姜制黃連炮制研究進(jìn)展*

★ 鄧玉芬 鐘凌云

(江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 江西 南昌 330004)

黃連是毛茛科植物黃連(CoptischinensisFranch.)、云連(CoptisteetaWall.)、三角葉黃連(CoptisdeltoideaC.Y.Cheng et Hsiao.)的干燥根莖，習(xí)稱為“味連”、 “云連”、“雅連”、。主要分布地區(qū)為我國四川、湖北、云南等地。其性寒，味苦。主要?dú)w心、脾、肝、胃、膽、大腸經(jīng)等。具有清熱燥濕，瀉火解毒等功效[1]，臨床上常用于濕熱痞滿，嘔吐吞酸、濕熱泄痢，高熱神昏、心煩不寐、臃腫癤瘡，目赤牙痛，消渴，外治濕疹、濕瘡，耳道流膿等癥狀。黃連藥材所含的生物堿主要有小檗堿(berberine)、巴馬汀(pamatine)、黃連堿(coptisine)、藥根堿(jatrorrhizine)等小檗堿型生物堿[2]。

黃連除生用外，主要的炮制品有酒制黃連、姜汁制黃連、吳茱萸制黃連、膽汁制黃連等。不同的炮制品其功用各有區(qū)別。近年來，隨著研究的深入和細(xì)化，在輔料選擇和炮制條件上有了進(jìn)一步的研究。輔料生姜性溫，具有解表散寒，溫中止嘔，溫肺止咳之效，與黃連的寒性剛好相反，吻合中醫(yī)理論中的反制理論，研究姜制黃連炮制進(jìn)展為研究中醫(yī)理論中的反制理論提供更有力的科學(xué)依據(jù)。本文就沿襲至今的黃連主流炮制法之一——姜制黃連進(jìn)行研究探討。

研究表明，輔料不同，黃連的化學(xué)成分、藥理藥效都會發(fā)生相應(yīng)的變化。同時，同種輔料，影響因素和檢測指標(biāo)的變化對黃連優(yōu)選工藝的選取也會產(chǎn)生影響。此外，不同的炮制品其飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也會有差異。本文主要對姜制黃連研究進(jìn)展探討，從姜制黃連炮制工藝、炮制前后化學(xué)成分和藥理藥效、及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等方面進(jìn)行研究探討。為黃連炮制和臨床用藥提供一定的理論依據(jù)，為擴(kuò)大黃連的用藥范圍打下基礎(chǔ)。

1 炮制工藝研究進(jìn)展

黃連沿襲至今的炮制方法比較多，現(xiàn)就姜制黃連傳統(tǒng)炮制工藝跟現(xiàn)代變化進(jìn)行比較探討。黃連經(jīng)炮制后,其成分會發(fā)生不同程度的變化,可導(dǎo)致藥性及功能主治的改變[3]?！吨兴幣谥茖W(xué)》中闡述“生姜味辛，性溫。升騰發(fā)散而走表，能發(fā)表散寒，溫中、開竅、解毒。藥物經(jīng)姜炮制后能抑制寒性，增強(qiáng)療效，降低毒性。”姜制黃連沿襲中醫(yī)理論指導(dǎo)下的反制理論，取生姜之性溫來緩解黃連之性寒，同時增強(qiáng)黃連清胃和胃止嘔的功效。

傳統(tǒng)姜制黃連的炮制方法有：取生姜汁與黃連片拌勻，待汁被吸盡后，用文火微炒干，取出放涼。每100公斤黃連用鮮生姜12.5公斤， 絞汁[4]?；蛘呓S連(取凈黃連,照姜汁炙法炒干。每黃連100 kg,用生姜18. 5 kg)[5]劉榮裸等提到姜制黃連炮制法為:取生姜洗凈搗碎,然后加水煎熬2次,取姜汁與黃連拌勻,潤2小時,置鍋內(nèi)用文火微炒片刻起鍋晾干。每公斤黃連用生姜0.5kg,加水0.5kg,熬取姜汁0.3kg[6]。劉振啟等選取方法為：姜黃連取黃連片．加入姜汁拌勻(取鮮姜10kg。洗凈，搗爛或切片加水適量，壓榨取汁。姜渣再加水適量，浸泡后再榨干取汁，合并姜汁約12L?；蛴酶山?kg，搗碎后加水煎煮二次，合并煎液，濾過。取濾液12L)，燜潤1～2小時，至姜汁被吸盡，置熱鍋內(nèi)，用文火(80～120℃)炒干后取出、晾涼。每100kg黃連片用干姜3kg[7]。

