復(fù)方丹參兩步釋放給藥系統(tǒng)制備工藝研究

袁 瑜， 戴 媚， 周唯蘭， 謝義鵬， 李元波*， 侯世祥

（1.揚子江藥業(yè)集團 四川海蓉藥業(yè)有限公司， 四川 都江堰 611830； 2.四川大學(xué) 華西藥學(xué)院， 四川成都610041）

復(fù)方丹參兩步釋放給藥系統(tǒng)制備工藝研究

袁 瑜1， 戴 媚1， 周唯蘭1， 謝義鵬1， 李元波1*， 侯世祥2

（1.揚子江藥業(yè)集團 四川海蓉藥業(yè)有限公司， 四川 都江堰 611830； 2.四川大學(xué) 華西藥學(xué)院， 四川成都610041）

目的 根據(jù)冠心病發(fā)病時間具有時辰節(jié)律性的特點，以多劑量給藥系統(tǒng)為基礎(chǔ)，運用現(xiàn)代藥劑學(xué)制藥新技術(shù)和新方法， 將控釋給藥系統(tǒng)與脈沖給藥系統(tǒng)相結(jié)合， 把復(fù)方丹參制成兩步釋放給藥系統(tǒng) （零級釋放和脈沖釋放）， 即分別制備復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片。 方法 將氯化鈉、 甘露醇 （促滲劑） 和 HPMC（阻滯劑） 制成片芯， 用醋酸纖維素 （含致孔劑） 進行包衣制成滲透泵片；將復(fù)方丹參、 乳糖、羧甲基淀粉鈉、 丁二酸和微晶纖維素制成片芯，外包隔離層、溶脹層、控釋層構(gòu)成。結(jié)果 3批復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片的釋放曲線均具有高度相似性。結(jié)論 該兩步釋放給藥系統(tǒng)的制備工藝具有良好的穩(wěn)定性。

復(fù)方丹參；泡騰性滲透泵片；脈沖片

冠心病是嚴重危害人類健康的常見疾病。近年來，時辰藥理學(xué)研究表明，時辰節(jié)律性是冠心病發(fā)病時的一個突出特性。復(fù)方丹參作為典型中藥小復(fù)方，其處方包括丹參、三七、冰片三味藥材，在臨床上廣泛用于治療冠心病等心血管疾?。?］。 根據(jù)臨床研究結(jié)果，復(fù)方丹參具有抗心肌缺血、缺氧［2-4］；擴 張 冠 脈，增 加 冠 脈 血 流 量［5-6］；抗 心 律失常［7-8］； 改善血液 流變性 和微循 環(huán)［9］；調(diào) 節(jié)血脂及防止動脈粥樣硬化［10］和減少血小板聚集， 抑制血栓形成［11］等藥理作用， 安全性好， 受到臨床醫(yī)生和患者的高度評價。但是，復(fù)方丹參新型給藥系統(tǒng)的研究相對滯后，目前主要包括滴丸、片劑、口服液、氣霧劑等，在劑型的設(shè)計上均未考慮冠心病發(fā)病的時辰節(jié)律性。因此，以復(fù)方丹參方的藥效物質(zhì)及其作用機理為基礎(chǔ)，結(jié)合冠心病等心血管疾病的發(fā)病特性來研制新型給藥系統(tǒng)，對于復(fù)方丹參的二次開發(fā)具有重要意義。本實驗將復(fù)方丹參作為模型藥物，在多劑量給藥系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，結(jié)合控釋給藥和脈沖給藥，把復(fù)方丹參制成兩步釋藥系統(tǒng)（零級釋放和脈沖釋放）， 即先分別制備復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片 （effervescent osmotic pump tablet，EOPT） 和脈沖片 （pulsed-released tablet，PT）， 然后將兩者按一定比例混合并置于膠囊中制成控釋型脈沖膠 囊。 兩 步 釋 放 給 藥 系 統(tǒng) （ Two-step release system， TSRS）充分考慮了冠心病發(fā)病時辰節(jié)律性的特點，可收到預(yù)防和治療冠心病的最佳效果。

