日立HITACHI 7180糖化血紅蛋白測(cè)定參考區(qū)間驗(yàn)證

摘要：目的 應(yīng)用CLSIC28-A2 文件對(duì)四川邁克試劑在日立HITACHI 7180全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)系統(tǒng)中進(jìn)行參考區(qū)間的驗(yàn)證，確定其是否滿足臨床的要求。方法 運(yùn)用免疫增強(qiáng)速率比濁法，采用我院門(mén)診健康體檢1280例個(gè)體標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，比較參考值和原始參考之間的可比性。結(jié)果 儀器測(cè)定HbAlc，1280例參考個(gè)體中60歲以內(nèi)，有59例（或5%）的觀測(cè)值在原始報(bào)告的參考限之外，廠商或提供參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考區(qū)間可以接受。60歲以上須建立本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間。結(jié)論 我們認(rèn)為，使用四川邁克試劑在日立HITACHI 7180全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，其廠家提供的參考區(qū)間（3.50±5.85%）在一定范圍內(nèi)可接受，但存在年齡差異，需要建立各年齡組的參考區(qū)間。

關(guān)鍵詞：全自動(dòng)生化分析儀；參考區(qū)間；糖化血紅蛋白

隨著各種全自動(dòng)生化儀器使用，同一檢驗(yàn)項(xiàng)目，采用不同的方法和不同的檢驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行檢驗(yàn)，必須使用適當(dāng)?shù)姆椒▉?lái)進(jìn)行檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，如果檢驗(yàn)結(jié)果不可比就必須建立不同儀器、不同方法、不同檢測(cè)系統(tǒng)的參考區(qū)間。我們依據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）28-A2 文件的要求[1]，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室日立HITACHI 7180全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)糖化血紅蛋白參考區(qū)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 檢測(cè)組為2013年1月～3月本院健康體檢1280名人員，并同時(shí)進(jìn)行肝功能、腎功能、血糖、血脂、血常規(guī)測(cè)定。HbAlc用（x±s）表示，參考區(qū)間按x±1.96s計(jì)算。男650人、女630人，年齡15～85歲。

1.2儀器與試劑 儀器為HITACHI 7180全自動(dòng)生化分析儀；試劑盒由四川邁克生物有限公司（批號(hào)0413021），質(zhì)控品 日本生研（高低值分別為18.5% 4.5%，批號(hào)299021），校準(zhǔn)品 四川邁克（批號(hào)0413021），四個(gè)濃度值分別為5.0%、8.5%、12.4%、16.5%。

1.3方法

1.3.1儀器熟悉階段 包括熟悉儀器的日常操作程序，保養(yǎng)程序，樣品準(zhǔn)備校準(zhǔn)以及檢測(cè)程序。

1.3.2方法熟悉階段 在進(jìn)行參考值研究前，應(yīng)對(duì)分析方法的性能進(jìn)行驗(yàn)證評(píng)價(jià)。其內(nèi)容包括總不精密度，不超過(guò)1/3CLIA88允許誤差，不準(zhǔn)確度偏倚不超過(guò)1/2CLIA88允許誤差[2]，最低檢測(cè)限，線性范圍，回收率和影響因素等。如果使用同一型號(hào)分析儀器的重復(fù)測(cè)量，在建立參考區(qū)間時(shí)還要考慮批間差異，技術(shù)人員產(chǎn)生的變異以及儀器之間的變異。無(wú)論是建立參考區(qū)間還是日?；颊邩?biāo)本的檢驗(yàn)，都必須用控制品進(jìn)行常規(guī)質(zhì)量控制。保證同一檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的統(tǒng)一性，準(zhǔn)確可靠性。

1.3.3樣品 采用抗凝血2ml，靜置3h后，以2500rmp離心2min，取血細(xì)胞層20ul，加入R4（溶血液）1ml并溶血，采用免疫增強(qiáng)速率比濁法檢測(cè)糖化血紅蛋白，試劑盒由四川邁克生物有限公司提供，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0 軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。數(shù)據(jù)以均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差表示， 組間差異采用兩樣本均數(shù)比較t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)。

2 結(jié)果

不同性別HbAlc的分布未發(fā)現(xiàn)明顯差異，男850人（4.75±0.56），女590人（4.78±0.57），（t=1.282，P=0.20）；不同年齡分組HbAlc的均值存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以60歲為分界年齡（t=3.45，P=<0.001）；HbAlc的參考值：<60歲為3.47%～5.83%，>60歲為3.72%～6.18%；HbAlc與年齡（r=0.359，P<0.01）均相關(guān)。儀器測(cè)定HbAlc，1134例參考個(gè)體中60歲以下不超過(guò)59例（或5%的結(jié)果）的觀測(cè)值在原始報(bào)告的參考限（3.45%～5.85%）之外，廠商或提供參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考區(qū)間可以接受，60歲以上須建立各實(shí)驗(yàn)室的參考值。采用我院健康體檢1280例個(gè)體標(biāo)本在日立HITACHI 7180生化儀檢測(cè)糖化血紅蛋白的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討論

3.1生物參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果，分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)，它是確定臨床醫(yī)學(xué)中的基本問(wèn)題[3]，臨床檢驗(yàn)對(duì)象是患者，由于年齡，性別，民族，地域的原因差異，因而其參考區(qū)間也應(yīng)有差異[4]。因此，引進(jìn)新儀器或使用新試劑必須對(duì)檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行參考區(qū)間的驗(yàn)證。

3.2生物參考區(qū)間的驗(yàn)證必須在穩(wěn)定，準(zhǔn)確的檢測(cè)系統(tǒng)及方法上進(jìn)行，避免由于檢驗(yàn)誤差造成驗(yàn)證結(jié)果的符合程度，在驗(yàn)證工作前按說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行分析性能的評(píng)價(jià)，制定質(zhì)量目標(biāo)保證檢驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)一性和準(zhǔn)確性，確定一個(gè)可靠的參考區(qū)間非常重要。隨著愈來(lái)愈多新的檢驗(yàn)項(xiàng)目或方法引入實(shí)驗(yàn)室，要求每個(gè)實(shí)驗(yàn)室，無(wú)論其規(guī)模大小，都必須對(duì)廠商提供的參考值進(jìn)行驗(yàn)證以確定自己的參考區(qū)間。因此，本研究采用CLSIC28-A2推薦方法對(duì)HITACHI 7180全自動(dòng)生化分儀器測(cè)定HbAlc進(jìn)行驗(yàn)證，1280例參考個(gè)體中60歲以下不超過(guò)59例（或5%的結(jié)果）的觀測(cè)值在原始報(bào)告的參考限之外，廠商或提供參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考區(qū)間可以接受。本研究表明60歲以上須建立本實(shí)驗(yàn)室的生物學(xué)參考區(qū)間。因此HbAlc的值水平存在年齡差異，必須對(duì)其適用性進(jìn)行驗(yàn)證，不同實(shí)驗(yàn)室需要建立各自的參考范圍。

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