HPLC法測(cè)定通宣理肺顆粒中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的含量

邵大志謝秋紅

（1 四平市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 四平 136000；2 四平市中心人民醫(yī)院，吉林 四平 136000）

HPLC法測(cè)定通宣理肺顆粒中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的含量

邵大志1謝秋紅2

（1 四平市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 四平 136000；2 四平市中心人民醫(yī)院，吉林 四平 136000）

目的建立HPLC法測(cè)定通宣理肺顆粒中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿含量。方法色譜柱為極性乙醚連接苯基鍵合硅膠（250 mm×4.6 mm，5 μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；流動(dòng)相為甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1∶99）流速：1.0 mL/min；柱溫30 ℃。結(jié)果鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿在相應(yīng)濃度范圍內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，靈敏度高，可用于通宣理肺顆粒的質(zhì)量控制。

通宣理肺顆粒；鹽酸麻黃堿；鹽酸偽麻黃堿；hplc；含量測(cè)定

通宣理肺顆粒是由紫蘇葉、前胡、桔梗、苦杏仁、麻黃、甘草、陳皮、姜半夏、茯苓、枳殼、黃芩等11味中藥經(jīng)提取加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有解表散寒，宣肺止嗽等功效。用于風(fēng)寒束表、肺氣不宜所致的感冒咳嗽等[1-3]。由于麻黃為該方中主要成分，本文采用HPLC法測(cè)定通宣理肺顆粒中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿含量，為該制劑的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀：SHIMADZU 2010AHT，Class-Vp色譜軟件系統(tǒng)。電子天平BP211D型（中國(guó)梅特勒一托利多儀器廠）；超聲清洗器LC-250功率250 W 頻率50 kHz。

1.2 試藥

鹽酸麻黃堿（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：0090-9801）；鹽酸偽麻黃堿（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：171237-200304）；通宣理肺顆粒（湖北午時(shí)藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：130101；另兩批為自制 批號(hào)為130621；130622），陰性樣品自制；甲醇為分析純；三乙胺為色譜純；二正丁胺為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：極性乙醚連接苯基鍵合硅膠Polar-phenyl（250 mm× 4.6 mm，5 μm批號(hào)：Z0003-4625）；流動(dòng)相：甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1∶99）；進(jìn)樣量：10 μL；流速1.0 mL/min；檢測(cè)器：紫外。

2.2 供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉約3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，精密稱定，超聲提取20 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱鹽酸麻黃堿對(duì)照品10.24 mg置50 mL量瓶中；加甲醇稀釋至刻度，精密量取5 mL至50 mL容量瓶中，鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品15.71 mg置25 mL量瓶中，精密量取1～100 mL，容量瓶中，分別加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性對(duì)照溶液的制備

以相同的處方比例，制得不含麻黃的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成空白對(duì)照溶液。見(jiàn)圖1。

2.5 線性關(guān)系

圖1

表1 回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍（n=5）

表2 加樣回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表

精密稱量取取鹽酸麻黃堿2.03 mg、鹽酸偽麻黃堿6.13 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.1、0.3、2、5、10 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。注入液相色譜儀分析，以峰面積對(duì)濃度做線性回歸方程。以峰而積對(duì)濃度作線性回歸。得各成分回歸方程。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，按上述“2.1 色譜條件”每隔3 h進(jìn)行測(cè)定，共計(jì)進(jìn)樣6次，測(cè)定其穩(wěn)定性。鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿峰面積的RSD分別為0.8%，1.0%結(jié)果表明供試品溶液在15 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.7 精密度試驗(yàn)

精密吸取鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其峰面積、RSD分別為0.21%、0.47%（n=6），結(jié)果表明本法精密度良好[4]。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)為130101的樣品6份，按“2.2供試品溶液的制備”方法制備溶液并依法測(cè)定，結(jié)果鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿含量的RSD分別為1.1%、1.9%（n=6），結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.9 回收率試驗(yàn)

精密稱取批號(hào)為130101的通宣理肺顆粒樣品適量，精密加入對(duì)照品適量，按“2.2供試品溶液的制備”方法處理，計(jì)算各成分的回收率。結(jié)果表明，本法具有良好的加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.10 樣品含量測(cè)定

按相同的色譜條件對(duì)3批樣品進(jìn)行分析，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 樣品中各成分含量測(cè)定結(jié)果

3 討 論

3.1 流動(dòng)相的選擇

流動(dòng)相應(yīng)用乙腈-水；用甲醇-水時(shí)峰型不好，參考文獻(xiàn)。采用流動(dòng)相的比例為甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1∶99）的色譜峰型能夠達(dá)到要求，故采用此比例[5，6]。

3.2 色譜柱的選擇

采用極性乙醚連接苯基鍵合硅膠色譜柱由于十八烷基硅膠鍵合色譜柱，故采用此色譜柱。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[Z].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005

[2] 王冰,張振秋. HPLC切換波長(zhǎng)法同時(shí)測(cè)定升麻中5種成分的含量[J].藥物分析雜志,2011,31(2):391-394.

[3] 國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)[S]第六十一冊(cè).2004:33.

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[5] 連傳寶.HPLC切換波長(zhǎng)法同時(shí)測(cè)定參芪五味子片中五味子酯甲和五味子甲素的含量[J]. 齊魯藥事,2011,30(8):458.

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Determination of Eephedrine Hhydrochloride and Ppseudoephedrine Hhydrochloride Cconstituents in Tongxuan-lifei Keli by HPLC

SHAO Da-zhi1, XIE Qiu-hong2
(1 Siping Institute for Food and Drug Control, Siping 136000, China;2 Siping Center People's Hospital, Siping 136000, China)

ObjectiveTo establish a assay guality standard for ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride constituents in Tongxuanlifei keli by HPLC.MethodsThe sample was separated on a Polar-phenyl(250 mm×4.6 mm,5 μm)with methanol–phosphoric acid in gradient elution. the detection wavelength was 210 nm.The flow rate was 1.0 mL/min, and the column temperature was 30 ℃.ResultsEphedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride showed good linearity over the tested ranges.ConclusionsThe method is simple, accurate, and applicable for the quality control of Tongxuan-lifei keli.

Tongxuan-lifei keli; Hydrochloride; Pseudoephedrine hydrochloride; HPLC; Assay

R284.1

B

1671-8194（2014）24-0073-02