電子顯微鏡在病理診斷過(guò)程中的應(yīng)用研究

摘要：隨著電子顯微鏡技術(shù)的發(fā)展，掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡在臨床診斷中得到了廣泛的普及和應(yīng)用，其能夠有效的識(shí)別病變組織的特征，確定病變的部位。本文詳細(xì)的分析了常規(guī)電鏡、免疫電鏡和掃描電鏡技術(shù)在病理診斷過(guò)程中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：掃描電鏡；透射電鏡；病理診斷；臨床

1 引言

電子顯微鏡利用各種樣品和電子之間的作用信息，針對(duì)樣品進(jìn)行微區(qū)觀測(cè)。隨著電子顯微鏡的應(yīng)用普及和發(fā)展，已經(jīng)誕生了很多種電鏡技術(shù)，包括掃描電鏡、透射電鏡、冷凍電鏡、掃描隧道電鏡等[1]。臨床應(yīng)用中，普遍使用透射電鏡和掃描電鏡，透射電鏡可以有效的觀察組織和細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)，掃描電鏡可以有效觀察細(xì)胞和組織的表面形貌。目前，電鏡技術(shù)已經(jīng)作為病理診斷的一項(xiàng)重要依據(jù)，尤其是應(yīng)用于臨床診斷手段無(wú)法確診的病例中，具有非常明顯的作用。

2 電子顯微鏡在病理診斷過(guò)程中的應(yīng)用

2.1常規(guī)電鏡技術(shù)應(yīng)用 常規(guī)電鏡通常能夠清晰的觀察細(xì)細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)的超微組織結(jié)構(gòu)，比如可以觀察細(xì)胞質(zhì)中的分泌顆粒、細(xì)胞核仁、細(xì)胞核膜、細(xì)胞的染色質(zhì)，觀察細(xì)胞間質(zhì)的基板、外板等。不同的組織類型，具有不同的超微結(jié)構(gòu)特征，即使是低分化的腫瘤細(xì)胞，在很大程度上仍然會(huì)保留同源細(xì)胞的相關(guān)的超微結(jié)構(gòu)，電鏡即可從這些特征上觀察細(xì)胞組織的特征結(jié)構(gòu)，識(shí)別細(xì)胞組織類型和分化的程度[2]。比如在腫瘤病理診斷過(guò)程中，電子顯微鏡可以觀察其超微結(jié)構(gòu)，并且尋找細(xì)胞分化的各類標(biāo)記，以便有效鑒別腫瘤的類型。

觀察腫瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，可以發(fā)現(xiàn)其與正常細(xì)胞存在異常，具體表現(xiàn)的特點(diǎn)是細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu)存在異常，例如鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞質(zhì)中盡管也有部分張力原纖維，但是細(xì)胞間橋發(fā)育差，并且數(shù)量非常少。超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞外形存在分化不同步，導(dǎo)致一些腫瘤細(xì)胞存在非常奇特的形狀，大小不同，從細(xì)胞的類型上無(wú)法有效的準(zhǔn)確判定細(xì)胞的組織學(xué)類型，但是在超微結(jié)構(gòu)下，可以非常清晰的觀察到細(xì)胞組織分化的特征，比如宮頸腺癌等；此外腫瘤細(xì)胞存在多向性分化特征，一般來(lái)講，正常的體細(xì)胞分化時(shí)僅僅對(duì)特定方向的基因進(jìn)行選擇性表達(dá)，細(xì)胞分化表現(xiàn)為單一性，但是腫瘤細(xì)胞分化時(shí)卻存在多個(gè)方向，超微結(jié)構(gòu)下能夠清晰的觀測(cè)到，比如肺的腺鱗癌等[3]。

2.2 免疫電鏡技術(shù)應(yīng)用 免疫電鏡技術(shù)可以分為兩種，一種是免疫凝集電鏡技術(shù)，該技術(shù)使用相關(guān)的抗原抗體凝集反應(yīng)之后，再經(jīng)過(guò)負(fù)染色直接將其放置于電鏡下進(jìn)行觀察，這一種技術(shù)主要用來(lái)診斷病毒性的感染疾病；另一種是免疫電鏡定位相關(guān)的技術(shù)，該技術(shù)使用附帶一種特殊的標(biāo)記的抗體，與相關(guān)的抗原結(jié)合后，將其放置于電子顯微鏡下實(shí)施觀察，確定其分布部位。目前，免疫電鏡定位技術(shù)常用的定位標(biāo)記通常使用膠體金顆粒[4]。臨床上子宮內(nèi)膜癌應(yīng)用膠體金免疫電鏡技術(shù)，可以根據(jù)子宮內(nèi)膜腺上皮體密度和表面積密度等指標(biāo)的改變，有效的鑒別子宮內(nèi)膜中高度分化的子宮內(nèi)膜，顯著降低子宮內(nèi)膜癌的誤診率，因此使用膠體金顆粒進(jìn)行診斷，可以迅速構(gòu)建腫瘤診斷體系。

