摘要:測定膜莢黃芪中降壓活性成分 γ-氨基丁酸含量,確定根、莖、葉各部分含量差異。用蒸餾水作為溶劑振蕩4h提取GABA,γ -氨基丁酸能與苯酚在次氯酸鈉作用下形成藍(lán)綠色化合物,通過比色法在645nm處測定溶液的吸光度鑒定其含量。比色法測得膜莢黃芪根、莖、葉及全株的 γ-氨基丁酸含量平均值為莖<全株<根<葉片。
關(guān)鍵詞:黃芪;γ-氨基丁酸;比色法;降壓成分
黃芪又名黃耆、獨(dú)根、二人抬,為豆科植物膜莢黃芪、蒙古黃芪的干燥根。其味甘,性微溫,具補(bǔ)氣升陽、益衛(wèi)固表、利水消腫、托瘡生肌等功效 [1]?,F(xiàn)代藥理研究表明黃芪主要含有黃芪皂苷、黃酮、黃芪多糖、生物堿、 γ-氨基丁酸(GABA)、苦味素、多種氨基酸、維生素、以及硒、鋅、鐵等人體必需微量元素,因此有增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、保肝、保護(hù)腎功能、降血糖、調(diào)節(jié)血壓的作用[2],其中黃芪對血壓具有雙向調(diào)節(jié)作用,能利尿降壓和降低動脈壓,能直接擴(kuò)張冠狀動脈,從而改善心功能[3]。而黃芪中的降壓成分為 γ-氨基丁酸,其降壓強(qiáng)弱與 γ-氨基丁酸的含量成正比[4],因此,本實驗選擇了 γ-氨基丁酸為測定指標(biāo),對黃芪中各部分的γ -氨基丁酸進(jìn)行含量測定,對比了黃芪各部分 γ-氨基丁酸含量差異,為合理高效利用黃芪中藥材提供理論參考。
1 資料與方法
1.1 一般資料 材料:選用云南產(chǎn)黃芪全株樣品若干株,經(jīng)云南省農(nóng)科院生物技術(shù)所種質(zhì)資源中心鑒定為膜莢黃芪,樣品分成根、莖、葉,自然風(fēng)干至恒重,粉碎至100~120目,待測。
1.2 方法 原理:按Inatomi和Slaughter的方法測定黃芪GABA,GABA能與酚在次氯酸鈉作用下形成藍(lán)綠色化合物,通過比色法于645nm處可以鑒定其含量。
2 結(jié)果
2.1 不同溶劑在不同處理時間與GABA提取率的關(guān)系 為驗證不同溶劑在不同處理時間上對GABA提取率的關(guān)系,選用了蒸餾水、90%乙醇和95%乙醇在1h、2h、4h、6h下4個不同的振蕩時間處理全株樣品,測得GABA提取率與振蕩時間的關(guān)系如表1所示,由表中數(shù)據(jù)可知,三種溶劑對GABA提取率中,蒸餾水的提取率高于90%乙醇和95%乙醇,振蕩時間上4h和6h沒有顯著差異,因此本實驗采用蒸餾水作為溶劑,振蕩4h作為提取GABA的方法,可完全滿足實驗需要。
2.2 植株不同部位GABA含量差異 含量測定中,選擇20株完整植株分成4組,每組5株,分成葉、莖、根、全株,分別測定GABA含量,測定分析結(jié)果如表2所示,從實驗結(jié)果看出,葉片的GABA含量從255.4~287.3 mg/kg,莖的含量從189.4~216.7 mg/kg,根的含量從236.8~265.2 mg/kg,全株的含量從232.1~255.9 mg/kg,從平均值看GABA含量,莖<全株<根<葉片,說明GABA含量在葉片中累積較多,根的含量居中,莖中含量最低。SD 值和CV%表明數(shù)據(jù)離散度不高,符合正態(tài)分布規(guī)律。
3 討論
GABA作為一種功能性氨基酸,廣泛分布于各種植物體內(nèi),眾多研究均顯示GABA產(chǎn)生與逆境刺激有密切關(guān)系,如極端pH、冷害、熱刺激、鹽、缺氧、干旱和機(jī)械刺激等幾乎所有的惡劣環(huán)境均可以引起植物體中GABA含量增加[5,6],在實驗中,出現(xiàn)了個別植株的GABA含量明顯高于其他植株的現(xiàn)象,這完全由于環(huán)境中高海拔、低溫、缺氧、干旱等情況的刺激下誘導(dǎo)了GABA含量增高的一系列復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)。
黃芪作為一種常用的中藥材,長期以來被應(yīng)用于臨床,但傳統(tǒng)使用方法均只使用根部組織,葉片和莖常被丟棄,試驗中的數(shù)據(jù)顯示出葉片的GABA含量最高,這無疑是對這種藥材的巨大浪費(fèi)。而葉片和莖中也累積了相當(dāng)數(shù)量的GABA,這可能是由于外界氣候條件引起的,因為植株在生長過程中,地上部分的莖和葉裸露在外,空氣的溫差遠(yuǎn)大于地下部分的溫差,為抵御不良刺激,使得GABA在莖和葉中積累,所以出現(xiàn)了葉片含量高于根部的現(xiàn)象。
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