大黃素對肝纖維化大鼠肺損傷的保護作用*

張麗麗，張慧英△，王黎敏，李旭炯，賈建桃，呂敏麗，范毅敏，張翠英，劉明社，趙中夫，韓德五，CHENG Ji

(長治醫(yī)學(xué)院1病理生理學(xué)教研室，2機能實驗室，3生理學(xué)教研室，5肝病研究所，山西長治 046000;山西醫(yī)科大學(xué)4第二醫(yī)院ICU，6肝病研究所，山西太原 030001;7南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院肝病研究中心，美國加利福尼亞州洛杉磯 90089)

大黃素對肝纖維化大鼠肺損傷的保護作用*

張麗麗1，張慧英1△，王黎敏2，李旭炯3，賈建桃1，呂敏麗4，范毅敏2，張翠英3，劉明社5，趙中夫5，韓德五6，CHENG Ji7

(長治醫(yī)學(xué)院1病理生理學(xué)教研室，2機能實驗室，3生理學(xué)教研室，5肝病研究所，山西長治 046000;山西醫(yī)科大學(xué)4第二醫(yī)院ICU，6肝病研究所，山西太原 030001;7南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院肝病研究中心，美國加利福尼亞州洛杉磯 90089)

目的:探討不同劑量大黃素對肝纖維化大鼠肺損傷的保護作用。方法：采用復(fù)合致病因素法(CCl4、乙醇、高脂、高膽固醇和低膽堿)建立肝纖維化大鼠模型并以不同劑量(20 mg/kg和40 mg/kg)大黃素進行治療。4周后，測定肝指數(shù)，檢測血清內(nèi)毒素、同型半胱氨酸、反映肝功能的指標(biāo)白蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素、總膽固醇、甘油三酯和肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸、層黏連蛋白、Ⅳ型膠原蛋白、Ⅲ型前膠原蛋白的含量，觀察肝組織病理學(xué)改變;測定肺指數(shù)，光鏡下行肺組織病理學(xué)觀察，檢測肺組織勻漿腫瘤壞死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和過氧亞硝基陰離子(ONOO-)含量。結(jié)果:大鼠肝纖維化模型復(fù)制成功，模型組大鼠肺指數(shù)明顯增加，肺臟發(fā)生水腫、炎癥反應(yīng)，肺勻漿TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明顯增加;大黃素治療組肺指數(shù)較模型組下降，肺組織病理性損傷明顯減輕，肺組織TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明顯降低。結(jié)論:大黃素對肝纖維化大鼠的肺損傷具有一定的保護作用。

大黃素;肝纖維化;肝肺綜合征;肺損傷

肺臟由于其特殊的解剖位置，在維持機體正常功能中發(fā)揮重要作用。在疾病情況下，肺臟也成為極易受損的器官。在各種急、慢性肝病早期即可發(fā)生肝肺綜合征(hepatopulmonary syndrome，HPS)，并且具有發(fā)生早、發(fā)病隱匿的特點。在各種原因所致的肝硬化基礎(chǔ)上，肝肺綜合征的發(fā)生率高達5%～32%［1］。肝纖維化是各種病因所致慢性肝病的共同病理過程，也是向肝硬化發(fā)展的主要中間環(huán)節(jié)。對肝纖維化時肺組織的損傷及其嚴(yán)重程度鮮有報道。大黃素(emodin，EMD)是大黃等中藥的主要有效單體成分，在治療肝纖維化方面具有較好的臨床應(yīng)用價值，對其抗肝纖維化作用及機制的研究也已取得了顯著成果，但臨床尚無大黃素防治肝纖維化肺損傷的報道。本實驗擬采用復(fù)合致病因素法復(fù)制大鼠肝纖維化模型，觀察肺組織的病理變化，并進一步探討大黃素對肝纖維化所致肺損傷是否具有保護作用及其可能的機制，以期為臨床治療提供新思路。

