淺談高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用與發(fā)展

摘要：主要研究高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用及其發(fā)展前景。首先對(duì)高效液相色譜法的產(chǎn)生和發(fā)展進(jìn)行了回顧，之后以抗生素、中藥、保健品和中成藥的成分檢測(cè)為例，介紹了高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用，認(rèn)為這種方法前景廣闊。

關(guān)鍵詞：液相色譜儀；藥品檢驗(yàn)

高效液相色譜法出現(xiàn)在上個(gè)世紀(jì)60年代，在醫(yī)藥、環(huán)保、生命科學(xué)和石油化工等領(lǐng)域中都得到了廣泛的應(yīng)用，在藥品檢驗(yàn)中也發(fā)展迅速[1]。我國(guó)在1985年開(kāi)始使用高效液相色譜法進(jìn)行藥品檢驗(yàn)，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展成為了一種比較主流的藥品質(zhì)量控制方法。

高效液相色譜法是從經(jīng)典液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展出來(lái)的一種效率更高、效果更好的色譜方法。和經(jīng)典的液相色譜法相比，這種方法采用了顆粒更細(xì)的均勻規(guī)則的固定相，傳質(zhì)阻抗小，分離效率高。同時(shí)這種方法輸送流動(dòng)相使用了高壓輸送泵，分析所需時(shí)間更短，同時(shí)也采用了靈敏度更高的檢測(cè)器，獲得了更高的靈敏度，為高效液相色譜法的發(fā)展帶來(lái)了更大的空間。

1 高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

在這種方法中，色譜留的時(shí)間、組分結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等是定性參數(shù)，對(duì)這種技術(shù)在藥物鑒別中的應(yīng)用有著確定的作用。目前我國(guó)在藥典中對(duì)頭孢羥氨芐進(jìn)行成分鑒別就采用了這種高效液相色譜法[2]。對(duì)照樣品和待驗(yàn)藥品對(duì)比主峰保留時(shí)間相同則證明成分一致，符合要求。

高效液相色譜法對(duì)頭孢拉定、曲安奈德等藥品鑒別也有著良好的效果。比如中藥防風(fēng)有著很多同名異物，很多是地區(qū)性習(xí)用品，例如有水防風(fēng)、川防風(fēng)和云防風(fēng)等，這些藥品臨床藥理有著很大的不同。為了區(qū)分，可以采用薄層色譜進(jìn)行鑒別，采用從正品防風(fēng)中提取的13中香豆素和色原酮等化合物進(jìn)行對(duì)照，采用高效液相色譜技術(shù)鑒別，使用效果十分理想，能夠有效的避開(kāi)其他成分造成的干擾。

高效液相色譜法還能夠用來(lái)測(cè)定鳳尾茶中的黃酮含量。鳳尾茶粉碎之后使用甲醇溶液浸泡，采用超聲提取，過(guò)濾后測(cè)定濾液。選擇甲醇-乙腈磷酸為流動(dòng)相。設(shè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。使用高效液相色譜技術(shù)檢測(cè)鳳尾茶中的黃酮含量效果可靠，回收率高。相關(guān)文獻(xiàn)記載高效液相色譜分析法還能夠用來(lái)進(jìn)行白芍藥材中芍藥苷的含量，進(jìn)而確定哪個(gè)產(chǎn)地的白芍中芍藥苷含量最高。這種方法使用Hypersil C18的譜柱，選用乙腈-0.05%磷酸水作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為230nm，設(shè)定柱溫為25℃，設(shè)定流速為1.0ml/min。通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)，證明毫州產(chǎn)的白芍中的芍藥苷含量最高。實(shí)驗(yàn)證明高效液相色譜法測(cè)定不同產(chǎn)地的芍藥苷比較準(zhǔn)確可靠，育著較高的重復(fù)性。

高效液相色譜法在藥品監(jiān)管方面的檢查應(yīng)用效果也比較優(yōu)異。近些年藥品和保健品非法添加違禁藥品的事件時(shí)有發(fā)生，采用高效色譜分析法為藥監(jiān)部門(mén)對(duì)非法添加違禁藥品的檢驗(yàn)工作質(zhì)量的提高提供了支持。