1 儀器與材料

1.1 實驗儀器 智能溶出試驗儀 （ZRS-8G， 天津大學(xué)無線電廠）； 高 效液相色譜 儀 （ 美國 Agilent HP1100， 日 本 島 津 LC-10A）； 氣 相 色 譜 儀（GC122， 上海分析儀器總廠）； 電子天平 （德國賽多利斯）； 單沖壓片機 （TDP， 上海天河制藥機械廠）； 小型包衣機 （BY300A， 上海市黃海藥檢儀器廠）； 小型片劑硬度測定儀 （上海黃埔分析儀器廠）。

1.2 藥品與試劑 丹參水溶性提取物 （西安鴻生生物技術(shù)公司）， 三七總皂苷 （云南白藥集團股份有限公司）， 冰片 （成都同仁堂大藥房）； 復(fù)方丹參混合藥粉 （ 丹參水溶性提取物-三七總皂苷-冰片，10 ∶5 ∶3）， 聚乙烯吡咯烷酮 （PVP K30） （上海市源聚生物科技有限公司）； 醋酸纖維素 （CA） （美國 伊 士 曼 ）； 甲 基 丙 烯 酸 酯 聚 合 物 （ Eudragit RS100、 RL PO） （ 德國 R?hm）； 乙 基 纖維素（EC） （10 cp）、 羧甲基纖維素 （HPMC E5） （上?？房蛋录夹g(shù)有限公司）；硬脂酸鎂 （邵陽市天堂 助 劑 化 工 有 限 公 司）； 乳 糖 （ Pharmatose? R90M， 荷蘭 DMV）； 甘露醇 （ Pearlitol?R200SD，法國羅蓋特）； 聚乙二醇 （PEG400） （分析純， 天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心）； 檸檬酸三乙酯（TEC） （ 美國 Aldrich 公司） ； 鄰苯二甲酸二乙酯（DEP） （分析純， 天津市津宇精細化工廠）； 其余試劑均為分析純，水均為去離子水。

2 方法與結(jié)果

2.1 丹參素 （DS）、 原兒茶醛 （PA） 體外 HPLC測定方 法［12-13］Diamonsil C18色 譜 柱 （ 4.6 mm × 150 mm， 5 μm）； 流動相為 0.2 mol/L醋酸胺水溶液-甲醇 （88 ∶12）；體積流量 1.0 mL/min； 檢測波長281 nm；柱溫35 ℃； 進樣量 10 μL。

2.2 復(fù)方丹參兩步釋放給藥系統(tǒng)中丹參素 （DS）、原兒茶醛 （PA） 釋放度測定 按 《中國藥典》2010 年版釋放度測定法 （附錄 XD第一法）， 采用溶出度測定法 （附錄 XC第二法） 的裝置對復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片進行測定。 以 200 m L去離子水 （脫氣處理） 為釋放介質(zhì)， 轉(zhuǎn)速 100 r/min， 溫度為 （37 ±0.5） ℃。 在 1、 2、 4、 6、 8、10、 12 h 對復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片取樣 5 m L，同時補加同體積同溫介質(zhì)； 在 2、 3、 4、 5、 6、 7、8、 9、 10、 12 h 對脈沖片取樣 5 m L， 并及時補加同體積同溫介質(zhì)。 樣品經(jīng)微孔濾膜 （0.8 μm） 過濾， 取續(xù)濾液 10 μL注入色譜儀， 按 “2.1” 項下色譜條件進行測定。以樣品的實際含有量為100%， 計算丹參素、 原兒茶醛的累積百分釋放率D（%） （N≥3）。

2.3 復(fù)方丹參兩步釋放給藥系統(tǒng)處方和制備工藝

2.3.1 復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片的處方 傳統(tǒng)的單層滲透泵片指的是在片芯的外面包一層半透膜，膜上打有孔的控釋制劑，釋放介質(zhì)通過半透膜逐漸滲透到片芯內(nèi)部，片芯內(nèi)所含的可溶于水的藥物形成過飽和溶液，并在氯化鈉、甘露醇等滲透活性物質(zhì)產(chǎn)生較大的滲透壓作用下從小孔中恒速釋放出來［14］。 復(fù)方丹參藥物和許多傳統(tǒng)的中藥復(fù)方藥物一樣，因方中活性成分為含有酚羥基和羧基的酚酸類和三萜皂苷類而呈弱酸性，當半透膜外的水分滲透入片芯時，活性成分與片芯內(nèi)的碳酸氫鈉發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生的二氧化碳氣體有助于藥物的充分釋放，這樣在滲透壓和泡騰作用的共同作用下，藥物能夠在12 h內(nèi)以零級速率比較完全釋放藥物， 又能減少輔料用量，提高載藥量，故將該類滲透泵片稱為泡騰型滲透泵控釋片［15］。 綜合復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片的片芯、包衣膜處方篩選及包衣工藝參數(shù)的篩選結(jié)果， 確定片芯及包衣膜處方分別見表 1、表2。