材料和方法

1 材料

1.1 主要試劑CCl4分析純，購自天津市富宇精細(xì)化工有限公司;膽固醇購自天津市化學(xué)試劑公司; EMD(純度99%)購自成都康邦生物科技有限公司，使用前用0.5%羧甲基纖維素鈉配制成不同濃度的混懸液。丙二醛(malondialdehyde，MDA)測試盒、一氧化氮(nitric oxide，NO)測試盒和考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 動物分組與模型制備清潔級成年雄性SD大鼠(購自北京軍事科學(xué)院)20只，體重200～220 g。隨機分為正常對照組、小劑量(20 mg/kg)EMD組、大劑量(40 mg/kg)EMD組和肝纖維化組(模型組)。模型組和EMD組以玉米面作為飼料(前2周為80%玉米面，20%豬油，0.5%膽固醇;后2周為單純玉米面混入0.5%膽固醇)，首次按6 mL/kg體重的劑量皮下注射40%CCl4，之后按3 mL/kg體重劑量注射，每隔3 d注射1次，共28 d;EMD組在模型組復(fù)制的同時給EMD液每天灌胃1次;正常對照組飼以正常飲食;正常對照組和模型組以生理鹽水灌胃［2］。4周后取材，收集血液及肝肺標(biāo)本待測相關(guān)指標(biāo)。

2 方法

2.1 大鼠肝、肺指數(shù)計算肝指數(shù)(%)=肝臟重量(g)/體重(g)×100%，肺指數(shù)(%)=肺濕重(g)/體重(g)×100%。

2.2 血漿生化指標(biāo)檢測血漿內(nèi)毒素(endotoxin，ET)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase，ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)、總膽紅素(total bilirubin，TB)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)、層黏連蛋白(laminin，LN)、Ⅳ型膠原蛋白(collagen typeⅣ，ColⅣ)、Ⅲ型前膠原蛋白(procollagen typeⅢ，PCⅢ)等反映肝功能和肝纖維化指標(biāo)的檢測由鄭州金域檢驗中心完成。

2.3 肺組織勻漿指標(biāo)檢測采用超聲波細(xì)胞粉碎機制備10%肺組織勻漿，照試劑盒說明書方法檢測組織勻漿中MDA和NO水平，蛋白定量采用考馬斯亮藍(lán)法;放射免疫法檢測肺組織腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α，TNF-α)含量(北京英華生物技術(shù)研究所檢測);ELISA法檢測肺組織中過氧亞硝基陰離子(peroxynitrite，ONOO-)含量(上海源葉生物科技有限公司檢測)。

2.4 病理學(xué)觀察取同一部位肝葉及肺葉，常規(guī)石蠟包埋切片，行HE及van Gieson(VG)染色，光鏡下觀察肝肺病理變化及肝臟膠原纖維增生情況。采用BI-2000型醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)計算肝組織纖維化指數(shù)(膠原纖維面積/圖像總面積×100%)，每張切片隨機10個視野取其平均值進行統(tǒng)計。

2.5 肺泡腔及肺間隔巨噬細(xì)胞計數(shù)肺組織HE染色，切片隨機挑選10個視野，400倍光學(xué)顯微鏡下計數(shù)肺泡腔及肺間隔內(nèi)巨噬細(xì)胞數(shù)量，取其平均值進行統(tǒng)計。

3 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析和組間LSD-t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

1 一般情況

正常對照組大鼠活潑好動，皮毛柔順有光澤，體重逐漸增加;模型組動物活動和攝食明顯減少，精神不振，拱背蜷縮，背毛雜亂無光澤，身體較其它組消瘦;EMD組大鼠皮毛、飲食與模型組比較有所改善，大便色黃稀軟，小便較黃，體重較模型組減輕。肝指數(shù)結(jié)果分別為:正常對照組(3.10±0.16)%，模型組(5.02±0.75)%，EMD 20 mg/kg組(3.91± 0.70)%，EMD 40 mg/kg組(3.42±0.57)%;模型組與其它3組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

