中草藥復(fù)方注射劑治療仔豬腹瀉的試驗研究

賀泂杰　郭慧琳

摘要[目的] 探討中草藥復(fù)方注射劑對仔豬腹瀉的治療效果。[方法] 提取中草藥有效成分，制備中草藥復(fù)方注射劑。用不同劑量（0.25、0.50和1.00 ml/kg）的中草藥復(fù)方注射劑對人工感染的仔豬腹瀉進(jìn)行治療試驗。[結(jié)果] 經(jīng)過3 d治療后，3個劑量組均有明顯的治療效果，治愈率可達(dá)60%～95%，極顯著高于感染對照組，劑量以0.5 ml/kg為佳。將制備的復(fù)方注射劑和臨床用的硫酸慶大霉素、諾氟沙星、頭孢噻呋混懸、硫酸黃連素和博落回注射劑對人工感染的仔豬腹瀉進(jìn)行療效對比試驗，結(jié)果表明復(fù)方注射劑的治療效果最好，治愈率達(dá)98.0%，明顯優(yōu)于其他注射劑。[結(jié)論] 該中草藥復(fù)方注射劑是臨床上治療仔豬腹瀉的有效藥物。

關(guān)鍵詞中草藥復(fù)方注射劑；治療；仔豬腹瀉

中圖分類號S853.7文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）22-07435-02

中草藥抗病毒的基本原理是扶正祛邪，恢復(fù)機體正常的生理狀態(tài)。我國中獸藥的研究與開發(fā)雖已取得一定的進(jìn)展，且在一定范圍內(nèi)對畜禽疾病的控制取得了較好的效果，積累了豐富的臨床經(jīng)驗，并具有一定的理論基礎(chǔ)[1]。中草藥不但可以單方使用，而且可以組成復(fù)方[2]。從目前豬病的復(fù)雜性來看，中草藥在豬病防治方面，尤其是在混合感染的治療和預(yù)防方面的優(yōu)點越發(fā)突顯出來[3]。筆者用0.25、0.50和1.00 ml/kg的復(fù)方注射劑對人工感染的仔豬腹瀉進(jìn)行治療試驗，并用制備的復(fù)方注射劑和臨床用的硫酸慶大霉素、諾氟沙星、頭孢噻呋混懸、硫酸黃連素和博落回注射劑對人工感染的仔豬腹瀉進(jìn)行療效對比試驗。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1大腸桿菌。大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)血清K99均購于中國獸藥監(jiān)察所。

1.1.2 試驗動物。試驗仔豬由平?jīng)鍪胸i場提供。

1.1.3 試驗藥物。黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、四季青、鐵莧菜、苦參、穿心蓮等藥材均購自蘭州市醫(yī)藥超市。將購買的中草藥用蒸餾水洗凈風(fēng)干，然后用電動粉碎機將其粉碎后備用。

1.1.4培養(yǎng)基。普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，一般選用LB瓊脂培養(yǎng)基。

1.1.5試驗儀器。粉碎機、單人雙面凈化工作臺、高壓鍋、真空泵、電熱恒溫水浴鍋、電熱恒溫干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1.2方法

1.2.1中草藥有效成分的提取。采取不同的提取方法對中藥有效成分進(jìn)行提取。

1.2.2中草藥復(fù)方注射劑的制備。依據(jù)中藥提取物組方對仔豬致病性大腸桿菌的體外抑菌試驗結(jié)果確定最終配方，并采用相應(yīng)的方法經(jīng)脫色、過濾、除菌制成復(fù)方注射劑。

1.2.3復(fù)方注射劑的質(zhì)量檢驗。根據(jù)獸用《中藥、天然藥物穩(wěn)定性試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》、《中藥、天然藥物局部刺激性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》、《中藥、天然藥物急性毒性研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》和《中國獸藥典》（2005版）的要求并對其進(jìn)行質(zhì)量檢驗。

