金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法在抗—HIV測(cè)定中的應(yīng)用

【摘 要】目的：比較分析金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法在抗-HIV測(cè)定中的應(yīng)用。方法：我院2013年1月至2013年12月間的血標(biāo)本8645份，均采用金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法進(jìn)行HIV抗體檢驗(yàn)，比較分析兩種方法的檢驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：初次檢測(cè)中金標(biāo)法陽(yáng)性率0.46%（40/8645），酶聯(lián)免疫法0.40%（35/8645）；確認(rèn)試驗(yàn)后金標(biāo)法陽(yáng)性率0.42%（36/8645），酶聯(lián)免疫法0.31%（27/8645），經(jīng)免疫印跡法檢測(cè)最終確診抗-HIV陽(yáng)性率0.24%（21/8645），金標(biāo)法假陽(yáng)性率0.17%（15/8624），酶聯(lián)免疫法假陽(yáng)性率0.07%（6/8624），金標(biāo)法假陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫法，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法均可用于抗-HIV測(cè)定中，兩種方法各有特點(diǎn)，臨床中應(yīng)根據(jù)具體情況選擇使用。

【關(guān)鍵字】金標(biāo)法；酶聯(lián)免疫法；抗-HIV

【中圖分類(lèi)號(hào)】R426 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）07-4063-02

艾滋病是當(dāng)前死亡率較高的疾病，且有很長(zhǎng)的潛伏期，在短時(shí)間內(nèi)是不會(huì)出現(xiàn)一些明顯臨床癥狀，現(xiàn)階段艾滋病治療并沒(méi)有有效的措施，及早檢測(cè)提前預(yù)防是主要的防治措施對(duì)HIV抗體進(jìn)行的檢測(cè)，可以有效的控制艾滋病患者病情的惡化，降低其他人艾滋病的感染幾率[1]。當(dāng)前臨床中檢測(cè)HIV抗體的方法主要有金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法，為探討兩種方法的應(yīng)用效果，特選取我院血標(biāo)本行抗-HIV測(cè)定，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

我院2013年1月至2013年12月間的血標(biāo)本8645份，血標(biāo)本來(lái)源于在我院行健康體檢或治療的患者，其中男性5364例，女性3281例，年齡14～86歲，平均年齡（36.5±4.3）歲。采用靜脈采血的方法，采集患者的血樣4～5ml，在進(jìn)行血樣檢測(cè)前所有血樣均沒(méi)有被污染，也沒(méi)有發(fā)生溶血。

1.2 檢測(cè)方法

金標(biāo)法：采用金標(biāo)法試劑（北京金豪有限工資生產(chǎn)，批號(hào)000101），分別加50μL和80μL血清，在放置25min之后，進(jìn)行肉眼觀察，如果試紙上出現(xiàn)2條紅線(xiàn)，則將這個(gè)血樣檢測(cè)判定為陽(yáng)性，出現(xiàn)1條紅線(xiàn)，將血樣的檢測(cè)，判定為陰性，同時(shí)對(duì)紅線(xiàn)出現(xiàn)的時(shí)間進(jìn)行記錄。

酶聯(lián)免疫法：使用酶聯(lián)免疫試劑（上?？迫A生物工程有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2000706）以及相應(yīng)的儀器（TECAN酶標(biāo)儀，PW-960酶標(biāo)洗板機(jī)），酶標(biāo)儀對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷，以波長(zhǎng)（檢測(cè)波長(zhǎng)450nm，參考波長(zhǎng)630nm）A值作為檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)A值≥1時(shí)，說(shuō)明血樣檢測(cè)呈現(xiàn)陽(yáng)性，當(dāng)A值<1時(shí)，說(shuō)明血樣檢測(cè)呈現(xiàn)陰性。

兩種檢測(cè)方法中初次檢驗(yàn)確定為陽(yáng)性的血樣，再次進(jìn)行確診實(shí)驗(yàn)，將再次檢測(cè)確診的陽(yáng)性血樣，送往疾病控制中心進(jìn)行免疫印跡檢測(cè)；酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血樣中，實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程等需要完全的按照相關(guān)的操作進(jìn)行，并且由相同的血樣檢測(cè)人員在同一個(gè)血樣檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室完成血樣的檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，檢測(cè)結(jié)果以構(gòu)成比表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

對(duì)患者的血樣進(jìn)行檢測(cè)，是對(duì)病毒檢測(cè)的一種手段，其中對(duì)HIV抗體進(jìn)行篩查，是發(fā)現(xiàn)HIV病毒攜帶者以及患者的重要方法，在HIV抗體檢測(cè)中，現(xiàn)在出現(xiàn)了多種檢測(cè)方法，其中的酶聯(lián)免疫檢測(cè)的方法在HIV抗體檢測(cè)中有較長(zhǎng)的使用時(shí)間，在HIV抗體檢測(cè)中已經(jīng)擁有了一定的地位[2]，從本次研究結(jié)果來(lái)看，酶聯(lián)免疫法假陽(yáng)性率低于金標(biāo)法，但是酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法，需要使用到精密的檢測(cè)儀器酶標(biāo)儀，對(duì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中的儀器精度、操作人員專(zhuān)業(yè)知識(shí)等均有一定的要求，儀器的使用環(huán)境、操作過(guò)程、操作人員等都會(huì)對(duì)其靈敏度性能產(chǎn)生影響[3]。且在檢測(cè)中需要花費(fèi)大量的時(shí)間，用于急診患者中可能會(huì)延誤患者的病情治療。金標(biāo)法是一種新型的快速診斷技術(shù)，其在血樣HIV抗體等檢測(cè)中，只需要使用一種金標(biāo)診斷試劑，就可以完成血樣的檢測(cè)，在金標(biāo)法最初形成時(shí)期，因?yàn)橄嚓P(guān)的技術(shù)還沒(méi)有成熟和穩(wěn)定，進(jìn)行使得金標(biāo)法的靈敏度和特異性較差，在臨床血樣檢測(cè)中并沒(méi)有廣泛的使用金標(biāo)法，依然采用的是酶聯(lián)免疫法[4]。隨著金標(biāo)法技術(shù)的不斷完善和改進(jìn)，在金標(biāo)法血樣檢測(cè)中使用的金標(biāo)試劑質(zhì)量得到較大的提升和改進(jìn)[5]。從本次研究結(jié)果來(lái)看，金標(biāo)法確診試驗(yàn)陽(yáng)性率為0.42%，酶聯(lián)免疫法為0.31%，與免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果比較兩組的陽(yáng)性符合率均達(dá)到100.0%，兩種方法的假陽(yáng)性率分別為0.17%和0.07%，金標(biāo)法假陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫法，但二者差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明兩種方法均可用于抗-HIV測(cè)定中，而由于金標(biāo)法簡(jiǎn)單便捷，適用于病情緊急的患者，酶聯(lián)免疫法則更適用于大批量標(biāo)本及常規(guī)患者的檢測(cè)中。

綜上所述，金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法均可用于抗-HIV測(cè)定中，金標(biāo)法更為方便快捷，適用于急診患者血標(biāo)本檢測(cè)中，酶聯(lián)免疫法更適用于大批量血液標(biāo)本檢測(cè)中，臨床中應(yīng)根據(jù)具體情況選擇使用。

參考文獻(xiàn)：

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