2 各組大鼠血漿生化指標(biāo)結(jié)果

2.1 血漿生化指標(biāo)結(jié)果模型組大鼠血漿ET、Hcy、ALT、AST、TB、TC和TG含量均明顯高于其它3組(P＜0.05或P＜0.01)，提示在復(fù)合致病因素作用下大鼠有腸源性內(nèi)毒素血癥發(fā)生，肝細(xì)胞嚴(yán)重受損，肝內(nèi)脂質(zhì)聚集，物質(zhì)代謝障礙，高同型半胱氨酸血癥形成。模型組肝細(xì)胞嚴(yán)重受損，因此合成白蛋白(albumin，ALB)的能力較其它3組顯著降低(P＜0.05)。EMD 40 mg/kg組血清ALT和AST含量明顯低于EMD 20 mg/kg組(P＜0.05)，提示EMD 40 mg/ kg組肝細(xì)胞損傷較EMD 20 mg/kg組為輕，見表1。

表1 各組大鼠血漿ET、Hcy及肝功6項檢測結(jié)果Table 1.The changes of ET，Hcy and other biochemical parameters in each group(Mean±SD.n=5)

2.2 大鼠肝纖維化血清學(xué)檢測結(jié)果HA、LN、ColⅣ和PCⅢ是反映肝纖維化水平較理想的血清學(xué)指標(biāo)。與其它3組比較，模型組HA、LN、ColⅣ和PCⅢ含量均顯著升高(P＜0.05);EMD組各項指標(biāo)的含量均低于模型組(P＜0.05)，EMD 40 mg/kg劑量組的4項指標(biāo)值略低于EMD 20 mg/kg劑量組，但兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表2 各組大鼠血清纖維化指標(biāo)檢測結(jié)果Table 2.The changes of HA，LN，ColⅣand PCⅢin each group(Mean±SD.n=5)

3 肝臟病理改變

正常對照組肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞以中央靜脈為中心向四周呈放射狀排列，僅見少量膠原纖維分布于匯管區(qū)和中央靜脈周圍;模型組肝索排列紊亂，肝細(xì)胞脂肪變性、壞死，伴有炎癥細(xì)胞浸潤，Kupffer細(xì)胞增生，肝小葉被膠原纖維分割，匯管區(qū)可見大量膠原纖維沉積;EMD 20 mg/kg組肝組織結(jié)構(gòu)較模型組有一定改善，肝小葉中央?yún)^(qū)僅見輕度壞死，匯管區(qū)炎癥細(xì)胞部分浸潤，肝小葉部分被增生的纖維組織分割;EMD 40 mg/kg組肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整，肝細(xì)胞變性壞死明顯減輕，纖維結(jié)締組織明顯減少，未見纖維間隔，見圖1、2。VG染色統(tǒng)計纖維化指數(shù)值分別為:正常對照組(3.82±0.67)%，模型組(7.26±1.54)%，EMD 20 mg/kg組(5.11± 1.35)%，40 mg/kg組(4.71±0.94)%;模型組與其它3組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

4 肺臟病理改變

4.1 肺大體肉眼觀察及肺指數(shù)正常組雙肺呈粉紅色，表面光滑，柔軟有光澤;模型組雙肺腫脹，充血明顯，表面有出血點和壞死灶;EMD組雙肺較對照組稍大，余同對照組。肺指數(shù)是反映肺組織有無水腫的客觀指標(biāo)，各組動物肺指數(shù)結(jié)果顯示:正常對照組(0.36±0.05)%，模型組(0.79±0.14)%，EMD 20 mg/kg組(0.49±0.12)%，EMD 40 mg/kg組(0.47±0.27)%。模型組肺指數(shù)顯著高于其它3組(P＜0.05)，表明肝纖維化大鼠有明顯肺水腫;而EMD組無明顯肺水腫，EMD兩組間比較無顯著差異。

Figure 2.Changes of hepatic fibrosis(VG staining，×100).A:normal group;B:model group;C:EMD 20 mg/kg group;D:EMD 40 mg/kg group.圖2 各組大鼠肝組織纖維化改變

