淺析血站系統(tǒng)中對(duì)血型鑒定的規(guī)范化

摘要：本文中對(duì)血型鑒定的基礎(chǔ)理論進(jìn)行了概述，分別從血型初篩、常用方法以及鑒定模式3個(gè)方面對(duì)血型鑒定的常規(guī)程序進(jìn)行介紹，從預(yù)防性控制和回顧性控制2個(gè)方面對(duì)血型鑒定的質(zhì)量控制工作進(jìn)行探討，并對(duì)血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性工作進(jìn)行強(qiáng)調(diào)并得出相應(yīng)的結(jié)論，以期能夠更好地促進(jìn)血型鑒定工作的發(fā)展。

關(guān)鍵詞：血站；血型鑒定；回顧性；預(yù)防性；規(guī)范化

隨著社會(huì)的發(fā)展和國(guó)家經(jīng)濟(jì)的進(jìn)步，科學(xué)技術(shù)的長(zhǎng)足的發(fā)展，越來(lái)越多的先進(jìn)技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到推廣和應(yīng)用。讓醫(yī)學(xué)研究工作有了突飛猛進(jìn)的進(jìn)步。

血型鑒定工作是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中一個(gè)重要的研究和應(yīng)用環(huán)節(jié)。對(duì)血型鑒定的研究及對(duì)血型鑒定結(jié)果可靠性的評(píng)價(jià)是臨床輸血安全的重要輔助性工作。在綜合考慮各方面因素的前提下進(jìn)行血型鑒定工作。這其中，較為重要的便是規(guī)范化的血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)和程序，以及良好的血型鑒定試劑的質(zhì)量。必須通過(guò)行之有效的措施對(duì)血型鑒定工作進(jìn)行規(guī)范，在保證血型鑒定得到正確結(jié)果的前提下提出更有效的可行性建議勢(shì)在必行。為此，本文將針對(duì)這一問(wèn)題進(jìn)行詳細(xì)的論述，①對(duì)血型鑒定的基礎(chǔ)理論進(jìn)行概述，②分別從血型初篩、常用方法以及鑒定模式3個(gè)方面對(duì)血型鑒定的常規(guī)程序進(jìn)行介紹，③從預(yù)防性控制和回顧性控制兩個(gè)方面對(duì)血型鑒定的質(zhì)量控制工作進(jìn)行探討，④對(duì)血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性工作進(jìn)行強(qiáng)調(diào)并得出相應(yīng)的結(jié)論，以期能夠更好地促進(jìn)血型鑒定工作的發(fā)展。

1血型鑒定的理論基礎(chǔ)

血型檢測(cè)時(shí)主要通過(guò)Rh（D）血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)進(jìn)行的，這兩種血型系統(tǒng)都與臨床輸血有著密切的關(guān)系。其中，ABO血型系統(tǒng)主要是通過(guò)對(duì)血紅細(xì)胞表面上的ABH血型抗原物質(zhì)進(jìn)行區(qū)分得到的，若紅細(xì)胞上和血清中含有的分別為A抗原和B抗原，則為A型血；若紅細(xì)胞上和血清中含有的分別為B抗原和A抗原，則為A型血；若抗原A、B只在紅細(xì)胞上出現(xiàn)，而不再血清中出現(xiàn)，則為AB型血；若紅細(xì)胞上既沒(méi)有抗原A也沒(méi)有抗原B，但有抗原H，而血清中卻含有抗體A、B，則為O型血。同時(shí)，在這樣的ABO血型系統(tǒng)之中，還存在A1、A2、A3等與A型類(lèi)似的A亞型，B1、B2、B3等的B亞型等。

