī)四大名貴藥材之一，主要以根入藥，具有健脾益氣、燥濕利水之功效[1]。近年來(lái)，貴州省白術(shù)種植面積不斷擴(kuò)大，由于連作，導(dǎo)致白術(shù)根腐病發(fā)生日趨嚴(yán)重，成為白術(shù)生產(chǎn)栽培中主要的病害之一。白術(shù)根腐病主要病原菌為尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）[2-4]，引起干腐。然而，劉英慧等[3]、臧少先等[4]、段明華等[5]報(bào)道還包括半裸鐮刀菌（F.semitectum）、茄病鐮刀菌（F.solani）、燕麥鐮刀菌（F.avenaceum）、木賊鐮刀菌（F. equiseti）、串珠鐮刀菌（F. moniliforme Sheldon）和立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）等病原，常引起根莖腐爛致死苗，重病田塊死苗率高達(dá)80%以上，嚴(yán)重制約了貴州白術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了篩選出防治白術(shù)根腐病的殺菌劑，本試驗(yàn)在室內(nèi)選擇了幾種殺菌劑對(duì)F. osysporum進(jìn)行了毒力測(cè)定，為田間防治提供依據(jù)。

1 材料方法

1.1 供試病原菌

白術(shù)根腐病標(biāo)樣采自貴州省開(kāi)陽(yáng)縣，用組織分離法[6]獲得病原菌。在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，純化后將試管保存于4 ℃下備用。經(jīng)鑒定為尖孢鐮刀菌F. oxysporum。

1.2 供試藥劑

供試藥劑共11種，藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及試驗(yàn)濃度詳見(jiàn)表1。

1.3 毒力測(cè)定

利用生長(zhǎng)速率法對(duì)菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。確定藥劑試驗(yàn)濃度后并配制供試藥劑母液，按照系列稀釋的方法將供試藥劑加入溶化并冷卻至60 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后制成不同濃度梯度（表1）的含藥平板。

將待測(cè)定菌株接種于PDA平板上于28 ℃培養(yǎng)4 d，用打孔器在菌落邊緣打塊，菌餅直徑為5 mm，將這些菌餅轉(zhuǎn)接于有毒培養(yǎng)基中央，帶菌絲一面朝下，以加等量無(wú)菌水的PDA培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每個(gè)藥劑設(shè)6個(gè)處理，4次重復(fù)，28 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，待對(duì)照的菌落接近長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿，用“十”字交叉法測(cè)量各處理菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。利用統(tǒng)計(jì)軟件DPS 7.05進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成幾率值作為縱坐標(biāo)，以藥劑濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，求毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)（r），計(jì)算出各藥劑對(duì)病原菌的抑制中濃度 EC50和EC90。

1.4 計(jì)算公式

抑制率=（對(duì)照菌落直徑-5 mm）-（處理菌落直徑-5 mm）對(duì)照菌落直徑-5 mm×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病尖孢鐮刀菌的毒力活性

供試藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌F. osysporum表現(xiàn)出一定的毒力作用。結(jié)果（表2）顯示，不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同處理濃度之間均表現(xiàn)出不同的殺菌效果，相關(guān)系數(shù)均達(dá)到顯著水平。25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、10%苯醚甲唑水分散粒劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和50%多菌靈可濕性粉劑等6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒力活性，EC50、EC90分別為0.020 9、0.305 3 μg/mL，0100 7、3.851 2 μg/mL，0.337、3.766 μg/mL，0.153 9、8.380 9 μg/mL，0.235 5、5.029 6 μg/mL，0.998 3、1.882 4 μg/mL。其中25%咪鮮胺乳油對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力最強(qiáng)，毒力回歸方程為y=1.099 8x+6.848 4；其次，1%申嗪霉素懸浮劑，毒力回歸方程為y=0.809 7x+5807 4。

2.2 白術(shù)根腐病菌F. oxysporum對(duì)殺菌劑敏感性比較

表1和圖1的EC50值及斜率綜合結(jié)果表明，F(xiàn). oxysporum對(duì)多種殺菌劑均有不同程度的敏感性，其中50%多菌靈可濕性粉劑的斜率最大，表明F. oxysporum對(duì)其敏感性最強(qiáng)；對(duì)25%咪鮮胺乳油、1%申嗪霉素懸浮劑、30%氟菌唑可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑的EC50和斜率比較接近，表明這4種藥劑對(duì)白術(shù)根腐病菌的毒力相當(dāng)。雖然24%噻呋酰胺懸浮劑和45%敵磺鈉可濕性粉劑的斜率較大，但EC50非常大，表明病原菌對(duì)這2種藥的敏感性較弱，對(duì)菌絲的抑制能力不理想。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，供試藥劑中有6種殺菌劑對(duì)白術(shù)根腐病菌有很強(qiáng)的毒力活性，從EC50數(shù)值來(lái)看，不同殺菌劑的毒力依次為：25%咪鮮胺乳油>1%申嗪霉素懸浮劑>30%氟菌唑可濕性粉劑>43%戊唑醇懸浮劑>10%苯醚甲唑水分散粒劑>50%多菌靈可濕性粉劑。其中，25%咪鮮胺乳油對(duì)F. oxysporum菌絲的抑制效果最好；其次，為1%申嗪霉素懸浮劑。以上6種殺菌劑均為高效、低毒、低殘留和廣譜等特點(diǎn)，為了防止連續(xù)單一用藥使病原產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)，因此應(yīng)根據(jù)這些藥的作用機(jī)制不同進(jìn)行輪流施用，以延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生。

化學(xué)防治是農(nóng)業(yè)病害控制一種重要的防治措施，然而，白術(shù)作為特殊的經(jīng)濟(jì)作物，對(duì)農(nóng)藥的殘留要求很嚴(yán)格。但是選擇適宜的防治時(shí)間和防治方法，可以有效地防治白術(shù)根腐病等土傳病害，同時(shí)也可以降低農(nóng)藥在白術(shù)中的殘留。引起白術(shù)根腐病的病原較為復(fù)雜，因此應(yīng)選殺菌譜較廣的殺菌劑才能有效控制不同病原。土壤帶菌和白術(shù)栽培材料帶菌是引起白術(shù)根腐病的初侵染源，對(duì)土壤和白術(shù)栽培材料進(jìn)行藥劑處理，減少初侵染源是有效的防治技術(shù)。結(jié)合生態(tài)學(xué)考慮，以農(nóng)業(yè)防治技術(shù)為主，合理運(yùn)用化學(xué)、生物防治技術(shù)實(shí)行綜合防治，達(dá)到控制病害的目的。

本研究在室內(nèi)采用病原菌菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行毒力測(cè)定，但是在大田中環(huán)境條件復(fù)雜，因此，篩選出的藥劑劑量直接應(yīng)用于大田防治有無(wú)明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

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