檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8細(xì)胞對(duì)慢性乙肝患者的臨床意義

乙型肝炎病毒（HBV）是一種非細(xì)胞毒性病毒，當(dāng)其進(jìn)入機(jī)體后?？梢鹨幌盗袕?fù)雜的免疫反應(yīng)。而機(jī)體產(chǎn)生的免疫應(yīng)答的強(qiáng)弱又與HBV感染所致的不同臨床結(jié)果密切相關(guān)。而在這一系列免疫應(yīng)答中，細(xì)胞免疫應(yīng)答又是決定HBV感染機(jī)體后轉(zhuǎn)歸的最重要因素。而不同的T細(xì)胞亞群對(duì)病毒抗原的反應(yīng)狀態(tài)也不同，即對(duì)臨床過(guò)程的輕重及轉(zhuǎn)歸的影響不同。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)健康人、慢性乙型肝炎患者和乙肝肝硬化患者外周血中的測(cè)定CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8細(xì)胞的含量進(jìn)行了檢測(cè)計(jì)算，來(lái)探討慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8細(xì)胞特點(diǎn)及其與肝病病情的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1研究病例 2013年7月～12月在我院門診和住院的慢性乙型肝炎患者（經(jīng)肝功檢測(cè)、肝炎病毒血清標(biāo)記物ELISA檢測(cè)、HBV-DNA定量檢測(cè)確診為乙型肝炎并排除其它類型肝炎的患者）101例作為研究病例，其中慢性乙型肝炎患者60例，乙型肝炎肝硬化患者41例，年齡為30～72歲，平均年齡（50.3±5）歲，男性：56例，女性：45例。診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合全國(guó)病毒性肝炎會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)選取40例年齡相匹配的健康體檢者（無(wú)肝炎病史癥狀及體征、肝功能正常、肝炎病毒血清標(biāo)志物陰性），男性：22例，女性：18例，作為對(duì)照組。

1.1.2儀器 流式細(xì)胞儀：美國(guó)BD公司FACSCanto2型；

1.1.3試劑 進(jìn)口的配套試劑

1.2方法 標(biāo)本采集，以無(wú)菌方式采集各實(shí)驗(yàn)對(duì)象晨起空腹用EDTAK2抗凝，用于當(dāng)天流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 資料采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。

2結(jié)果

與正常對(duì)照組比較，肝硬化組外周血CD4+、CD4+/CD8+、細(xì)胞均少于對(duì)照組（P均<0.05）；慢性乙肝組CD4+、CD4+/CD8+、細(xì)胞明顯高于乙肝肝硬化組（P<0.05）；慢性乙肝組CD4+、CD4+/CD8+、細(xì)胞明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。各組間CD3+、CD8+變化無(wú)顯著差異（P>0.05），見(jiàn)表1。

3討論

病毒性肝炎（Viral hepatitis）為一種全球性傳染病，特別是在非洲及發(fā)展中國(guó)家廣為流傳[1]。其中，乙型病毒性肝炎的流行嚴(yán)重地影響著我國(guó)國(guó)民的健康水平，并制約著社會(huì)和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

乙肝病毒（HBV）是一種非細(xì)胞毒性病毒，當(dāng)其進(jìn)入機(jī)體后?？梢鹨幌盗袕?fù)雜的免疫反應(yīng)[2]。而機(jī)體針對(duì)HBV編碼的各種抗原成分產(chǎn)生的免疫應(yīng)答的強(qiáng)弱又與HBV感染所致的不同臨床結(jié)果密切相關(guān)[3]。在這一系列免疫應(yīng)答中，細(xì)胞免疫應(yīng)答又是決定HBV感染機(jī)體后轉(zhuǎn)歸的最重要因素。而不同的T細(xì)胞亞群對(duì)病毒抗原的反應(yīng)狀態(tài)也不同，即對(duì)臨床過(guò)程的輕重及轉(zhuǎn)歸的影響不同。

總之，CD4+細(xì)胞表型、功能等各個(gè)方面的變化可能在很多疾病中均可作為疾病活動(dòng)、復(fù)發(fā)和療效的判定指標(biāo)之一，具有很重要的臨床意義。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)慢性乙型肝炎細(xì)胞免疫研究較多的是患者外周血CD4+和CD8+T細(xì)胞，本實(shí)驗(yàn)在檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞的基礎(chǔ)上，應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)健康人、不同程度（慢性乙肝、乙肝肝硬化）的慢性乙型肝炎患者外周血中的細(xì)胞的含量進(jìn)行了直接檢測(cè)。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，慢性肝炎患者、 乙肝肝硬化患者與正常人相比，其外周血中CD3+、CD8+T細(xì)胞均無(wú)明顯改變；CD4+、CD4+/CD8+、T細(xì)胞均明顯降低（P<0.05），而且，乙肝肝硬化患者與慢性乙型肝炎患者相比，CD4+、CD4/CD8+、T細(xì)胞明顯降低（P<0.05），這一結(jié)果提示了CD4+ 、CD4+/CD8+、T細(xì)胞在乙型肝炎慢性化過(guò)程中起重要作用，且與慢性乙型肝炎患者病情的進(jìn)展呈負(fù)相關(guān)[4]。這可能是因?yàn)樵诼砸倚透窝谆颊唧w內(nèi)，HBV感染波及的肝細(xì)胞數(shù)量很多，又由于大量HBV的長(zhǎng)期存在，致使CD4+、CD4+ /CD8+T細(xì)胞明顯減少。細(xì)胞免疫殺傷了HBV的大量肝細(xì)胞的同時(shí)，造成了肝細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷，又由于缺乏CD4+CD45RO+T細(xì)胞的輔助，B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不足以中和釋放到細(xì)胞外的大量HBV，造成了不同程度的慢性乙型肝炎，形成了一種惡性循環(huán)。由此可認(rèn)為，測(cè)定CD4+、CD4+/CD8+T細(xì)胞的含量在某種程度上可為判定慢性乙型肝炎患者的病情進(jìn)展情況提供一種有效手段。

即測(cè)定CD4+、CD4+/CD8+、T細(xì)胞的含量更能反映出慢性乙型肝炎患者的病情進(jìn)展情況。這也使我們認(rèn)識(shí)到檢測(cè)CD4+、CD4+/CD8+、T細(xì)胞亞群更能使我們正確、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制和預(yù)后，從而有效地指導(dǎo)臨床治療。

參考文獻(xiàn)：

[1]余傳霖，葉天星，陸德源，等.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)免疫[M].上海：上海醫(yī)科大學(xué)出版社，1998：1152-1159.

[2]Guidotti L G，Ishikawa T，Hobbs M V，et al.Intracellular inactivation of the hepatitis B virus by cytotoxic T lymphocytes [J].Immunity，1996，4（1）：25-36.

[3]Guidotti L G，Rochfood R，Chung J，et al.Viral clearance without destruction of infected cells during acute HBV infection [J].Science，1999，284（2）：825-829.

[4]武建國(guó)，李曉軍.免疫學(xué)詞典 [M].南京：南京師范大學(xué)出版社，2001：20.

編輯/肖慧