在Rh（D）血型鑒定中，主要是通過(guò)對(duì)紅細(xì)胞表面上的D血型抗原物質(zhì)進(jìn)行區(qū)分的，表面上有D抗原物質(zhì)的紅細(xì)胞能夠與抗D血清發(fā)生凝集，這種情況在臨床上劃分為Rh（D）血型陽(yáng)性；而紅細(xì)胞表面上無(wú)D抗原，不能同抗D血清發(fā)生凝集的在臨床上通稱(chēng)為Rh（D）血型陰性。并且在Rh（D）血型系統(tǒng)中，還存在DⅥ、DU等不完全D抗原或弱D抗原，這些抗原較正常的D陽(yáng)性紅細(xì)胞抗原相比要弱一些，但依然存在抗D的可能性，因此在臨床上對(duì)這一類(lèi)情況統(tǒng)稱(chēng)為弱D型，但成為受血者時(shí)便當(dāng)做Rh（D）血型陰性對(duì)待，當(dāng)成為獻(xiàn)血者時(shí)，則作為Rh（D）血型陽(yáng)性對(duì)待。

2血型鑒定的常規(guī)程序

常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。

ABO血型系統(tǒng)通常利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，通過(guò)正（細(xì)胞試驗(yàn)）、反（血清試驗(yàn)）定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型，正定型試驗(yàn)是指有已知抗體的定型試劑（通常為單克隆抗體試劑）和被檢紅細(xì)胞反應(yīng)所檢測(cè)出的ABO血型；反定型試驗(yàn)則是被檢者血清和已知ABO抗原的試劑紅細(xì)胞反應(yīng)所檢測(cè)出的ABO血型，通常正反定型結(jié)果相互參照，確保定型試驗(yàn)的正確可靠，正反定型不符時(shí)常表明存在ABO亞型及某些特殊病理狀態(tài)；Rh（D）血型也是采用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，用單克隆抗D（IgM）血清和被檢紅細(xì)胞反應(yīng)所檢測(cè)出Rh（D）血型陽(yáng)性或Rh（D）血型陰性，Rh（D）血型陰性者，應(yīng)進(jìn)一步做Rh（D）確認(rèn)試驗(yàn)，以排除Rh（D）弱D型。

需要注意的是：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤平板法反應(yīng)時(shí)間不能少于10 min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。

2.1血型初篩 在進(jìn)行流動(dòng)采血和獻(xiàn)血點(diǎn)采血時(shí)，血站系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行嚴(yán)格的身體檢查并對(duì)合格者進(jìn)行血液初篩工作，并在這一過(guò)程中保留血液標(biāo)本。在進(jìn)行血液初篩時(shí)主要進(jìn)行包括血型初篩在內(nèi)的一系列工作，一般通過(guò)平板法對(duì)ABO血型進(jìn)行手工篩查。受到血站科室分工不同的影響，不同的血站在進(jìn)行血型初篩工作室安排有不同部門(mén)的工作人員，檢測(cè)結(jié)果作為篩查結(jié)果。

2.2血型鑒定的常用方法 血型鑒定應(yīng)嚴(yán)格按照最新版的《血站技術(shù)操作規(guī)程》附則中規(guī)定操作，規(guī)定ABO血型可采用試管法和微板法，微板法可采用全自動(dòng)儀器進(jìn)行。這些方法通過(guò)不同的途徑和原理來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)血型的檢驗(yàn)，全自動(dòng)血型鑒定系統(tǒng)由于其血液標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)血清、試劑紅細(xì)胞等均可由全自動(dòng)加樣儀或全自動(dòng)酶免儀完成，加樣精度高保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性，全自動(dòng)血型儀由于具有樣本條形碼自動(dòng)化掃描和判讀系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)血型鑒定結(jié)果的數(shù)字化判讀，產(chǎn)生的結(jié)果中不僅有最終評(píng)定，還有原始影像的相關(guān)記錄，便于對(duì)結(jié)果的追蹤和查詢(xún)，能夠很大程度上減少或避免鑒定中對(duì)結(jié)果的誤讀等錯(cuò)誤的發(fā)生，通過(guò)局域網(wǎng)將結(jié)果傳輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室的管理系統(tǒng)中，不僅能夠?qū)崿F(xiàn)降低錯(cuò)誤率的重大突破，還能夠在一定程度上節(jié)省試劑，增大樣本處理效率，具有多方面的優(yōu)點(diǎn)。

