圓葉唇柱苣苔的組織快繁和離體保存研究初探

江 南，何 俊，周 莊?，魯元學(xué)，管開云，郁文彬

（1.浙江省亞熱帶作物研究所，浙江溫州 3252005；2.中國科學(xué)院昆明植物研究所，云南昆明 650201）

圓葉唇柱苣苔的組織快繁和離體保存研究初探

江 南1，何 俊2，周 莊1?，魯元學(xué)2，管開云2，郁文彬2

（1.浙江省亞熱帶作物研究所，浙江溫州 3252005；2.中國科學(xué)院昆明植物研究所，云南昆明 650201）

云南特有圓葉唇柱苣苔Henckeliadielsii（Borza）D.J.Middleton＆Mich.M?ller具有較高觀賞價值，適宜巖石造景和庭院盆栽。研究比較8種不同培養(yǎng)基對外植體增殖和生根的影響，結(jié)果表明，培養(yǎng)基1／2MS＋NAA0.2mg·L－1＋6-BA2.0mg·L－1的增殖效果最好，可作為圓葉唇柱苣苔組織快繁的培養(yǎng)基；不添加激素的MS培養(yǎng)均不發(fā)生增殖，生根效果均較好，其中1／10MS可作為圓葉唇柱苣苔的離體保存培養(yǎng)基。

圓葉唇柱苣苔；組織培養(yǎng)；離體保存

苦苣苔科（Gesneriaceae）為主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)的大科，包括約150屬3500種植物［1］。我國苦苣苔科植物資源較為豐富，中國植物志英文版（FloraofChina）中記載有56屬442種［2］。根據(jù)最新的統(tǒng)計分析表明，國產(chǎn)苦苣苔科植物縮減至40屬，中國分布的物種增加到542種，其中中國特有屬有9屬，特有種476種，云南、廣西、貴州及其鄰近的喀斯特地區(qū)是我國苦苣苔科植物的分布和特有中心［3］。

苦苣苔科植物花色豐富、花型優(yōu)美，植株和葉形態(tài)變化多樣，具有多重觀賞價值。國外的園藝學(xué)家早已認(rèn)識到苦苣苔科植物的觀賞價值，已開發(fā)利用非洲堇屬（SaintpauliaH.Wendl.）、好望苣苔屬（StreptocarpusLindl.）、歐洲苣苔屬（Ramonda Rich.）、芒毛苣苔屬（AeschynanthusJack）等種類，并培育出許多優(yōu)良品種，同時在國內(nèi)一些城市也被廣泛栽培。雖然我國苦苣苔科植物資源豐富，但僅有芒毛苣苔屬、半朔苣苔屬（HemiboeaC.B. Clarke）和漢克麗亞花屬（HenckeliaSpreng.）的少數(shù)種類被利用。

圓葉唇柱苣苔Henckeliadielsii（Borza）D.J. Middleton＆Mich.M?ller是多年生草本，為云南特有種，主要生長在滇中和南部地區(qū)海拔1900～3000m的山地巖石蔭庇處。其葉基生，蓮座狀，花朵碩大，花冠可達(dá)4～5.5cm，上唇白色，下唇藍(lán)紫色，極為特殊，具有較高觀賞價值，適于巖石造景和庭院盆栽［4］。為了更好地開發(fā)和利用圓葉唇柱苣苔，保存其種質(zhì)資源，本研究比較了8種不同培養(yǎng)基對外植體增殖和生根的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

研究材料由中國西南種質(zhì)資源庫植物離體庫提供，本研究選取帶2片葉的芽為外植體。每瓶培養(yǎng)基中接種5個消毒的外植體，每種處理10瓶。

1.2 方法

培養(yǎng)條件設(shè)定為培養(yǎng)溫度（25±2）℃，光照強度為20μmol·m－2·s－1，光照時間為12h·d－1。

研究以MS［5］為基本培養(yǎng)基，并添加0.56%瓊脂和2%蔗糖，pH值為5.8。培養(yǎng)基配置分為添加激素和不添加激素2大類8種類型，其中不添加激素培養(yǎng)基設(shè)4個梯度，添加激素設(shè)4種不同溶度組合（表1）。