1.2.4復(fù)方注射劑對仔豬腹瀉的療效試驗。選擇5～20日齡無病史、未免疫的仔豬100頭，隨機分為4組。將大腸埃希菌K99肉湯培養(yǎng)菌液按每頭豬100億活菌口腔灌服，進(jìn)行人工接種。接種后24 h用無菌棉簽在直腸內(nèi)采集糞便，用大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)血清K99進(jìn)行凝集試驗，以確認(rèn)有無大腸埃希菌感染。當(dāng)仔豬發(fā)生腹瀉后進(jìn)行治療。第1、2、3組分別肌肉注射復(fù)方注射劑0.25、0.5和1 ml/kg，2次/d，對照組肌肉注射滅菌生理鹽水，2 ml/只，2次/d，連用3 d。所有試驗仔豬均在同等條件下飼養(yǎng)，試驗期間每天觀察各組豬精神、糞便、食欲及仔豬死亡情況。

1.2.5復(fù)方注射劑和其他藥物的對比試驗。選擇5～20日齡無病史、未免疫的仔豬175頭，隨機分為7組，將大腸埃希菌K99肉湯培養(yǎng)菌液按每頭豬109活菌口腔灌服，進(jìn)行人工感染。當(dāng)仔豬發(fā)生腹瀉后，及時進(jìn)行治療。第1組肌肉注射硫酸慶大霉素；第2組肌肉注射諾氟沙星；第3組肌肉注射頭孢噻呋混懸；第4組肌肉注射硫酸黃連素；第5組肌肉注射博落回；第6組肌肉注射中草藥復(fù)方注射劑；第7組為對照組，肌肉注射滅菌生理鹽水，2 ml/只，2次/d。連用3 d，所有試驗仔豬均在同等條件下飼養(yǎng)，試驗期間每天觀察各組豬精神、糞便、食欲狀況及仔豬死亡情況。

1.2.6復(fù)方注射劑的臨床療效試驗。2010～2013年平?jīng)龅鹊貐^(qū)養(yǎng)豬場和農(nóng)戶散養(yǎng)豬3 100窩基礎(chǔ)母豬在產(chǎn)子后，其中有30 121只30日齡內(nèi)的仔豬出現(xiàn)以排黃、白色液狀糞便為特征的仔豬腹瀉。經(jīng)臨床診斷確診為仔豬黃白痢，使用復(fù)方注射劑對發(fā)病仔豬進(jìn)行治療，治療劑量為0.5 ml/kg，2次/d，連用3 d。

2結(jié)果與分析

2.1各藥物有效成分的提取 針對各藥不同的化學(xué)有效成分，分別設(shè)計了對黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、四季青、鐵莧菜、苦參和穿心蓮中活性成分的提取工藝，提取獲得硫酸黃連素純品、黃芩苷純品、30∶1白頭翁提取物30∶1秦皮提取物、50∶1四季青、30∶1鐵莧菜提取物、20∶1苦參提取物和20∶1穿心蓮提取物。

2.2中草藥注射劑的制備依據(jù)中藥提取物組方對仔豬致病性大腸桿菌的體外抑菌試驗結(jié)果，確定以0.01 g黃連素、0.05 g黃芩苷、0.25 g白頭翁、0.25 g秦皮、0.25 g四季青、0.25 g鐵莧菜、0.25 g苦參和0.25 g穿心蓮等為基礎(chǔ)，采用相應(yīng)的方法經(jīng)脫色、過濾、除菌，添加穩(wěn)定劑，配成pH為7.5～8.0的復(fù)方注射劑，作為治療仔豬腹瀉的新制劑。

2.3注射劑的質(zhì)量檢驗經(jīng)質(zhì)量檢驗發(fā)現(xiàn)，制備的復(fù)方注射劑各項指標(biāo)均符合要求。

2.4復(fù)方注射劑對仔豬腹瀉的療效試驗人工感染24 h后采集糞便，通過凝集試驗證實均存在大腸埃希菌K99。此時發(fā)現(xiàn)仔豬精神委頓、食欲不佳，有些仔豬開始腹瀉，48 h后接種的豬全部出現(xiàn)腹瀉。由表1可知，0.25、0.5和1.0 ml/kg的復(fù)方注射劑均對仔豬腹瀉具有明顯療效，治愈率分別為60%、96%和96%，而對照組死亡率高達(dá)76%。另外，0.5和1.0 ml/kg復(fù)方注射劑的治療效果基本一致，因此選用0.5 ml/kg作為仔豬腹瀉的治療用量。