現(xiàn)代炮制研究表明，黃連主要成分為原小檗堿型生物堿,包括小檗堿、巴馬丁、黃連堿、甲基黃連堿、及藥根堿、木藍(lán)堿等。有研究以黃連中所含生物堿作為指標(biāo)來優(yōu)選姜黃連的炮制工藝，采用高效液相法進(jìn)行測定小檗堿的含量定小檗堿含量作為炮制工藝的考察指標(biāo)。根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，即取黃連飲片加20%姜汁悶潤，待姜汁被吸盡后，置烘箱中，100℃烘制90min。取出，放涼。[8]另有文獻(xiàn)資料記載，運(yùn)用正交試驗(yàn)設(shè)計，選擇生姜用量、炮制時間和炮制溫度3個因素為考察因素，采用L(34)安排試驗(yàn)，以姜黃連指紋圖譜峰面積、抑菌作用為指標(biāo)，進(jìn)行綜合評價。得出姜黃連飲片最佳工藝為：取黃連飲片加20%姜汁悶潤，待姜汁被吸盡后，置烘箱中烘制，溫度100C，時間90 min，取出，放涼。且得出結(jié)論是：優(yōu)化的炮制工藝結(jié)果可靠，比藥典法更容易操作，評價指標(biāo)可控[9]。

綜合研究表明，傳統(tǒng)的姜制黃連炮制方法沒有明確的檢測指標(biāo)，炒制的溫度和時間沒有明確的要求，經(jīng)驗(yàn)和個人主觀判斷因素占的比例較大，缺乏科學(xué)性和有效的理論依據(jù)。而現(xiàn)代階段研究一般采用正交設(shè)計法，結(jié)合高效液相和指紋圖譜對姜制黃連的炮制工藝進(jìn)行研究考察，大多認(rèn)為姜制黃連主要影響因素為輔料的用量、炮制時間、炮制溫度。并且認(rèn)為，炮制輔料生姜的用量是影響姜制黃連的主要因素，炮制溫度其次，炮制時間影響最小。同時，文獻(xiàn)中還指出，用烘法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的炒法為姜制黃連的優(yōu)選工藝之一。另外，在選取姜制黃連工藝時，選取不同的檢測指標(biāo)，工藝也會發(fā)生相應(yīng)變化。

2 姜制黃連對主要有效化學(xué)成分的影響

2.1 黃連主要化學(xué)成分 黃連主要含原小檗堿型生物堿,已經(jīng)分離出來的生物堿有小檗堿、巴馬丁、黃連堿、甲基黃連堿、藥根堿、木藍(lán)堿等。其中以小檗堿的含量為最高,達(dá)10%。這些生物堿除木蘭堿為阿樸菲外其他均為原小檗堿型生物堿,且都是季銨型生物堿。酸性成分有阿魏酸,氯原酸等[10]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明,黃連的主要作用與其根莖所含的生物堿關(guān)系比較大,其主要包括小檗堿(berberine)、黃連堿(coptisine),甲基黃連堿(worenine)、巴馬亭(palmatine)、藥根堿( jatrorrhizine)、表小檗堿(epiberberine)、木蘭花堿(mognoflorine),和在中藥炮制的過程中從小檗堿轉(zhuǎn)化過來的9-去甲小檗堿(berberrubine)等。王薇等[11]又首次從該植物中分離得到7個異喹啉類生物堿,分別鑒定:8-oxyberberine(1) , 8-oxocoptisine(2), 8-oxo-epiberberine(3),6-([1,3]dioxolo[4,5-g]isoquinoline-5-carbonyl)-2,3-dime-thoxy-benzoicacid1methylester(4),corydaldine(5),noroxyhydrastineine(6),6,7-methylenedioxy-1(2H)2isoquinolinone(7), 7種成分活性需做進(jìn)一步探討[12]。同時，其他文獻(xiàn)也報道，黃連有效部為主要為生物堿，包括小檗堿、黃連堿、甲基黃連堿、巴馬亭、藥根堿、表小檗堿、木蘭花堿等，但以小檗堿為主[13]。

2.2 姜制黃連炮制前后化學(xué)成分的變化 由于黃連中含有的成分比較多，文獻(xiàn)資料記載：當(dāng)選鹽酸巴馬汀含量為檢測指標(biāo)時，生黃連的含量高于姜黃連。當(dāng)選取鹽酸藥根堿、鹽酸表小檗堿、鹽酸小檗堿的含量為檢測指標(biāo)時，姜黃連均高于生黃連。并且，黃連不同炮制品的5種生物堿的總含量均在范圍11.33%～11.64%內(nèi)，結(jié)果提示黃連經(jīng)過一定的炮制火候，經(jīng)不同的方法炮制后，其各種生物堿會發(fā)生或增或減變化，但各生物堿的總含量變化不大[14]。