高效液相色譜法還能夠用于進(jìn)行抗生素的檢測(cè)。抗生素濫用造成了耐藥菌株的增加。使用反相高效液相色譜法，采用磷酸二氫鈉-甲醇溶液作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為268nm，測(cè)定藥品中復(fù)方利福平膠囊中的異煙肼和利福平的含量，回收率能夠達(dá)到99%[3]。

藥品相關(guān)物質(zhì)檢測(cè)。藥品在生產(chǎn)過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)會(huì)產(chǎn)生一些相關(guān)物質(zhì)。為了保證藥品成分合理，保證藥品治療的安全可靠，需要對(duì)相關(guān)物質(zhì)的含量進(jìn)行控制。一些相關(guān)物質(zhì)的普遍比較微量，常規(guī)的薄層色譜法檢查方法的靈敏度不能達(dá)到檢測(cè)要求。

同時(shí)采用高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜檢測(cè)器-雙波長(zhǎng)紫外線檢測(cè)器聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)能夠有效進(jìn)行抗疲勞、壯陽(yáng)藥物中的違規(guī)成分進(jìn)行研究，包括西地那非和伐地那非等成分，這種方法能夠有效排除中草藥基本材料的保健品復(fù)雜成分的干擾。實(shí)際檢測(cè)要對(duì)保健品同時(shí)進(jìn)行定性檢測(cè)和定量檢測(cè)。這幾種違禁品的檢測(cè)濃度、范圍峰值面積以及濃度有著良好的線性關(guān)系，獲得了較好的回收率。

2 高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展

通過(guò)高效液相色譜技術(shù)獲得更廣闊的應(yīng)用空間。目前比較先進(jìn)的設(shè)備技術(shù)主要有和質(zhì)譜儀的聯(lián)合、柱切換技術(shù)的應(yīng)用、梯度洗脫等，通過(guò)和這些先進(jìn)技術(shù)的聯(lián)合使用，同時(shí)引進(jìn)了分子生物學(xué)和現(xiàn)代分子藥理學(xué)的先進(jìn)理念，使其在藥品檢驗(yàn)中發(fā)揮出了更大的作用。

隨著高效液相色譜技術(shù)抗復(fù)雜成分干擾能力越來(lái)越強(qiáng)，甚至液相色譜和質(zhì)譜的聯(lián)用已經(jīng)成為了國(guó)外藥品檢驗(yàn)中測(cè)定低濃度生物藥品有效成分及其代謝產(chǎn)物的重要方法。對(duì)于一些中藥復(fù)方注射液，包括清開(kāi)靈等，進(jìn)行其有效成分如膽酸類(lèi)成分的測(cè)定使用液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)合的方式，比較準(zhǔn)確。

高效液相色譜和核磁共振聯(lián)用也有著較大的發(fā)展空間，同時(shí)隨著新技術(shù)的不斷融入，高效液相色譜分析法逐漸產(chǎn)生了信息化、自動(dòng)化和智能化的新變化。

3 結(jié)論

本文對(duì)高效液相色譜法在藥品檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行了研究總結(jié)，認(rèn)為高效液相色譜法能夠有效、準(zhǔn)確、高效率的進(jìn)行藥品含量的測(cè)定，還能夠進(jìn)行藥品相關(guān)物質(zhì)的檢查，對(duì)非法違禁成分擋風(fēng)監(jiān)控和抗生素進(jìn)行檢測(cè)。高效液相色譜法有著較高的抗干擾能力，對(duì)成分復(fù)雜的中藥以及以中藥為基礎(chǔ)的保健品中的違禁品的測(cè)量效果良好，對(duì)規(guī)范保健品市場(chǎng)有著重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉葦，金城，孔維，等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測(cè)定牛黃中多種有效成分含量及其質(zhì)量相關(guān)性研究[J].分析化學(xué)， 2010， 38（4）： 522-526.

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編輯/蘇小梅