4.2 肺臟組織光鏡下觀察肺組織HE染色結(jié)果顯示，正常肺組織肺泡結(jié)構(gòu)完整，間隔均勻，肺泡腔內(nèi)未見明顯炎癥細(xì)胞及滲出物;模型組肺泡腔變窄，肺泡間隔明顯增厚，腔內(nèi)和間隔內(nèi)有大量巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞聚集;EMD 20 mg/kg組肺泡腔炎癥細(xì)胞及滲出物明顯減少，肺組織變化較模型組減輕; EMD 40 mg/kg組損傷最輕，肺組織結(jié)構(gòu)均趨于正常，見圖3。肺泡及間隔中巨噬細(xì)胞計數(shù)結(jié)果為:正常對照組5.60±0.34，模型組20.60±0.47，EMD 20 mg/kg組8.50±0.19，EMD 40 mg/kg組6.70± 1.07。模型組巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著多于其它3組(P＜0.05)，提示肺組織有明顯炎癥反應(yīng)存在;EMD組大鼠無明顯肺組織炎癥反應(yīng)，EMD 20 mg/kg組和EMD 40 mg/kg組間比較無顯著差異。

Figure 3.Pathological changes of pulmonary tissues(HE staining，×100).A:normal group;B:model group;C:EMD 20 mg/kg group;D:EMD 40 mg/kg group.圖3 各組大鼠肺組織病理學(xué)改變

5 肺組織勻漿檢測結(jié)果

模型組大鼠肺組織勻漿MDA、NO、TNF-α和ONOO-含量明顯高于其它3組，差異顯著(P＜0.05);EMD組MDA、NO、TNF-α和ONOO-含量明顯降低，EMD 20 mg/kg組和40 mg/kg組間比較無顯著差異，見表3。

6 各指標(biāo)間相關(guān)性分析

血漿內(nèi)毒素水平與肺組織勻漿TNF-α含量呈顯著正相關(guān)(P＜0.01)。肺組織勻漿TNF-α含量與MDA、NO、ONOO-含量呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)，見表4。

討論

本實驗采用復(fù)合致病因素法復(fù)制肝纖維化動物模型，4周末對大鼠血清、肝臟勻漿檢測及病理學(xué)觀察，結(jié)果均證實肝纖維化模型復(fù)制成功。肺部組織學(xué)觀察模型組大鼠肺間隔增寬，肺泡腔滲出物明顯增多，腔及間質(zhì)中巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著增加，測得肺系數(shù)增高，表明其已發(fā)生肺水腫;肺組織勻漿TNF-α、MDA、NO和ONOO-的含量明顯增高，提示大鼠肝纖維化導(dǎo)致肺組織發(fā)生了病理性損傷，且以炎癥反應(yīng)為主。

表3 各組大鼠肺組織勻漿檢測結(jié)果Table 3.Content of MDA，NO，TNF-α and ONOO-in each group(Mean±SD.n=5)

表4 各指標(biāo)間相關(guān)性分析Table 4.Correlation analysis of the indexes in hepatic fibrosis rats

各種肝病往往伴發(fā)腸源性內(nèi)毒素血癥(intestinal endotoxemia，IETM)［3］。本實驗?zāi)Ｐ徒M大鼠血漿內(nèi)毒素含量明顯增高，證實大鼠肝纖維化發(fā)病過程中有IETM形成。內(nèi)毒素吸收入血增加，首先攻擊Kupffer細(xì)胞致其過度活化，分泌大量促炎細(xì)胞因子如TNF-α等，不僅引起肝實質(zhì)細(xì)胞的變性壞死，還可引起肝內(nèi)異常免疫反應(yīng)，促進纖維化的發(fā)生［4-5］。EMD處理組血漿內(nèi)毒素水平明顯降低，提示該組肝Kupffer細(xì)胞清除內(nèi)毒素的作用有所增強，腸源性內(nèi)毒素血癥減輕。由于肺臟特殊的解剖位置，使其成為IETM的重要靶器官，循環(huán)中升高的內(nèi)毒素作為最強的刺激物，刺激肺巨噬細(xì)胞產(chǎn)生和釋放大量以TNF-α為主的細(xì)胞因子，引起肺臟的損傷，是肝硬化合并發(fā)生HPS的基本機制。本實驗相關(guān)性分析顯示，血漿ET水平與肺勻漿中TNF-α含量呈顯著正相關(guān)?？梢酝茰y，腸源性內(nèi)毒素和TNF-α同樣是肝纖維化時肺組織病理變化的根本原因。大黃素處理組肺臟病變減輕，說明肝臟疾病惡化或減輕，都直接影響到肺臟，因此治療肝臟病變是治療肺病的根本。炎癥引起的肝實質(zhì)細(xì)胞損傷是纖維化形成的促發(fā)因素，EMD抗肝纖維化治療作用中最主要的一點即抑制肝臟的炎癥反應(yīng)，減輕肝損傷。大黃素是Kupffer細(xì)胞中細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinases，ERK)和p38促分裂素原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases，p38 MAPK)信號通路的有效抑制劑，可阻斷LPS通過MAPK信號途徑引起的肝Kupffer細(xì)胞活化，抑制內(nèi)毒素引起的TNF-α分泌［6］;EMD還能降低細(xì)胞內(nèi)［Ca2+］，下調(diào)鈣調(diào)蛋白激酶活性，進而抑制與細(xì)胞因子有關(guān)的基因表達，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，抑制過度炎癥反應(yīng)［7］。EMD可降低腸壁及腸毛細(xì)血管通透性，顯著抑制腸道相關(guān)致病菌增殖和腸道內(nèi)毒素的產(chǎn)生和吸收［8］?？傊珽MD通過各種途徑使腸源性內(nèi)毒素血癥減輕，使“泛濫”入血液循環(huán)的細(xì)菌、內(nèi)毒素及TNF-α等細(xì)胞因子減少，間接保護了肺臟，使肺部病變有所緩解。