綜合目前現(xiàn)有文獻(xiàn)資料，黃連經(jīng)姜制后，其主要生物堿的含量跟生品相比較都有所增加，鹽酸小檗堿尤為顯著。除鹽酸巴馬汀有所減少外，藥根堿、巴馬汀、小檗堿相比生黃連都有所增加，總的生物堿含量改變不大。黃連中有效成分含量的變化跟炮制方法有關(guān)，總體來說，黃連生物堿的總含量改變不大。因?yàn)樾￠迚A為黃連所含生物堿的主要成分，占80%左右，相對來說，經(jīng)過姜制后，黃連的有效成分是有所增加的。就目前文獻(xiàn)記載，黃連經(jīng)姜制后，其化學(xué)成分是否發(fā)生質(zhì)的變化還尚未見報道。

3 姜制黃連藥理、藥性作用研究

黃連在臨床上應(yīng)用比較廣泛，近年來對黃連的研究也比較多。黃連除傳統(tǒng)的清熱燥濕，瀉火解毒外，其在抗病毒、心血管疾病、治療心機(jī)炎、消化系統(tǒng)、免疫調(diào)節(jié)、抗癌等方面都有一定的療效。生黃連藥性苦寒，清熱燥濕能力強(qiáng)，為大寒大苦之藥。經(jīng)姜制后，其苦寒之性得到緩和，藥效也隨之改變。

3.1 姜制黃連對胃腸方面的影響 在黃連及其活性成分作用當(dāng)中,小檗堿應(yīng)用最廣,是黃連的活性成分當(dāng)中最有價值的單體,其在抗糖尿病、抗腫瘤、抗菌抗炎等方面都可以發(fā)揮很好藥效,可見小檗堿是不可或缺的治病良藥[12]。同時，文獻(xiàn)研究表明，黃連表現(xiàn)有一定的抑制胃潰瘍形成及促進(jìn)胃潰瘍愈合作用，而生姜辛溫，能發(fā)表、散寒、溫中、止嘔、開痰、解毒等，對胃腸道具有一定作用[15]，現(xiàn)代研究也認(rèn)為，姜具有一定的抗菌和止吐作用[16,17]，這與黃連本身的藥效作用相一致，因此以姜制黃連，應(yīng)可起到一定的協(xié)同增效作用。綜合文獻(xiàn)報道，采用無水乙醇制造小鼠胃潰瘍的模型，其結(jié)果顯示黃連姜制后有抗胃潰瘍的作用。當(dāng)選擇測定 MDA 、 SOD 值為初步探討其抗?jié)冏饔玫臋C(jī)理。對于生黃連和陽性對照品西咪替丁，都顯示出較好的抗?jié)兊淖饔?且模型組小鼠的血清及胃黏膜的組織中 MDA 含量明顯升高了，而 SOD 的活力卻下降了，這表明脂質(zhì)得過氧化反應(yīng)參與了乙醇所致小鼠胃黏膜損傷的病理和生理過程，黃連及姜制黃連的給藥組小鼠血清和胃黏膜中 MDA量較模型組有明顯降低，SOD 的活力值顯著增加，姜制黃連組中 MDA 含量顯著低于生黃連組，但 SOD活力值顯著增加，結(jié)果提示黃連及姜制黃連的抗乙醇性胃損傷作用和其抑制血漿及胃黏膜中的MDA 量升高及恢復(fù) SOD 的活力有關(guān)，且姜制黃連作用更強(qiáng)[18]。同時，有文獻(xiàn)報道，姜制黃連有對乙醇所致小鼠胃粘膜損傷有保護(hù)作用，與生黃連相比有增強(qiáng)的作用，其作用可能與抑制血漿和胃黏膜中MDA的含量升高及恢復(fù)SOD的活力有關(guān)[19]。

3.2 姜制黃連抗菌、抗炎作用 生物堿是黃連的主要抗菌成分，姜制黃連和吳茱萸制黃連度都出現(xiàn)生黃連未有的對綠膿桿菌的抑制作用[20]，這與姜制黃連和吳茱萸制黃連中小檗堿等生物堿含量高于生黃連的結(jié)論相吻合，姜跟吳茱萸作輔料，可能會對生物堿起到一定的助溶作用。[21]黃連是大苦大寒之品，過量久服，易導(dǎo)致敗胃，臨床治療癰疽腫毒常用的生品，而治療痢疾、腹瀉等則常用姜制黃連和萸制黃連用以防止其寒性太過。研究結(jié)果表明，姜制黃連和萸制黃連的抗菌作用均有不同程度的增強(qiáng)，為姜制黃連和萸制黃連的臨床應(yīng)用提供了有利的實(shí)驗(yàn)依據(jù)[22]。