2.3血型鑒定的模式 《血站技術(shù)操作規(guī)程》中僅是從檢測(cè)方法上和程序上規(guī)定ABO血型和Rh（D）血型的鑒定，而未規(guī)定具體怎么做，血站系統(tǒng)應(yīng)如何進(jìn)行血型鑒定及保證血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠？各個(gè)血站從各自理解角度或?yàn)楸ＷC結(jié)果的準(zhǔn)確可靠所總結(jié)的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)中，摸索并采用相應(yīng)模式來(lái)做血型鑒定?！堆炯夹g(shù)操作規(guī)程》中規(guī)定血型鑒定應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)2次檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)，一致時(shí)才能做出血型檢測(cè)最終結(jié)論。在采供血系統(tǒng)，采用的模式常有3種：A模式：街頭獻(xiàn)血點(diǎn)或流動(dòng)采血車(chē)上檢驗(yàn)員采用平板法手工鑒定ABO血型正定型和Rh（D）血型，以此為初篩結(jié)果錄入血站信息管理系統(tǒng)，血站檢驗(yàn)科血型鑒定崗復(fù)檢崗對(duì)血液標(biāo)本微板法做ABO血型反定型和Rh（D）血型，以此為復(fù)檢結(jié)果錄入血站信息管理系統(tǒng)與初檢比對(duì)，初復(fù)檢結(jié)果相符則為血型鑒定最終結(jié)論；B模式：采血后的針頭血辨由采血點(diǎn)人員采用平板法手工鑒定ABO血型正定型和Rh（D）血型，血型結(jié)果與針頭血辨上所標(biāo)識(shí)的血型是否相符并記錄，以此為初篩結(jié)果錄入血站信息管理系統(tǒng)，，檢驗(yàn)科采用微板法做ABO血型正反定型和Rh（D）血型，以此為復(fù)檢結(jié)果錄入血站信息管理系統(tǒng)與初篩結(jié)果比對(duì)，初復(fù)檢結(jié)果相符則為血型鑒定最終結(jié)論C模式：檢驗(yàn)科采用微板法系統(tǒng)做ABO血型正反定型和Rh（D）血型，血型鑒定結(jié)果過(guò)局域網(wǎng)自動(dòng)傳輸?shù)窖拘畔⒐芾硐到y(tǒng)中，血庫(kù)在血液入庫(kù)時(shí)用平板法核對(duì)血辨血型，與血站信息管理系統(tǒng)中血型結(jié)果比對(duì)，結(jié)果相符為血型鑒定最終結(jié)論。3種模式中初復(fù)檢結(jié)果一致可確定血液標(biāo)本的血型，初復(fù)檢結(jié)果不一致時(shí)再檢方式基本一致，都是由第三者采用試管法對(duì)標(biāo)本血樣和重新留取的辨子血樣進(jìn)行平行雙樣ABO血型鑒定和Rh（D）血型鑒定，以辨子血樣鑒定的血型作為獻(xiàn)血者最終的血型。同時(shí)，在用全自動(dòng)血型鑒定系統(tǒng)做ABO血型反定型時(shí)，也有的血站檢驗(yàn)科采用血液標(biāo)本稀釋血漿與反定型試劑A、B紅細(xì)胞反應(yīng)，而不做O紅細(xì)胞孔。個(gè)人認(rèn)為，應(yīng)加做O紅細(xì)胞孔，如O細(xì)胞孔凝集，則說(shuō)明有冷凝集素和/或意外抗體的干擾，需做進(jìn)一步的試驗(yàn)，更能確保血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

3血型鑒定的質(zhì)量控制

對(duì)血型鑒定的質(zhì)量控制主要可以分為預(yù)防性質(zhì)量控制和回顧性質(zhì)量控制兩種，下面將分別對(duì)這兩種進(jìn)行分析和介紹。

