氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素及影響因素

摘要：我國(guó)目前在氣相色譜法測(cè)定食品中，甜蜜素的測(cè)定方法是：在酸性情況下，利用亞硝酸鈉和環(huán)已基氨基磺酸鈉兩者進(jìn)行反應(yīng)生成環(huán)已醇，環(huán)已醇再和亞硝酸鈉發(fā)生化學(xué)反應(yīng)生成環(huán)己醇亞硝酸鈉。經(jīng)過(guò)相關(guān)測(cè)定，反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物中，有兩個(gè)色譜峰，是環(huán)已醇亞硝酸鈉和環(huán)已醇。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，甜蜜素想要具備良好的線性關(guān)系和較低的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差必須將濃度控制在每毫升中的含量是0～2.5mg。本文就氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析和探討，提出了相關(guān)影響因素的解決對(duì)策。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法；甜蜜素；影響因素；食品

據(jù)有關(guān)報(bào)道提出，人體中甜蜜素的含量過(guò)多，會(huì)對(duì)人的身體健康造成不利影響，嚴(yán)重的還會(huì)致癌，因此，我國(guó)國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對(duì)食品添加劑中甜蜜素的規(guī)定是每千克中含量不能超過(guò)0.65g，以保證食品的安全食用[1]。甜蜜素的化學(xué)名稱為環(huán)已基氨基磺酸鈉，它是一種人工合成的甜味劑，在冰淇淋、蜜餞、果凍等食品中被廣泛的運(yùn)用[2]。目前，普遍使用的甜蜜素檢測(cè)方法主要有氣相色譜法、薄層法和比色法等。其中，氣相色譜法因?yàn)槠浜?jiǎn)單、方便、快捷和無(wú)污染等特點(diǎn)受到了各國(guó)研究者的青睞。

1實(shí)驗(yàn)階段

1.1實(shí)驗(yàn)儀器 氣相色譜儀，帶氫火焰離子化檢測(cè)器和自動(dòng)液體進(jìn)樣器；漩渦混合器；自動(dòng)進(jìn)樣針；電子天平。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑 用于冷藏的試劑有：含量為50g/L的亞硝酸鈉溶液、正已烷和含量為100g/L的硫酸溶液；蒸餾水；環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中環(huán)已基氨基磺酸鈉的含油量要大于98%；沉淀劑有乙酸鋅溶液（含量200g/L）和亞鐵氰化鉀溶液（含量100g/L）。

1.3色譜條件 將氣化室溫保持在220℃；色譜柱的溫度為50～60℃，其中色譜柱是HP-5DE 毛細(xì)管柱（長(zhǎng)為30m，內(nèi)徑為0.32mm，內(nèi)層厚度為0.25nm）；FID檢測(cè)器的溫度為240℃；柱流量為7ml/min；空氣流量為300mA/min；尾吹流量（氮?dú)猓?5ml/min；分流比為10：1；氫氣的流量為50ml/min。

1.4方法

1.4.1制備標(biāo)準(zhǔn)曲線 用6個(gè)50ml含量的具塞比色管分別滴入甜蜜素為2.5ml、2ml、1.5ml、1ml和0.5ml，加入適量蒸餾水后搖勻并放在冰浴中，再分別加入5ml亞硝酸鈉溶液和硫酸溶液，精置10min后再加入正已烷，最后將試管放入漩渦混合器震動(dòng)1min。等到分層之后，提取上層液體放入自動(dòng)進(jìn)樣瓶，最后觀察在氣相色譜儀中的情況，以濃度為縱坐標(biāo)，響應(yīng)值面積為很坐標(biāo)繪成相應(yīng)的曲線圖。

1.4.2實(shí)驗(yàn)樣品 測(cè)試中要用到的固體樣品有：餅干、面包和糕點(diǎn)類粉碎樣品，果干、涼果和蜜餞類剪碎的樣品；水果罐頭、果凍和腌菜類樣品固體飲料類粉狀樣品。液體樣品：醬油、飲料等搖勻后直接取用。

1.4.3制備實(shí)驗(yàn)試樣 固體試樣：在100ml的容量瓶中放入1～10g樣品，加入70ml水搖勻并浸泡1h，然后加入1～4ml的沉淀劑亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液，再加入水搖勻并靜置沉淀，最后取20ml過(guò)濾液放入含量為50ml的具塞比色管中。

1.5測(cè)定結(jié)果 最后，根據(jù)甜蜜素液體和固體的不同計(jì)算公式，分別計(jì)算出甜蜜素中的含量。

2結(jié)果與分析

2.1實(shí)驗(yàn)評(píng)估 在用氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素的含量的試驗(yàn)過(guò)程中，可以看出反應(yīng)進(jìn)行后有兩個(gè)衍生峰出現(xiàn)（見(jiàn)圖1），其中第一個(gè)峰是溶劑峰，第二個(gè)是甜蜜素衍生峰，第三個(gè)是甜蜜素副衍生峰。為了確保實(shí)驗(yàn)測(cè)定數(shù)據(jù)的精密度和可靠性，可以采用上述的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)同一樣品進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)。