生理狀態(tài)下，肺泡腔內(nèi)僅有較少量的巨噬細(xì)胞，當(dāng)肺部發(fā)生炎癥或感染時內(nèi)毒素吸引巨噬細(xì)胞聚集，進而活化、產(chǎn)生和釋放大量的炎癥因子。巨噬細(xì)胞在肺內(nèi)的大量積聚可致過度炎癥反應(yīng)的發(fā)生，組織損傷進一步加重［9-10］。實驗中我們觀察到肝纖維化大鼠肺泡腔及間質(zhì)中巨噬細(xì)胞數(shù)量明顯增加，組織勻漿TNF-α含量增加。TNF-α不僅對肺組織有直接損傷作用，而且促使中性粒細(xì)胞聚集、黏附于血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過釋放氧自由基和溶酶體酶導(dǎo)致肺血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、增加毛細(xì)血管壁通透性［11］;TNF-α還可以進一步誘導(dǎo)肺血管內(nèi)巨噬細(xì)胞的聚集和浸潤，使iNOS和eNOS表達增加，引起NO持續(xù)、大量釋放［2］。過量的NO有強烈的舒血管效應(yīng)，是引起肺血管擴張并進而導(dǎo)致低氧血癥發(fā)生的重要介質(zhì)。NO還可以和超氧陰離子發(fā)生快速非酶促化學(xué)反應(yīng)，生成ONOO-。ONOO-可使脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致細(xì)胞膜功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷，氧化肺泡表面活性物質(zhì)，是較NO和超氧陰離子氧化性及細(xì)胞毒性更強的物質(zhì)［2，12］;TNF-α誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧自由基可對肺間質(zhì)透明質(zhì)酸膠原氧化，改變間質(zhì)的穩(wěn)定性，加重肺損傷［13］。本實驗同時檢測到肺勻漿中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量升高，其也可誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)進一步擴大，細(xì)胞損傷加重，肺水腫滲出嚴(yán)重。相關(guān)性檢測顯示，肺勻漿TNF-α與MDA、NO和ONOO-含量呈顯著正相關(guān)，說明除腸源性內(nèi)毒素對肺的直接損傷外，LPS作用后釋放的最早炎癥因子TNF-α可進一步誘導(dǎo)多種血管活性物質(zhì)和炎癥介質(zhì)的釋放，放大對肺組織的損傷效應(yīng)。實驗中大黃素處理組肺系數(shù)明顯低于模型組，鏡下觀察肺泡腔及間隔中巨噬細(xì)胞數(shù)量明顯減少，提示大黃素處理組肺毛細(xì)血管損傷程度減輕、炎癥滲出減少，肺水腫有所緩解;且EMD處理組肺勻漿TNF-α、MDA、NO和ONOO-的含量明顯降低，肺組織炎癥減輕，這些結(jié)果均提示EMD很可能通過某些機制直接逆轉(zhuǎn)肺臟的損傷:(1)抑制肺巨噬細(xì)胞受炎癥刺激后TNF-α的釋放;(2)強有力地抑制核轉(zhuǎn)錄因子κB的活化，減弱繼發(fā)性炎癥因子形成的“細(xì)胞因子級聯(lián)反應(yīng)”［14-15］;(3)抑制肺組織炎癥反應(yīng)中iNOS的激活，減少NO的大量合成和釋放［2］; (4)降低肺組織MDA含量、保護超氧化物歧化酶(super-oxide dismutase，SOD)活性，減輕肺內(nèi)自由基對肺泡上皮細(xì)胞的損傷［2］。因此我們認(rèn)為EMD也可通過在肺臟發(fā)揮直接的抗炎、清除氧自由基、抗氧化等作用來減輕肝纖維化時由腸源性內(nèi)毒素所致的肺組織損傷。