接種后，每日觀察外植體的生長狀況，并記錄外植體污染和死亡情況。培養(yǎng)2周后，統(tǒng)計污染率和死亡率；培養(yǎng)4周后，統(tǒng)計誘導(dǎo)率、生根和增殖率。增殖率／%＝增殖數(shù)總和／接種數(shù)×100。利用SPSS軟件采樣獨立樣本t檢驗分析不同培養(yǎng)基處理間的外植體增殖率的差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 無激素MS培養(yǎng)基

表1顯示，在未添加激素的MS培養(yǎng)基中，圓葉唇柱苣苔均有根生成，且生長狀況良好，不過外植體在4周內(nèi)未發(fā)生增殖。相比而言，圓葉唇柱苣苔在濃度高的培養(yǎng)基1和4的根較濃度低的培養(yǎng)基2和3要粗壯，培養(yǎng)基2的根最細(xì)。

表1 外植體在不同培養(yǎng)基中的誘導(dǎo)率、增長率和生根率

2.2 添加激素的MS培養(yǎng)基

添加激素的4種培養(yǎng)基基質(zhì)均為1／2M培養(yǎng)基。培養(yǎng)基5只添加0.5mg·L－1的NAA，圓葉唇柱苣苔增殖比率均值達(dá)到1∶4.92，且有根生成，培養(yǎng)基1和4中根的生長狀況差別不大。表1表明，在培養(yǎng)基5的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基6增加1.0mg· L－1的6-BA，圓葉唇柱苣苔平均增殖比率均值增加到1∶6.58，明顯高于培養(yǎng)基5（t＝5.59，P＜0.01），但添加6-BA使根的生長被抑制。培養(yǎng)基7和8均添加0.2mg·L－1的NAA，而添加6-BA設(shè)定梯度，濃度高的培養(yǎng)基8的平均增殖率較濃度低的培養(yǎng)基7明顯要高（t＝13.96，P＜0.01）。

3 小結(jié)與討論

研究中未發(fā)現(xiàn)外植體污染，可能因為在接種前外植體和接種工具消毒完全，且外植體是幼嫩的莖尖，攜帶病菌的幾率較低。在未添加激素的4個梯度的MS培養(yǎng)基中，圓葉唇柱苣苔均能較好地生長，且有根生成。從種質(zhì)資源保存的角度來說，培養(yǎng)基2即可滿足保存的要求。

研究表明，圓葉唇柱苣苔4周內(nèi)在4種基本培養(yǎng)基和只添加NAA的培養(yǎng)基中均有根生長，而添加6-BA的其他3種培養(yǎng)基根的生長被抑制。值得注意的是，只添加NAA的培養(yǎng)基5具有較高的增殖率，與同時添加低濃度NAA和6-BA的增殖率較為接近，但提高6-BA的濃度會明顯增加增殖率。在培養(yǎng)基8中，每個葉腋均長出新芽，部分葉片上亦分化出新芽，因此，培養(yǎng)基8可作為圓葉唇柱苣苔的增殖培養(yǎng)基。

［1］ KubitzkiK，KadereitJW.Thefamiliesandgeneraofvascular plants.Vol.7.Floweringplants.Dicotyledons.Lamiales（exceptAcanthaceae，includingAvicenniaceae）［M］.Berlin／Heidelberg：Springer，2004：63－158.

［2］ WuZY，RavenPH.FloraofChina（Vol.18）［M］.Beijing＆St.Louis：SciencePress＆MissouriBotanicGarden，1998：244－401.

［3］ 韋毅剛，鐘樹華，文和群.廣西苦苣苔科植物區(qū)系和生態(tài)特點的研究［J］．云南植物研究，2004，26（2）：173－182.

［4］ 溫放，張啟翔，王越.廣西唇柱苣苔屬和小花苣苔屬植物的觀賞性狀評價與篩選［J］．園藝學(xué)報，2008，35（3）：239－250.

［5］ MurashigeT，SkoogF.Arevisedmediumforrapidgrowthand bioassayswithtobaccotissuecultures［J］．Physiologia Plantarum，1962，15（3）：473－497.

（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S637

A

0528-9017（2014）08-1192-02

文獻(xiàn)著錄格式：江南，何俊，周莊，等.圓葉唇柱苣苔的組織快繁和離體保存研究初探［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（8）：1192－1193.

2014-04-09

溫州市科技計劃項目（N20100061）

江 南（1981－），女，助理研究員，博士，主要從事植物系統(tǒng)與演化研究工作。E-mail：jiangnan＠m(xù)ail.kib.ac.cn。

周 莊，高級工程師。E-mail：zhuangchow＠126.com。