2.2影響因素的分析

2.2.1搖勻方式的影響 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，試管中所裝的液體的搖勻程度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中甜蜜素的含量有一定的影響。采用上述的實(shí)驗(yàn)方法，取同樣的試樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，要求搖勻次數(shù)不同，可以得出甜蜜素含量的不同值，并且混合器震動(dòng)的次數(shù)越多甜蜜素的峰面積越大。

2.2.2沉淀劑加入量的影響 在用氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素的含量的試驗(yàn)過(guò)程中，為了檢測(cè)沉淀劑對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)，證明了沉淀劑加入量的多少對(duì)甜蜜素的含量有關(guān)。取同一種樣品，分別加入不同量的沉淀劑，會(huì)發(fā)現(xiàn)沉淀劑的加入量在1～4ml的時(shí)候?qū)y(cè)定結(jié)果的影響不是很大。然后再進(jìn)行一次不加沉淀劑的實(shí)驗(yàn)，對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)加入沉淀劑以后，提取液的乳化現(xiàn)象消失了，與此同時(shí)，會(huì)發(fā)現(xiàn)加入氯化鈉的分成效果沒(méi)有加入沉淀劑的效果好。

2.3反應(yīng)試劑存放時(shí)間的影響 同樣為了測(cè)試反應(yīng)試劑對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)。在相同的試管中放入同一種樣品的同一量標(biāo)液，加入存放時(shí)間各不相同的反應(yīng)試劑，反應(yīng)后根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)常溫避光的存放條件下，反應(yīng)試劑在一定的時(shí)間內(nèi)具有相對(duì)的穩(wěn)定性，對(duì)食品中甜蜜素的含量的測(cè)定結(jié)果基本上沒(méi)有影響。

2.4衍生反應(yīng)試劑和提取劑的影響 食品中甜蜜素的含量的測(cè)定中，運(yùn)用氣相色譜法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在反應(yīng)中會(huì)用到不同的試劑，為了檢測(cè)試劑溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果是否有影響，可以進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。取同一種樣品，進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，分別加入不同溫度的衍生反應(yīng)試劑和提取劑，按照正常的實(shí)驗(yàn)順序進(jìn)行衍生反應(yīng)。最后根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)衍生反應(yīng)試劑和提取劑的溫度不會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。但是，在溫度較高的情況下，亞硝酸鈉在酸性條件下會(huì)分解出三氧化二氮，呈現(xiàn)棕色，釋放的氣味具有刺激性，因此，一般情況下是在溫度比較低的情況下進(jìn)行反應(yīng)和提取，以免對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境造成影響。

2.5衍生反應(yīng)時(shí)間的影響 在測(cè)試氣相色譜法測(cè)定食品甜蜜素的含量試驗(yàn)中，有關(guān)人員也進(jìn)行了衍生反應(yīng)時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果是否有影響的實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)中衍生反應(yīng)的時(shí)間在10min以后，對(duì)同一種樣品中甜蜜素的含量沒(méi)有影響，但是可以提高樣品的回收率。與此同時(shí)，衍生時(shí)間越長(zhǎng)，還可以減少整個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間消耗，提高實(shí)驗(yàn)的時(shí)效性。

2.6提取液存放時(shí)間的影響 在氣相色譜法測(cè)定甜蜜素含量的試驗(yàn)中，也可以采用上述的方法進(jìn)行提取液存放時(shí)間和存放溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果是否有影響的實(shí)驗(yàn)。取同一種樣品的提取液，分別存放在不同的溫度下和存放不同的時(shí)間，根據(jù)相同條件的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，提取液存放時(shí)間的不斷加長(zhǎng)，主衍生物會(huì)慢慢的轉(zhuǎn)化成副衍生物，在這個(gè)過(guò)程中，回收率也會(huì)逐漸降低，所以，提取液的存放時(shí)間不能太長(zhǎng)，不然會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的結(jié)果造成一定的影響[3]。相比較提取液隨著存放溫度的逐漸降低，主衍生物的轉(zhuǎn)化速度會(huì)變慢，在零攝氏度的時(shí)候保持穩(wěn)定狀態(tài)。因此，提取液的存放溫度在零攝氏度是最合適的，以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3結(jié)論

綜上所述，運(yùn)用氣相色譜法可以很好的測(cè)定食品中甜蜜素的含量，其測(cè)定結(jié)果具有很高的準(zhǔn)確性和可比性。本文將氣相色譜法測(cè)定過(guò)程中所要受到的影響因素都進(jìn)行了分析和探討，提出在一定條件下不利的影響都是可以避免，因此，在測(cè)定的過(guò)程中，一定要采取有效的策略，提高測(cè)定的時(shí)效性，保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性[4]。高科技信息網(wǎng)絡(luò)時(shí)代，食品甜蜜素的含量測(cè)定，需要不斷創(chuàng)新測(cè)定方法，以更有效的提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性。

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編輯/許言