綜上所述，在肝纖維化過程中多種機制參與了肺臟的病理改變。EMD既可通過間接作用減少肝纖維化對肺臟的損傷，也可能通過直接作用使肺部病變有所緩解。本實驗用不同劑量EMD比較對大鼠肝纖維化肺損傷的治療效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種劑量無明顯差異，說明EMD抗纖維化肺損傷的治療劑量范圍較大。對其治療作用的深入研究，將為臨床揭示肝肺綜合征發(fā)病的新機制，尋求有效的非手術(shù)治療途徑提供新思路。

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Protective effect of emodin on lung injury induced by hepatic fibrosis in rats

ZHANG Li-li1，ZHANG Hui-ying1，WANG Li-min2，LI Xu-jiong3，JIA Jian-tao1，Lü Minli4，F(xiàn)AN Yi-min2，ZHAN Cui-ying3，LIU Ming-she5，ZHAO Zhong-fu5，HAN De-wu6，CHENG Ji7
(1Department of Pathophysiology，2Functional Integrative Laboratory，3Department of Physiology，5Institute of Hepatology，Changzhi Medical College，Changzhi 046000，China;4ICU of The Second Hospital，6Institute of Hepatology，Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China;7Research Center for Liver Disease，Keck School of Medicine，University of Southern California，Los Angeles，CA 90089，USA.E-mail:zhanghy2001@163.com)

AIM:To explore the protective effect of emodin on lung injury induced by hepatic fibrosis in rats.METHODS:The hepatic fibrosis rat model was established with multiple pathogenic factors(CCl4，ethanol，high fat，high cholesterol and low choline)and treated with different doses(20 mg/kg and 40 mg/kg)of emodin for 4 weeks.The hepatic index was measured.The biochemical indexes，endotoxin，homocysteine，albumin，aspartate aminotransferase，alanine aminotransferase，total bilirubin，total cholesterol and triglyceride，and hepatic fibrosis indexes，hyaluronic acid，laminin，collagen IV and procollagenⅢ，were detected.The histopathological changes of the liver were observed.The pulmonary index was determined.The histopathological changes of the lungs were observed.The levels of tumor necrosis factor α(TNF-α)，malondialdehyde(MDA)，nitric oxide(NO)and peroxynitrite(ONOO-)in the lung tissues were analyzed.RESULTS:The rat hepatic fibrosis model was successfully established.In model group，lung edema and inflammation occurred，and the pulmonary index and the levels of TNF-α，MDA，NO and ONOO-in the lung tissues were increased significantly.In emodin treatment groups，the pulmonary indexes were lower than that in model group.The pathological injury of the lung tissues was alleviated.The levels of TNF-α，MDA，NO and ONOO-in the lung tissues were decreased.CONCLUSION:Emodin has a protective effect on lung injury induced by hepatic fibrosis in rats.

Emodin;Liver fibrosis;Hepatopulmonary syndrome;Lung injury

R363

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2014.02.017

1000-4718(2014)02-0291-06

2013-09-17

2013-12-10

國家自然科學(xué)基金(No.81070339);山西省國際科技合作計劃(No.2010081068);山西醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生理學(xué)省部共建教育部重點實驗室主任基金資助項目(No.2010-09);山西省回國留學(xué)人員科研基金資助項目(No.211-091)

△通訊作者Tel:0355-3031235;E-mail:zhanghy2001@163.com