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    豆奶風(fēng)味物質(zhì)的研究*

    2014-06-29 05:31:58張文燦袁永紅
    大豆科技 2014年4期
    關(guān)鍵詞:己醛豆奶辛烯

    張文燦,鄒 焱,朱 辰,袁永紅

    (豐益(上海)生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司,上海 200137)

    豆奶風(fēng)味物質(zhì)的研究*

    張文燦,鄒 焱,朱 辰,袁永紅

    (豐益(上海)生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司,上海 200137)

    豆奶是我國(guó)傳統(tǒng)的植物蛋白飲品,富含蛋白質(zhì)、脂肪,鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)及多種維生素,營(yíng)養(yǎng)成分堪與牛奶相媲美。但豆奶中的異味是其產(chǎn)品生產(chǎn)和消費(fèi)的限制因素,即大多數(shù)豆制品所特有的豆腥味、青草味、青豆味、苦澀味等不良風(fēng)味。國(guó)內(nèi)外關(guān)于豆奶異味的成分及去除異味的方法報(bào)道較多,而關(guān)于豆奶香味成分的研究報(bào)道很少。研究通過GC-MS與GC-O聯(lián)用的方式,鑒定對(duì)豆奶風(fēng)味影響較大的成分,并將體現(xiàn)豆奶異味與豆奶香味的成分區(qū)別開來,為今后探索如何增強(qiáng)豆奶香味提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備

    豆奶粉A(金龍魚經(jīng)典原味豆奶粉):購(gòu)于當(dāng)?shù)爻?;豆奶粉B:購(gòu)于當(dāng)?shù)爻?;干冰:上海振信蓋斯實(shí)業(yè)有限公司;二氯甲烷:色譜純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;正構(gòu)烷烴混標(biāo):C10-C36,Sigma;5-甲基糠醛(分析純):Sigma;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:SENCO R1002B,上海申生科技有限公司。

    減壓濃縮裝置:自制,由蒸餾瓶、10cm長(zhǎng)的Vigreux柱、冷凝管、接受瓶、冷阱、真空泵組成。真空泵:Vacuubrand PC3001 VARIO,VACUUBRAND GMBH+CO KG system。

    GC-MS:Angilent 7890A GC-5975C inert XL EI/CI MSD。

    GC-O:Angilent 7890A GC-Olfactory Detection Port 2(Gerstel)。

    GC-FID:Angilent 7890.

    循環(huán)水浴鍋:Isotemp 3028S,F(xiàn)isher Scientific。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 前處理方法

    向10L旋蒸瓶中加入1.5kg豆奶粉和5L去離子水,再加入0.9mL內(nèi)標(biāo)5-甲基糠醛(濃度為1000ppm),于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行減壓抽提,抽提條件為加熱端50℃,冷凝水溫度0℃,轉(zhuǎn)速60rpm,真空度為65mbar,蒸餾液二級(jí)干冰冷卻(接受瓶后再加一級(jí)冷阱,捕集易揮發(fā)物質(zhì)),至混合物料中的水基本抽干。抽提結(jié)束后合并接受瓶和冷阱中的冷凝液,用二氯甲烷萃取,收集二氯甲烷相并加入無水硫酸鈉干燥,最后將二氯甲烷相用Vigreux柱減壓濃縮。

    1.2.2 GC-MS/O條件

    柱子:DB-1MS,30m×0.25mm×0.25um

    進(jìn)樣量:1uL,不分流模式

    載氣流速:He,1mL/min

    進(jìn)樣口溫度:200℃。

    升溫:50℃保持5min

    以3℃/min的速度從50℃上升至120℃

    以5℃/min的速度從120℃上升至250℃

    250℃保持5min

    請(qǐng)6位經(jīng)過培訓(xùn)的感官評(píng)價(jià)員參與嗅聞,記錄對(duì)應(yīng)時(shí)間的風(fēng)味特征,并對(duì)其濃度進(jìn)行打分(由濃到淡依次4、3、2、1分)。統(tǒng)計(jì)每種風(fēng)味物質(zhì)被評(píng)價(jià)員鑒別出的次數(shù)和累計(jì)分值。