表1 復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片片芯處方Tab.1 Formu lation of EOPT tablet core

2.3.2 復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片的制備工藝 將復(fù) 方 丹 參 混 合 藥 粉 （ mixed powder of compound Danshen， MPCD） 與輔料過 100 目篩混勻， 置 50 ～60 ℃烘箱烘干， 加入硬脂酸鎂， 混勻， 用6 mm弧形沖模直接粉末壓片， 片重 120 mg。 處方量 PEG 400 與 DEP加入丙酮， 攪拌， 完全溶解后加入處方量的醋酸纖維素， 攪拌過夜， 配制為 3% （m/V）的溶液， 采用小型包衣鍋包衣。 包衣鍋轉(zhuǎn)速 40 r/min， 包衣 液 噴 出 速 率 1 mL/min， 片床 溫 度 為34 ～36 ℃。

表2 復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片包衣液處方Tab.2 Formulation of EOPT coating solu tion

2.3.3 復(fù)方丹參脈沖片的處方 復(fù)方丹參藥物成分比較復(fù)雜，僅僅依靠崩解劑來實現(xiàn)脈沖釋藥比較困難?？紤]到復(fù)方丹參藥物水溶性較好，利用滲透泵機理和有機酸誘導(dǎo)機理，能有效實現(xiàn)時滯后的快速釋藥，又具有滲透泵制劑穩(wěn)定性好的優(yōu)點。綜合復(fù)方丹參脈沖片的片芯、包衣膜處方篩選及包衣工藝參數(shù)的篩選結(jié)果，確定片芯及包衣膜處方分別見表 3、 表 4。

表3 復(fù)方丹參脈沖片片芯處方Tab.3 Formulation of PT tablet core

2.3.4 復(fù)方丹參脈沖片的制備工藝 將復(fù)方丹參混合藥粉與輔料過 100 目篩混勻， 置 50 ～60 ℃烘箱烘干，加入硬脂酸鎂，混勻，用6 mm弧形沖模直接粉末壓片得片芯， 片重 120 mg。 片芯外包三層衣膜， 內(nèi)層為隔離層， 包衣液為 6%的 EudragitRL PO 95%乙醇溶液， 包衣鍋轉(zhuǎn)速 35 r/min， 包衣液噴出速率 0.6 mL/min， 片床溫度為 28 ～30 ℃；中間層為溶脹層， 包衣液為 3%的 HPMC E5 70%乙醇溶液， 包衣鍋轉(zhuǎn)速 30 r/min， 包衣液噴出速率0.8 mL/min， 片床溫度為 36 ～38 ℃； 外層為控釋層， 包衣液為 6%的 Eudragit RS100 95%乙醇溶液，包 衣 鍋 轉(zhuǎn) 速 35 r/min， 包 衣 液 噴 出 速 率 0.8 mL/min，片床溫度為 28 ～30 ℃。

表4 復(fù)方丹參脈沖片包衣液處方Tab.4 Form ulation of PT coating solution

包衣液的配制方法 將處方量的 TEC溶于一定量的 95%乙醇，攪拌， 完全溶解后加入處方量的 Eudragit RL PO， 加入少量滑石粉作抗黏劑， 攪拌過夜即得隔離層包衣液； 將處方量的 PEG 400溶于一定量的 70%乙醇， 攪拌， 完全溶解后加入處方量的 HPMC E5， 攪拌過夜即得溶脹層包衣液；將處方量的 TEC溶于一定量的 95%乙醇， 攪拌，完全溶解后加入一定比例的 Eudragit RS、 RL和 EC混合物，攪拌過夜即得控釋層包衣液。

2.4 工藝驗證 按 “2.3”項處方工藝分別制備 3批復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片，分別測定泡騰性滲透泵片和脈沖片的體外溶出曲線，結(jié)果見圖1、 圖2。

