摘要[目的]了解黃曲霉毒素對南陽地區(qū)玉米的污染情況,初步評價玉米的安全性。 [方法]從南陽市不同區(qū)域采集新收獲的玉米樣品40個,應(yīng)用HPLC 檢測技術(shù)對玉米進行黃曲霉毒素B1檢測并根據(jù)國家標準進行安全性評估。 [結(jié)果]黃曲霉毒素B1檢出率為 80%,根據(jù)食品和飼料中的黃曲霉毒素的限量標準,符合食用標準的玉米占37.5%,不符合食用和飼用的占45.0%。[結(jié)論]玉米黃曲霉毒素污染廣泛, 應(yīng)該進一步加強對黃曲霉毒素超標的玉米流向進行安全性監(jiān)控工作。
關(guān)鍵詞 黃曲霉毒素;檢測;安全評估
中圖分類號S609.9文獻標識碼A文章編號0517-6611(2014)29-10306-01
作者簡介吳瑞閣(1972- ),女,河南南陽人,工程師,碩士,從事糧油質(zhì)量檢驗研究。
黃曲霉毒素是一類由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的真菌次生代謝產(chǎn)物, 毒性巨大, 廣泛污染農(nóng)作物、 食品及飼料等,玉米是最受關(guān)注的作物之一。毒素通過被污染的谷物、飼料和由這些飼料喂養(yǎng)的動物所提供的動物性食品(肉、奶、蛋 )進入食物鏈,對人畜表現(xiàn)出致癌性、遺傳毒性、 致畸性,還會引起腎中毒、肝中毒、生殖異常以及免疫抑制反應(yīng)等。1993年,世界衛(wèi)生組織(WHO)將黃曲霉毒素劃定為I類致癌物[1]。食品法典委員會(CAC)提出了某些食品中黃曲霉毒素的限量標準[2],許多國家或地區(qū)都制定了限量標準,我國也制定了食品和飼料中黃曲霉毒素的限量標準[3-4]。
黃曲霉毒素常用的檢測方法包括化學(xué)分析法、免疫學(xué)檢測法和生物學(xué)檢測法。筆者采用免疫親和柱高效液相色譜法檢測技術(shù),實現(xiàn)對黃曲霉毒素的準確檢測[5]。通過對新收獲玉米進行抽樣檢測,并依據(jù)國家食品和飼料中黃曲霉毒素限量標準對檢測結(jié)果作進一步安全性分析,初步評估收獲玉米的安全狀況。
1材料與方法
1.1材料供試樣品:在收獲季節(jié)從南陽市縣市區(qū)采集玉米樣品40個作為檢測和評估材料。主要儀器:安捷倫高效液相色譜儀 (配C18反相色譜柱 250 mm×4.6 mm),高速均質(zhì)器, 槽紋濾紙 (無熒光 )和玻璃微纖維濾紙 (孔徑 1.5 μm,無熒光),黃曲霉毒素B1免疫親和柱均為Vicam產(chǎn)品。主要試劑:AflaTest顯色劑(0.002%碘溶液),甲醇(HPLC級),Tween20溶液,OchraTest淋洗液,PBS緩沖液。
1.2黃曲霉毒素B1測定
1.2.1提取與凈化。稱取50 g玉米研磨的樣品,加10 g NaCl置于攪拌杯中,再加入100 ml甲醇-水( 80∶20,V/V),高速攪拌1 min。將提取物用槽紋濾紙過濾,移取10 ml濾液用40 ml純水稀釋混勻。將稀釋液通過玻璃微纖維濾紙再過濾,收集濾液。
取10 ml濾液以每秒1~2滴的流速全部通過 AflaTest親和柱, 直至空氣進入到親和柱中。將10 ml純水以每秒1~ 2滴的流速全部通過親和柱直至空氣進入柱中,棄去淋洗液(重復(fù)該步驟1次 )。用1.0 ml甲醇以每秒1~ 2滴的流速洗脫親和柱,收集全部洗脫液于玻璃測試管中。
1.2.2HPLC參數(shù)設(shè)置與檢測。色譜柱:C18反相色譜柱 (4.6 mm×250 mm×3 μm);流動相:乙腈-水( 10∶90 ,V/V)或者甲醇-水(20∶80,V/V);流速0.8 ml/min;進樣量:50 μl;檢測波長:360 nm激發(fā)波長和420 nm發(fā)射波長的熒光檢測。該檢測方法的檢測限為0.04 mg/kg。
2結(jié)果與分析
2.1黃曲霉毒素檢出情況由表1可見,40個樣品中有32個樣品中檢出黃曲霉毒素B1,檢出率為80%。黃曲霉毒素B1含量范圍0~284.32 μg/kg。抽樣檢驗結(jié)果顯示,新收獲玉米的黃曲霉毒素B1檢出率較高,毒素污染非常普遍。
2.2初步安全性評價按照《糧食衛(wèi)生標準》(GB2715-2005)及食品安全標準食品中真菌毒素限量(GB2761-2011),玉米中黃曲霉毒素B1含量應(yīng)≤20 μg/kg。由表2可見,此次抽樣檢驗樣品符合食用標準可以用作食品原料的玉米占37.5%,超標率在62.5%。根據(jù)《飼料衛(wèi)生標準》(GB13078-2001),黃曲霉毒素B1含量≤50 μg/kg玉米可以作為飼用原料,此次抽樣檢驗符合飼用標準的玉米占55.0%,超過45.0%的玉米不能用作食用和飼用原料。由此可見,玉米黃曲霉毒素安全問題總體形勢比較嚴峻,應(yīng)該制定切實可行的減毒去毒方案并嚴格把控黃曲霉毒素超標玉米流通,避免其進入口糧和飼料市場。