    1.2.3 GC-FID條件

    柱子:DB-1,30m×0.25mm×0.25um

    進(jìn)樣量:1uL

    分流比:1:1

    進(jìn)樣口溫度:250℃

    氫氣流量:40mL/min

    氧氣流量:400mL/min

    氮?dú)饬髁浚?5mL/min

    FID檢測(cè)溫度:250℃

    升溫:50℃保持5min

    以3℃/min的速度從50℃上升至120℃

    以5℃/min的速度從120℃上升至250℃

    250℃保持5min

    1.2.4 物質(zhì)定性方法

    進(jìn)樣前以相同的條件先進(jìn)一針烷烴混標(biāo)(C10-C36),以計(jì)算出峰各物質(zhì)的保留指數(shù)(RI)。保留指數(shù)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室自建譜庫(kù)保留指數(shù)(RI)對(duì)照進(jìn)行成分鑒定,同時(shí)參考NIST11譜庫(kù)的檢索結(jié)果及關(guān)于化合物保留指數(shù)的文獻(xiàn)報(bào)道。通過匹配度、保留指數(shù)(RI)和芳香特性比較進(jìn)行化合物鑒定。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 2種商品豆奶粉中的風(fēng)味成分

    研究以2種常見的商品豆奶粉為例,通過GC-MS/O分析了豆奶風(fēng)味的組成,并通過內(nèi)標(biāo)法經(jīng)GC-FID檢測(cè)對(duì)各個(gè)物質(zhì)進(jìn)行了定量。商品豆奶粉A的總離子流圖和GC-O鑒定出的各風(fēng)味成分的風(fēng)味強(qiáng)度和鑒別頻數(shù)如圖1、圖2所示,樣品中的化合物組成及含量如表1所示;商品豆奶粉B的總離子流圖和GC-O鑒定出的各風(fēng)味成分的風(fēng)味強(qiáng)度和鑒別頻數(shù)如圖3、圖4所示,樣品中的化合物組成及含量如表2所示。

    圖1 商品豆奶粉A的總離子流色譜圖

    圖2 商品豆奶粉A各風(fēng)味物質(zhì)的風(fēng)味強(qiáng)度和鑒別頻數(shù)

    圖3 商品豆奶粉B總離子流色譜圖

    圖4 商品豆奶粉B各風(fēng)味物質(zhì)的風(fēng)味強(qiáng)度和鑒別頻數(shù)

    GC-MS與GC-O相結(jié)合,能夠有效的辨別對(duì)整體風(fēng)味起關(guān)鍵作用的物質(zhì)種類。研究采用鑒別頻數(shù)和風(fēng)味強(qiáng)度2個(gè)指標(biāo)確定某種化合物對(duì)整體風(fēng)味的貢獻(xiàn)程度,鑒別頻數(shù)定義為參加嗅聞的6位感官評(píng)價(jià)員中能夠識(shí)別出某種味道的人數(shù),數(shù)值越大,表明該種物質(zhì)能被越多的人識(shí)別,即對(duì)整體風(fēng)味的貢獻(xiàn)越大;風(fēng)味強(qiáng)度定義為6位感官評(píng)價(jià)員對(duì)嗅聞到的濃淡感覺的累計(jì)打分結(jié)果(某種化合物由濃到淡的分值依次是4、3、2、1分),數(shù)值越大,表明該種物質(zhì)濃度越高,呈香越明顯,對(duì)整體風(fēng)味的影響也較大。研究中,認(rèn)為鑒別頻數(shù)≥4或風(fēng)味強(qiáng)度≥10的物質(zhì)是比較關(guān)鍵的。