由釋放曲線看出，3批復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片的釋放曲線均具有高度相似性，說明該兩步釋放給藥系統(tǒng)的制備工藝具有良好的穩(wěn)定性。

圖1 3 批復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片中丹參素 （A） 和原兒茶醛 （B） 溶出曲線圖Fig.1 Release Profile of DS（ A） and PA （ B） from three batches of EOPT

圖2 3 批復(fù)方丹參脈沖片丹參素 （A） 和原兒茶醛 （B） 溶出曲線圖Fig.2 Release Profile of DS（ A） and PA （ B） from three batches of PT

3 討論

3.1 復(fù)方丹參兩步釋放給藥系統(tǒng)的設(shè)計以多體系系統(tǒng)為基礎(chǔ)，由零級釋放的復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖釋放的脈沖片按一定的比例裝入硬膠囊中構(gòu)成， “S” 型的釋藥曲線可以滿足冠心病的時辰治療，減少 “心血管事件” 的發(fā)生機率。 復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片利用復(fù)方丹參藥物呈酸性的特點，直接加入碳酸氫鈉組成泡騰性活性物質(zhì)，與滲透壓活性物質(zhì)共同作為藥物釋放的推動力，可以在12 h內(nèi)以零級速率恒速釋藥。 脈沖片由含有有機酸、滲透活性物質(zhì)和具有膨脹作用的崩解劑的片芯外包三層衣膜構(gòu)成，這樣藥物在膨脹，滲透壓和有機酸誘導(dǎo)機理的共同作用下，在一定的時滯后脈沖釋藥。

3.2 粉末直接壓片法工序簡單，在國外研究中使用較廣，適用于流動性和可壓性較好的原料。復(fù)方丹參泡騰性滲透泵片和脈沖片原料吸濕性較強，需控制環(huán)境濕度，添加適量的硬脂酸鎂后流動性可達到粉末直接壓片要求。

3.3 包衣鍋溫度和轉(zhuǎn)速是影響包衣膜的性質(zhì)的主要因素。包衣溫度高于 45 ℃， 轉(zhuǎn)速低于 30 r/min均會導(dǎo)致包衣片表面不均勻。這是因為溫度高于45℃時， 包衣液中溶劑揮發(fā)過快， 使得包衣液中成膜物質(zhì)析出快，不能在片芯表面均勻鋪展，導(dǎo)致衣膜均勻性不佳。 在轉(zhuǎn)速小于 30 r/min 時，由于樣品滾轉(zhuǎn)較慢，片芯之間或片芯與包衣鍋在包衣液噴入后容易產(chǎn)生黏連。 將轉(zhuǎn)速控制 50 r/min 以上時，片芯間不黏連，包衣膜表面光滑、均勻。此外，滾轉(zhuǎn)速度越高，片芯磨損也會加大。實驗過程中，由于鍋內(nèi)溫度及風速受限，包衣液的噴入速度過高，包衣液揮發(fā)不完全，從而出現(xiàn)包衣片表面不均勻，包衣膜透明度不佳，韌性不足等一系列問題。因此，本實驗根據(jù)包衣效果及各包衣液的性質(zhì)確定最佳的包衣溫度、 轉(zhuǎn)速及包衣液體積流量［16］。

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PreParation Process of two-steP release drug delivery system of com Pound Danshen

YUAN Yu1， DAIMei1， ZHOUWei-lan1， XIE Yi-peng1， LIYuan-bo1*， HOU Shi-xiang2
（1.Yangtze River Pharmaceutical Group， Sichuan Hairong Pharmaceutical Co.， Ltd， Dujiangyan 611830， China； 2.West China Schoolof Pharmacy，Sichuan University， Chengdu 610041， China）

compound Danshen； effervescent osmotic pump tablets； pulsatile-release tablets

R944.9

： A

： 1001-1528（2014）01-0072-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.01.018

2013-03-13

袁 瑜， 工程師， 碩士， 從事新藥研究。 Tel： （028） 87197999， E-mail： crystal_yy520@hotmail.com

*通信作者： 李元波， 高級工程師， 博士， 從事中西藥物新型給藥系統(tǒng)研究。 Tel： （028） 87197999， E-mail： liyuanbo@yangzijing.com