山茶油中功能性成分的測定

摘 要：目的：為了測定山茶油中的4類功能性組分的含量。方法：采用分光光度法測定茶皂素、茶多酚的含量，氣相色譜法測定角鯊烯和維生素E的含量。結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果表明橄欖油包含的角鯊烯和茶皂素最多，分別為540.03mg/100g和12.26mg/g；山茶油A和山茶油B包含茶多酚最多，分別為41.21μg/g和41.63μg/g，山茶油B包含的維生素E最多，為23.93mg/100g。結(jié)論：綜合比較得知山茶油茶多酚含量最高。

關(guān)鍵詞：山茶油；功能性成分；測定

油茶籽油具有預(yù)防心腦血管疾病、抗氧化和清除自由基等功效，茶皂素是一種天然非離子型表面活性劑，廣泛應(yīng)用于洗滌、毛紡、針織、醫(yī)藥、日用化工等領(lǐng)域，多酚類物質(zhì)是油脂主要的天然抗氧化劑，角鯊烯和維生素E均可以抑制脂質(zhì)過氧化，增加機(jī)體免疫功能，預(yù)防和治療心血管疾病。

1 方法與材料

1.1 試劑與材料

沒食子酸、維生素E、角鯊烯、茶皂素、正二十六烷標(biāo)準(zhǔn)品，香草醛，福林酚。實(shí)驗(yàn)中選用2種產(chǎn)地不同的山茶油作為分析材料，名稱分別為山茶油A和山茶油B，同時(shí)與優(yōu)質(zhì)的橄欖油和花生油相比較。

1.2 設(shè)備與儀器

日本生產(chǎn)的GC-2014型氣相色譜儀；TU-1810SPC紫外可見分光光度計(jì)；HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 茶多酚的含量測定

（1）沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。準(zhǔn)確稱取0.05g的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，置于100mL的容量瓶中，加水定容。分別吸取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL的容量瓶中，加水至10mL，混勻，配成濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取1.0mL到50mL的容量瓶中。先加20mL的水，再加3mL的福林酚試劑，搖勻，在8min時(shí)間內(nèi)加入12mL10%的Na2CO3溶液，加水定容，混勻。在30℃的溫度下避光放置2小時(shí)，以空白液作參比，在765nm下測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（2）茶多酚的測定。分別稱取四種植物油樣品10g，置于250mL的錐形瓶中，加140mL的甲醇，在65℃溫度下冷凝回流提取90分鐘，取出，放置到室溫，用正己烷萃取，直至淺黃色或無色，提取液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。按上述方法測定吸光度，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較，計(jì)算茶多酚的含量。

1.3.2 茶皂素的含量測定

（1）茶皂素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。準(zhǔn)確稱取茶皂素標(biāo)準(zhǔn)品0.9400g，加80%乙醇溶解定容到100mL，搖勻。分別吸取茶皂素標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL于10mL容量瓶中，加水定容，搖勻，配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。依次取0.5mL置于10mL的冰浴的具塞試管中，再依次添加0.5mL的濃度為8%的香草醛溶液和77%的硫酸溶液5mL，充分搖勻。在60℃的水浴中加熱，顯色20分鐘后，置于冰浴中冷卻10分鐘，取出，放置到室溫，以空白液作參比，在545nm處測量吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（2）茶皂素的測定。分別稱取四種植物油樣品5.000g置于100mL燒瓶中，加入50mL70%的乙醇溶液，于80℃回流提取2小時(shí)，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至粘稠狀，加入20mL水溶解，再加入正丁醇溶液，于分液漏斗中等體積萃取3次。合并正丁醇萃取液，濃縮至干，用70%的乙醇溶液定容至100mL，搖勻備用。按上述方法測定吸光度，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較，計(jì)算茶皂素的含量。

1.3.3 角鯊烯、維生素E的含量測定

（1）校正因子的測定。配制1.0mg/mL正二十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液和0.8mg/mL的角鯊烯、維生素E標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取角鯊烯和維生素E標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.125、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL置于10mL容量瓶中，分別加入1mL內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液，用正己烷定容，按照下面的條件進(jìn)行氣相色譜分析，根據(jù)樣品濃度與樣品和峰面積之比計(jì)算校正因子。色譜柱：KB-5MS毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）；程序升溫：200，1min℃→5/min℃→280，10℃；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比為10：1；進(jìn)樣量：1μL。

（2）維生素E和角鯊烯的測定。分別稱取四種植物油樣品1.000g，加入0.5mL正二十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液，用正己烷定容至5mL，搖勻備用。按上述的方法進(jìn)行氣相色譜分析，計(jì)算各組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比，計(jì)算樣品中角鯊烯和維生素E含量。

2 結(jié)果分析與討論

測定結(jié)果如下表：

樣品名稱 茶多酚（μg/g） 茶皂素（mg/g） 維生素 E（mg/100g） 角鯊烯（mg/100g）

山茶油A 41.21±2.15 3.85±0.40 17.41±3.87 10.10±0.94

山茶油B 41.63±2.05 3.70±0.21 23.93±4.37 0

一級壓榨花生油 24.30±1.52 8.84±0.90 22.52±3.41 29.48±2.19

特級初榨橄欖油 24.56±0.87 12.26±0.80 29.48±2.19 540.03±0.26

四種植物油中茶多酚、茶皂素、維生素E、角鯊烯測定結(jié)果（n=3）

結(jié)果表明四種植物油中的茶多酚含量都比茶皂素含量低很多，而維生素E含量差距較小，特級初榨橄欖油中角鯊烯含量最高。與其他油樣相比，山茶油中茶多酚的含量最高。實(shí)驗(yàn)所用山茶油A和山茶油B均來自油茶籽，但二者功能性成分差異較大，山茶油B的維生素E含量比山茶油A的高，并且未測出角鯊烯，這可能與山茶油產(chǎn)地或加工方式有關(guān)。這些研究結(jié)果對山茶油的進(jìn)一步開發(fā)和利用具有重要的指導(dǎo)作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]姚東等.油茶資源與科學(xué)利用研究[J].科學(xué)出版社，2012（01）：12-23.

[2]鐘彬.油茶籽油中角鯊烯含量的氣相色譜法測定[J].分析試驗(yàn)室，2011（01）：14-16.

[3]王偉.山茶油中成分含量的測定[J].科學(xué)出版社，2012（02）：1-5.

作者簡介：羅月紅（1967-），女，廣東清遠(yuǎn)人，本科，講師、實(shí)驗(yàn)師。