    豆奶的風(fēng)味研究已有報(bào)道,但不同的提取方法和不同地區(qū)的原料產(chǎn)品,也使風(fēng)味分析的結(jié)果有差異。Allaoua Achouri等用頂空固相微萃取(HSSPME)的方式研究了6種商品豆奶的風(fēng)味成分,認(rèn)為比較重要的組分是己醛、戊醛、苯甲醛、3-羥基-2-丁酮、2-戊基呋喃、2-丁酮、己醛、壬醛、戊烯-3-醇、2-庚酮、庚酸乙酯和辛酸乙酯等。Patricio R.等用動(dòng)態(tài)頂空稀釋分析(DHDA)與溶劑輔助萃取(SAFE)連用的方式并與GC-O相結(jié)合,分析了無菌包裝豆奶中的風(fēng)味,確定了包括2,3-丁二酮、己醛、2-庚酮、1-辛烯-3-醇、壬醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛、2,4-壬二烯醛等在內(nèi)的26種關(guān)鍵的風(fēng)味物質(zhì),大多是醛類、醇類、酮類及含硫化合物。

    文中采用減壓常溫抽提的方式對(duì)豆奶風(fēng)味進(jìn)行抽提,抽提液溶劑萃取后減壓濃縮后進(jìn)樣分析。由表1及表2的結(jié)果可以看出,2種商品豆奶粉的風(fēng)味主要是由醛類、醇類、酮類、酯類、酚類等構(gòu)成的。商品豆奶粉A中比較關(guān)鍵(鑒別頻數(shù)≥4或風(fēng)味強(qiáng)度≥10)的風(fēng)味組分有19種,分別是1-己醇、1-辛烯-3-醇、苯乙醇、己醛、庚醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、壬醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛、2,7-二甲基-2,6-辛二烯-4-酮、3-辛烯-2-酮、5-甲基-1-辛烯-4-酮、(E,Z)-3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、6,9-癸二烯-4-內(nèi)酯、麥芽酚以及4種未知組分。商品豆奶粉B中比較關(guān)鍵的風(fēng)味組分有18種,分別是2-呋喃甲醇、1-己醇、1-辛醇、己醛、(E)-2-己烯醛、庚醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、壬醛、4,5-二甲基-二氫-2(3H)-呋喃酮、2,5-二甲基-1-辛烯-4-酮、(E,Z)-

    3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、4-羥基-6-甲基-2(1H)-吡啶酮、麥芽酚以及4種未知組分。二者共同的關(guān)鍵組分有7種,分別是己醛、庚醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、壬醛、(E,Z)-3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)3,5-辛二烯-2-酮、麥芽酚。

    表1 商品豆奶粉A風(fēng)味組成

    表2 商品豆奶粉B風(fēng)味組成

    2種商品豆奶粉中各有4種未知成分,他們的風(fēng)味強(qiáng)度和鑒別頻數(shù)均較高,推測(cè)是一些閾值較低的痕量物質(zhì),對(duì)整體風(fēng)味的貢獻(xiàn)較大,需要在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步確定。

    2.2 豆奶中的異味成分與香味成分

    豆奶中的異味常被描述為豆腥味,國(guó)內(nèi)外對(duì)豆奶異味的研究較多,普遍認(rèn)為異味是由脂肪氧合酶(Lipxoygnease)引起的。早期的研究認(rèn)為豆腥味與2-戊基呋喃有關(guān)。隨著研究的發(fā)展,醛類和醇類物質(zhì)進(jìn)入人們的視線,T.Mizutani等認(rèn)為己醛和己醇是豆奶中最典型的異味成分。Kobayashi等的研究認(rèn)為己醛、己醇、1-戊醇、(E)-2-己烯醛、(Z)-2-己烯醇、(Z)-2-庚烯醛、庚醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛和(E,Z)-2,4-癸二烯醛共9種成分是引起豆腥味的主要物質(zhì)。Yan-Chun Lv等通過GC-O將豆奶中的風(fēng)味分為8種豆腥味組分和4種非豆腥味組分。豆腥味組分包括己醛、(E)-2-己烯醛、1-辛烯-3-醇、己醇、戊醇、乙酸、苯甲醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛,非豆腥味組分包括3-甲基丁醛、(E)-2-癸烯醛、壬醛、(E)-2-壬烯醛。