3.1預(yù)防性質(zhì)控 預(yù)防性質(zhì)量控制（預(yù)防性質(zhì)控）主要通過(guò)一系列和一整套完善的科學(xué)管理來(lái)保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，這些質(zhì)控措施主要分布在標(biāo)本、試劑、器材、方法以及結(jié)果等方面的管理上。其中，對(duì)標(biāo)本主要需要采集、送檢和預(yù)處理，標(biāo)本必須充分抗凝，一般標(biāo)本留取后顛倒混勻5～6次以保證抗凝效果；標(biāo)本需在2℃～8℃的儲(chǔ)存，在1 w之內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，將紅細(xì)胞與血漿離心分離；對(duì)試劑主要需要選取規(guī)格、按要求配置、合理貯存、適當(dāng)使用及鑒定，通過(guò)綜合評(píng)定找到信譽(yù)度較好的生產(chǎn)廠家，在篩選之下找到合格并符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的試劑，通過(guò)正反鑒定并相互驗(yàn)證最終選擇合適的試劑按照說(shuō)明說(shuō)投入使用并進(jìn)行貯存；對(duì)器材主要需要進(jìn)行日常維護(hù)和保管、適當(dāng)矯正并合理使用，要對(duì)微板、試管等器材進(jìn)行必要的清潔和干燥，通過(guò)與廠家聯(lián)系讓其對(duì)全自動(dòng)血型儀、全自動(dòng)加樣儀等儀器進(jìn)行校正，做好相關(guān)的保養(yǎng)和必要的維護(hù)工作，對(duì)血型鑒定專(zhuān)用離心機(jī)及顯微鏡等精細(xì)設(shè)備進(jìn)行必要的保養(yǎng)和維護(hù)。平板法方法在操作時(shí)必須要人手工來(lái)完成，比較耗費(fèi)時(shí)間和工作人員勞動(dòng)力，且速度較慢，觀察結(jié)果的難度較高，對(duì)結(jié)果的判斷正確率也較低，比較容易產(chǎn)生血型的誤判，只適用于篩查試驗(yàn)；相比而言，試管法已經(jīng)成為當(dāng)前血型鑒定的最廣泛使用并可信的方法，但是這一方法同樣容易產(chǎn)生人為失誤，對(duì)人力物力的耗費(fèi)較大，為此全自動(dòng)血型鑒定系統(tǒng)（微板法）便應(yīng)運(yùn)而生，成為了血型檢測(cè)的主要方式，這一方法極大地降低了人為操作對(duì)血型檢驗(yàn)的出錯(cuò)影響， ABO血型系統(tǒng)要求做正反定型鑒定，正反定型鑒定相符時(shí)可發(fā)出血型報(bào)告，正反定型鑒定不相符需進(jìn)一步檢測(cè)是否存在ABO亞型或抗體減弱、不規(guī)則抗體存在、冷凝集素的影響等；Rh（D）血型結(jié)果判定較簡(jiǎn)單，只是在鑒定為Rh（D）血型陰性者，需應(yīng)進(jìn)一步試驗(yàn)，以排除Rh（D）弱D型。報(bào)告發(fā)出前需初復(fù)檢工作人員相互核對(duì)，核對(duì)后由審核員審核，確信無(wú)誤后才能發(fā)出血型報(bào)告。

3.2回顧性質(zhì)控 對(duì)于回顧性質(zhì)量控制（回顧性質(zhì)控）還可以分為室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)控兩種。

3.2.1室內(nèi)質(zhì)控 室內(nèi)質(zhì)控是目前普遍采用的質(zhì)量控制方法，但是由于血型鑒定是一種定性方法，結(jié)果呈多樣性，不似定量試驗(yàn)?zāi)軠?zhǔn)確定量及酶免實(shí)驗(yàn)結(jié)果能以數(shù)值判斷，難以采取一種絕對(duì)的質(zhì)控方式。

目前血型鑒定的室內(nèi)質(zhì)控采用在具體方法共識(shí)上主要有3種，①是在進(jìn)行血型檢驗(yàn)之前對(duì)ABO血型進(jìn)行正反鑒定試劑的相互驗(yàn)證，②是在檢驗(yàn)過(guò)程中將其結(jié)果與已知的標(biāo)本進(jìn)行對(duì)照和比較，如果其與對(duì)照相符合說(shuō)明該血型鑒定結(jié)果有一定的可靠性和有效性，③則是將上述兩種方法相結(jié)合。目前市場(chǎng)上有血型鑒定質(zhì)控品出售，分兩管，規(guī)格為5 mL，紅細(xì)胞濃度在2%～3%，一管為ARh（D）+，一管為B Rh（D）-，比較適用于全自動(dòng)血型鑒定儀，可同步監(jiān)測(cè)血型鑒定的整個(gè)過(guò)程，有效提供室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果。

