人參炮制方法研究

摘要：目的 研究利用烘制法炮制人參的炮制工藝研究。方法 用HPLC方法，以人參皂苷為指標(biāo)，進行測定，對比烘制法與傳統(tǒng)炮制法對人參皂苷類成分的變化，確定烘制法的人參的炮制工藝方法。結(jié)果 所確定的含測方法穩(wěn)定可行，所制定的烘制方法可作為人參的炮制法。

關(guān)鍵詞：人參皂苷；炮制；HPLC；烘制

人參為五加科多年生草本植物，含有人參皂苷、多種氨基酸等。研究表明其藥理作用多表現(xiàn)在[1]，對中樞神精系統(tǒng)的雙向調(diào)節(jié)作用，人參的適應(yīng)原樣作用，對免疫功能的作用等。其加工炮法如紅參。本研究擬以烘制法代替蒸制法對人參進行炮制，研究方法的可行性。

1 儀器與試劑

P230II大連依利特（UV230II紫外檢測器，EC2006-色譜數(shù)據(jù)處理工作站），KQ3200超聲波清洗器（江蘇昆山），人參藥材（產(chǎn)地吉林長白山，經(jīng)鑒定為五加科植物人參的干燥根莖）；人參皂苷對照（Rg1，Rb1，純度>98%）；高效液相色譜用水為純凈水，乙腈為色譜純；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1人參皂苷的含量測定方法

2.1.1色譜條件 Welch Ultimate LP-C18 （250mm×4.6mm，5μm）；流動相以乙腈為A，水為流動相B，進行梯度洗脫。檢測波長：203nm，流速：1.0mL/min；柱溫：30℃。

2.1.2供試品溶液制備 取本品細(xì)粉約1g，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇定容，稱定，超聲處理（功率240W，頻率45kHz）30min，加甲醇補足重量，過濾，取續(xù)濾液備用。

2.1.3對照品溶液制備 取人參皂苷Rg1、Rb1對照品適量，加甲醇溶解，配成0.105mg/ml、0.097mg/ml對照品溶液，即得。

2.1.4空白試驗 吸取溶劑20μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果無干擾。

2.1.5測定結(jié)果 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液20μL。依次進樣，在上述色譜條件下測定，記錄色譜圖。

2.2含量測定方法學(xué)考察

2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取人參皂苷Rg1、Rb1對照品適量，加甲醇制成0.525mg/ml、0.485mg/ml的溶液。精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別至于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別量取20μl，注入HPLC色譜儀中，按上述色譜條件測定，測定峰面積。以對照品溶液的進樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程：Rg1Y= 120.68 X+0.161，r=0.9997、Rg1Y= 120.68 X+0.161，r=0.9997。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1在1.05～5.25μg、Rb1在0.97～4.85μg之間峰面積和進樣質(zhì)量之間具有良好的線性關(guān)系。

2.2.2精密度試驗 精密吸取對照品溶液，在2.1.1色譜條件下，依法連續(xù)測定6次，Rg1、Rb1的RSD 分別為0.88%、1.05%，表明本方法精密度良好。

2.2.3穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，于0、2、4、6、8h測定蒺藜峰皂苷元色譜峰面積，測定結(jié)果Rg1、Rb1的RSD 分別為0.64%、1.12%，表明，溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.4重復(fù)性試驗 取樣品，按2.1.2項下供試品溶液制備，根據(jù)2.1.1項下色譜條件及檢測方法測定5次，記錄峰面積，測定結(jié)果Rg1、Rb1的RSD 分別為1.56%、1.34%，表明方法重復(fù)性良好。

2.2.5回收率試驗 分別精密稱取人參樣1g，分別加Rg1、Rb1對照品5.31mg/ml、4.89mg/ml，1ml，按2.1.2項下方法處理，按2.1.1項下色譜條件進行測定，按外標(biāo)法以峰面積計算回收率，結(jié)果RSD值為1.04%、1.05%，表明方法的回收率試驗符合相關(guān)要求。

2.3人參皂苷加熱處理的方法 供試品藥材的制備[2]取凈人參生品50g，于粉碎機中粉碎5次（大約10s/次），過篩，留取一份作為生品，編號為人參1，其余置于玻璃皿中，編號為人參2，于電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱內(nèi)分別于100℃、120℃烘制40min。另取人參生品，按蒸制法炮制（上籠屜蒸2～3h，至參根呈紅棕色，皮呈半透明狀，取出晾干，曬干），粉碎，過篩，制得蒸品編號為人參3。將上述3份樣品于相同溫度、濕度條件下放置24h后，精密稱量人參粉末1g，分別放于具塞錐形瓶中，按前述含測方法進行測定。不同人參炮制品炮制方法，外觀性狀及稱取重量見表1。

2.4烘制法與蒸制法對人參皂苷類成分的變化影響結(jié)果 取人參不同樣品，按2.1.2方法進行處理，按2.1.1色譜條件進行含量測定，見表2。

3 討論與結(jié)論

3.1本實驗采用紫外檢測器波長203nm末端吸收進行檢測。由于人參皂苷類成分在紫外下吸收較弱，應(yīng)該采用質(zhì)量型檢測器，如蒸發(fā)光檢測器、電噴霧檢測器等，但由于紫外檢測器應(yīng)用廣，同時本實驗的方法學(xué)研究表明，人參皂苷類成分在紫外203nm條件下進行測定，符合相關(guān)要求，于是確定其為檢測方法。

3.2本實驗結(jié)果表明，人參經(jīng)過烘制法、蒸制法炮制處量后，人參皂苷（人參皂苷Rg1，Rb1）的含量均有提高，其中人參皂苷Rg1的含量經(jīng)100℃、120℃烘制后，比蒸制法相比有顯著提高，而且100℃的相對最高。人參皂苷Rb1的含量經(jīng)100℃、120℃烘制后，都比蒸制法高，因此確定炮制法是100℃，烘40min。

3.3由于烘制法相對于蒸制法，操作更簡便易行，而且加工時間短，節(jié)約能源。因此所確定的方法有一定的實際意義。

參考文獻：

[1]胡國臣.現(xiàn)代中藥炮制手冊[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2002：234.

[2]肖盛元，羅國安.紅參加工過程中人參皂苷化學(xué)反應(yīng)HPLC/MS/MS研究[J]. 中草藥，2005，01：40-43.編輯/哈濤