    通過GC-O確定了在2種商品豆奶中能夠體現(xiàn)“青味、腥味、生味”等特征并強(qiáng)度較大(鑒別頻數(shù)≥4或風(fēng)味強(qiáng)度≥10)的幾類物質(zhì),分別是1-己醇、己醛、1-辛烯-3-醇、辛醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、(E)-2-己烯醛等,認(rèn)為這類物質(zhì)是豆奶中異味的重要組分,這與前人的研究報(bào)道基本吻合。

    關(guān)于豆香味的研究報(bào)道較少。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)中中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)趙毅曾報(bào)道過有可能引起豆奶香味的成分,他借助GC-MS手段,結(jié)合熱處理方法對(duì)可能引起豆奶香味的成分進(jìn)行篩選和分析,認(rèn)為苯甲醛、戊醛、2-庚烯酮、3-辛酮、3-辛醇和戊酸可能是產(chǎn)生豆奶香味的主要成分。

    表3 豆奶中的異味成分和香味成分

    通過GC-O確定了在2種商品豆奶中能夠體現(xiàn)“甜香、焦香、豆香、奶香”等特征并強(qiáng)度較大(鑒別頻數(shù)≥4或風(fēng)味強(qiáng)度≥10)的幾類物質(zhì),分別是2-呋喃甲醇、苯乙醇、庚醛、2,7-二甲基-2,6-辛二烯-4-酮、3-辛烯-2-酮、5-甲基-1-辛烯-4-酮、4,5-二甲基-二氫-2(3H)-呋喃酮、(E,Z)-3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、4-羥基-6-甲基-2(1H)-吡啶酮、麥芽酚,認(rèn)為他們是呈現(xiàn)豆奶香味的重要組分。另外,2種商品豆奶粉中各有幾種未知的成分,呈現(xiàn)典型的“豆香、甜香、堅(jiān)果香”等風(fēng)味特征,鑒別頻數(shù)和風(fēng)味強(qiáng)度都較高,但尚未確定是什么物質(zhì)。

    3 小結(jié)

    以2種廣泛消費(fèi)的商品豆奶粉為研究對(duì)象,利用GC-MS/O對(duì)豆奶中的風(fēng)味成分進(jìn)行了鑒定并通過內(nèi)標(biāo)法經(jīng)GC-FID檢測(cè)對(duì)各物質(zhì)進(jìn)行了定量。根據(jù)風(fēng)味化合物的鑒別頻數(shù)和風(fēng)味強(qiáng)度分別確定了對(duì)2種商品豆奶粉風(fēng)味影響較大的關(guān)鍵物質(zhì)19種和18種,二者共有成分有己醛、庚醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、壬醛、(E,Z)-3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、麥芽酚等幾種。根據(jù)GC-O中評(píng)價(jià)員的描述,區(qū)分出了體現(xiàn)豆奶異味和豆奶香味的成分,1-己醇,己醛,1-辛烯-3-醇,辛醛,(E,E)-2,4-庚二烯醛,(E)-2-己烯醛是豆奶異味的重要成分,2-呋喃甲醇、苯乙醇、庚醛、2,7-二甲基-2,6-辛二烯-4-酮、3-辛烯-2-酮、5-甲基-1-辛烯-4-酮、4,5-二甲基-二氫-2(3H)-呋喃酮、(E,Z)-3,5-辛二烯-2-酮、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、4-羥基-6-甲基-2(1H)-吡啶酮、麥芽酚等是豆奶香味的重要成分。此外,2種豆奶粉中各有幾種未知的關(guān)鍵風(fēng)味物質(zhì),需要在后續(xù)的研究中進(jìn)一步確定。

    (略)

    *本文轉(zhuǎn)載自《中國(guó)豆制品產(chǎn)業(yè)》,由中國(guó)食品工業(yè)協(xié)會(huì)豆制品專業(yè)委員會(huì)供稿

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