膠體金顆粒應(yīng)用于免疫電鏡技術(shù)中，其具有定位精確、特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，使用免疫金雙重或者多重的標(biāo)記方法，可以將細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能融為一體，非常有助于臨床了解細(xì)胞內(nèi)不同分子之間的關(guān)系，具有重要的意義[5]。但是，免疫電鏡技術(shù)在應(yīng)用過(guò)程中存在一定的問(wèn)題，它的最大缺陷在于很難在保存抗原活性的同時(shí)保存精細(xì)的超微結(jié)構(gòu)，此外膠體金顆粒滲透能力比較差，并且操作過(guò)程需要較高的清潔度，這些都是目前應(yīng)用過(guò)程中亟待解決的實(shí)際問(wèn)題。

2.3掃描電鏡技術(shù)應(yīng)用 掃描電鏡技術(shù)可以有效的觀查組織或者細(xì)胞表面的相關(guān)結(jié)構(gòu)，可以使用在較大的范圍內(nèi)，有效的觀察病變的結(jié)構(gòu)，因此辨別白血病細(xì)胞分類具有非常決定性的意義[6]。對(duì)于隱球菌性腦膜炎，可以使用掃描電鏡有效的觀察隱球菌表面的形態(tài)發(fā)生的變化，發(fā)現(xiàn)并診斷相關(guān)的病癥，以便更好的診斷患者。掃描電鏡還可以有效的診斷遺傳性口形細(xì)胞增多癥，為臨床提供治療的相關(guān)依據(jù)[7]。掃描電鏡應(yīng)用于急性淋巴細(xì)胞白血病患者過(guò)程中，可以觀察到急淋患者的原始淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)出橢圓形或者圓形，邊緣呈現(xiàn)波紋狀。

3 結(jié)束語(yǔ)

目前，電鏡在病理學(xué)診斷過(guò)程中，不斷的為疾病的診斷提供可靠的依據(jù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，在病理診斷過(guò)程中，電鏡技術(shù)將會(huì)得到更加有效使用。但是單一的電鏡技術(shù)在病理診斷過(guò)程中，存在應(yīng)用的局限性，在其觀察數(shù)據(jù)的過(guò)程中，由于視野的范圍所限，僅僅能夠觀察到少量細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)或者少量的細(xì)胞，同時(shí)這些細(xì)胞都是靜止的、死亡的。因此，使用電鏡技術(shù)與其他技術(shù)相結(jié)合，例如光電聯(lián)合，斷層掃描和三維立體重構(gòu)等，不斷的改良電鏡技術(shù)，將會(huì)促進(jìn)電鏡的診斷技術(shù)上升到一個(gè)新的水平。

參考文獻(xiàn)：

[1]張欠欠，馬莉，王逢會(huì)，等.電鏡技術(shù)在臨床病理診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)療前沿，2011，6（4）：65-65.

[2]管瑜，沈丹丹，周麗萍.發(fā)酵，梨支原體感染小鼠小腸黏膜和胰腺組織細(xì)胞電鏡觀察[J].中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)，2013，29（4）：361-365.

[3]劉保國(guó)，漆松濤，黃廣龍，等.顱咽管瘤微血管超微結(jié)構(gòu)透射電鏡及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子蛋白免疫電鏡研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28（10）：1644-1646.

[4]曹水良，宋元宗，王自能，等.一例Citrin缺陷病患兒棘形紅細(xì)胞的掃描電鏡觀察[J].電子顯微學(xué)報(bào)，2011，30（3）：250-252.

[5]何媛，黃力，任百超.青光眼患者小梁網(wǎng)細(xì)胞線粒體的電鏡觀察[J].中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)，2012，20（3）：4-8.

[6]趙慶芳，趙文考，周紫鵑，等.西伯利亞百合病毒及脫毒的電鏡檢測(cè)[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，47（001）：77-80.

[7]潘曉霞，陳楠.電鏡在遺傳性腎小球疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志，2014，34（3）：238-242.編輯/蘇小梅