3.3 姜制黃連對黃連的藥性影響 黃連藥性苦寒，清熱燥濕，瀉火解毒，但過久服用易傷脾胃，且脾胃虛寒者不能服用，陰虛津傷者要慎用。生姜性溫，能緩解某些藥物的寒涼之性。姜汁制黃連以熱制寒稱反制,以減弱黃連原有的寒性,謂之七情和合的相畏相殺。生姜被譽(yù)為“嘔家圣藥”，對胃寒嘔吐最為適合。姜制黃連緩和了黃連的大寒之性，同時使其止嘔作用有所增強(qiáng)。周紹華[23]等利用微量熱法，測定了大腸桿菌在黃連不同炮制品的總生物堿作用下生長熱譜曲線，通過生物熱動力學(xué)的參數(shù)，得出結(jié)果為偏溫性藥姜制黃連、酒制黃連和吳萸黃連使大腸桿菌的指數(shù)生長期的生長速率常數(shù)明顯減小，生長代謝的過程中熱量釋放顯著的增加。而偏寒性藥生黃連、醋制黃連、膽汁黃連也能使生長速率常數(shù)減少，但使熱量釋放卻略有增加，兩者存在比較穩(wěn)定的差異。由此，進(jìn)一步證實(shí)了姜制能緩和生黃連的藥性。

4 姜制黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究分析

目前姜制黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚未見報道。黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可以根據(jù)化學(xué)成分，從性狀、含量的測定、顯微鑒別、水分測定等方面進(jìn)行控制。從定性和定量兩個方面綜合考慮，結(jié)合文獻(xiàn)資料可知。在黃連及黃連的制劑中,定性鑒別主要包括來源鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別、還有根據(jù)小檗堿的主要化學(xué)性質(zhì)來進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)及以小檗堿為對照的薄層色譜來鑒別等。定量分析主要有薄層掃描、高效液相色譜法、膠束色譜和高效毛細(xì)管電泳法等應(yīng)用于黃連中生物堿的測定,紫外分光光度法對黃連中的總生物堿的測定,及小檗堿的定量分析。[24]隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,黃連的質(zhì)量及控制技術(shù)也進(jìn)一步的提高，秦海林等[25]在NMR波譜儀上測定了中藥黃連的1HNMR指紋圖譜,其結(jié)果顯示黃連的1HNMR指紋圖主要是原小檗堿型生物堿的貢獻(xiàn),可以作為鑒別植物中藥的參照及其相對標(biāo)準(zhǔn)圖譜,等等。并在此基礎(chǔ)上制訂黃連及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。[26]

盡管黃連有完整的質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)，但藥典上目前還沒有姜黃連及黃連其他炮制品的飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可以參照黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行控制評判。結(jié)合中藥炮制理論和姜制黃連的最佳炮制工藝對姜制黃連飲片進(jìn)行質(zhì)量控制。為了使姜黃連更符合現(xiàn)代用藥的要求，可采用高效液相色譜法測定小檗堿含量作為炮制工藝的考察指標(biāo)，并結(jié)合指紋圖譜，根據(jù)姜所含成分的專屬性對姜制黃連炮制工藝進(jìn)行研究，進(jìn)而作為姜制黃連質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的一個主要參考因素。

5 結(jié)論與展望

現(xiàn)階段對姜黃連的炮制工藝、 化學(xué)成分、藥理作用均有大量研究，對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)目前研究并不多見?，F(xiàn)有文獻(xiàn)有提出用烘法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的炒法，此法可行性有待進(jìn)一步研究。在傳統(tǒng)炮制工藝中，輔料可選用生姜或者干姜，但對干姜與鮮姜分別炮制所得炮制品兩者之間的差別并無報道，本課題將對此方面做進(jìn)一步研究。

結(jié)合現(xiàn)代化學(xué)成分、藥理作用的研究可知，在胃腸功能方面，姜黃連較其他各炮制品的作用更為突出；在止嘔作用上，傳統(tǒng)理論上為姜制后黃連的止嘔作用增強(qiáng)，現(xiàn)代研究文獻(xiàn)報道也不多見，本課題將對此做進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。此外，大量研究主要針對黃連中的有效成分生物堿，并常選取生物堿含量作為其質(zhì)量優(yōu)劣的指標(biāo)，但對于炮制后化學(xué)成分的改變并無深入研究，此方面值得深入研究。

鑒于目前中藥飲片規(guī)范化日趨完善，黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的日趨成熟，但黃連炮制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)仍是一大空缺，故仍需進(jìn)行大量深入的研究。另外，姜黃連除對胃腸功能的影響報道較為全面外，在其它方面記載文獻(xiàn)資料較少，應(yīng)進(jìn)一步開展相關(guān)研究。

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