3.2.2室間質(zhì)評(píng) 室間質(zhì)控是通過(guò)參加衛(wèi)生部臨檢中心和省臨檢中心的盲樣考核來(lái)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，在考核結(jié)果公布之后對(duì)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真對(duì)待，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，并加以改正和完善。

4血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性

血型鑒定工作是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中一個(gè)重要的研究和應(yīng)用環(huán)節(jié)。從已有的研究中能夠發(fā)現(xiàn)，很多血型鑒定工作的問(wèn)題都處在標(biāo)本采集、標(biāo)本加樣以及對(duì)結(jié)果的填寫(xiě)和判讀上，偶爾也會(huì)出現(xiàn)錄入錯(cuò)誤和核對(duì)錯(cuò)誤等非技術(shù)性失誤產(chǎn)生的問(wèn)題。血型鑒定工作和質(zhì)量控制模式有著多樣化的特點(diǎn)。眾所周知，《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站技術(shù)操作規(guī)程》三個(gè)文件是血站系統(tǒng)中重要的指導(dǎo)和規(guī)范性文件，應(yīng)當(dāng)在這三個(gè)規(guī)范的指導(dǎo)下，對(duì)血型鑒定的程序進(jìn)行規(guī)范，對(duì)每一個(gè)具體的環(huán)節(jié)進(jìn)行明確，從標(biāo)本的采集一直到結(jié)果的公布，不論是程序、方法、模式還是質(zhì)控都應(yīng)當(dāng)規(guī)范化進(jìn)行，這樣才能夠從根本上保證血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

5結(jié)論

作為血站系統(tǒng)日常工作中最重要的部分，血型鑒定工作與每一個(gè)患者的生命安全息息相關(guān)。規(guī)范化血型鑒定工作是血站系統(tǒng)工作效果提升的必要途徑，因此，我們應(yīng)當(dāng)切實(shí)加強(qiáng)血站血型鑒定工作的質(zhì)量管理，強(qiáng)化規(guī)范化意識(shí)，及時(shí)認(rèn)識(shí)到出現(xiàn)差錯(cuò)的影響嚴(yán)重性，對(duì)工作進(jìn)行定期檢查，合理管理薄弱環(huán)節(jié)，持續(xù)監(jiān)管和改進(jìn)有關(guān)工作，對(duì)操作規(guī)程進(jìn)行必要的規(guī)范，通過(guò)合理而有效的考核和審查制度嚴(yán)格監(jiān)管血型檢驗(yàn)和鑒定工作，進(jìn)而確保臨床血液應(yīng)用工作的安全[1-10]。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙樹(shù)銘，張循善.關(guān)于紅細(xì)胞ABO血型鑒定規(guī)范化的思考及建議[J].中國(guó)輸血雜志，2009，（06）.

[2]楊?lèi)?ài)蓮.影響血型鑒定結(jié)果的原因分析及預(yù)防措施[J].醫(yī)藥論壇雜志，2009，（24）.

[3]徐瑾.血型錯(cuò)誤1例原因分析與預(yù)防[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2011，（13）.

[4]范海麗，史恩祥，王苗武，等.ABO血型正反定型不符75例原因分析[J].華北國(guó)防醫(yī)藥，2009，（02）.

[5]張勇萍，楊世明，田榆，等.ABO血型鑒定不相符的影響因素及其預(yù)防方法[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2010，（02）.

[6]周湘靜，蔡雪嬌，謝作聽(tīng).自制標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞多凝集引起正反定型不符19例觀察[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2008，（01）.

[7]劉立坤.血型檢測(cè)中ABO血型正反定型不符影響因素分析[J].河北醫(yī)藥，2009，（23）.

[8]王淼，楊曉偉，邢楠.導(dǎo)致交叉配血困難的原因及對(duì)策[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2009，（08）.

[9]李秀文，辛琪.抗-M致ABO血型正反定型不符一例[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2009，（06）.

[10]邢占山.ABO血型正反定型不符原因簡(jiǎn)析[J].中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)，2011，（05）.

編輯/肖慧