Y染色體Amelogenin基因變異1例

曹志華 孫亞男 唐立岡 劉延明 崔 文Δ

（1濟(jì)寧市公安局刑偵支隊(duì)，山東濟(jì)寧272067；2濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院司法鑒定中心，濟(jì)寧272067；3汶上縣公安局刑偵大隊(duì)，汶上272500；4微山縣公安局刑偵大隊(duì)，微山277600）

1 案例資料

1.1 案情簡介

2009年03月05日，某市郊區(qū)發(fā)生一起強(qiáng)奸案，偵查人員在現(xiàn)場提取到受害人岳某的內(nèi)褲，與犯罪嫌疑人張某的血樣一并送檢。

1.2 檢測過程

1.2.1 確證試驗(yàn) 剪取受害人岳某內(nèi)褲襠部的適量可疑斑跡，經(jīng)PSA試紙條檢驗(yàn)為精斑。

1.2.2 DNA提取 采用差異裂解法提取內(nèi)褲襠部檢材的可疑精斑DNA。采用ID試劑盒對提取的模板DNA進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)3130型（ABI）遺傳檢測分析儀進(jìn)行檢測分析，得到上述檢材的基因分型結(jié)果，見表1。

表1 STR分型結(jié)果

經(jīng)過比對發(fā)現(xiàn)，可疑精斑與張某血樣檢出的DNA分型在D8S1179、D21S11等15個基因座上完全相同，Amelogene基因分型均表現(xiàn)為XX（女性？）。

檢案人員再次提取受害人岳某的血樣送檢，其DNA分型與可疑精斑DNA分型不同，排除二者為同一個體所留。提取犯罪嫌疑人張某的父母和妻子、女兒的血樣送檢，其基因分型結(jié)果見表2。

表2 STR分型結(jié)果

上述DNA分型結(jié)果比對發(fā)現(xiàn)，張某與其父母在D8S1179、D21S11等15個基因座符合孟德爾遺傳規(guī)律；同樣，張某之女與張某、張某之妻之間的遺傳關(guān)系也符合孟德爾遺傳規(guī)律。張某之父和張某一樣，Amelogene基因分型表現(xiàn)為XX。再次將張某之父與張某的血樣DNA及可疑精斑DNA做Y染色體的STR分型檢測，結(jié)果見表3。

表3 Y－SRT分型結(jié)果

G－DYS19G－DYS385Y－DYS393Y－DYS391Y－DYS439Y－DYS835 13 15／22 13 9 11 22 13 15／22 13 9 11 22 13 15／22 13 9 11 22 Y－DYS392 R－Y－GATA－H4 R－DYS437 R－DYS438 R－DYS448 14 10 14 12 19 14 10 14 12 19 14 10 14 12 19

上述Y－STR分型結(jié)果比對發(fā)現(xiàn)，張某之父、張某、可疑精斑均來自同一父系。

經(jīng)親緣關(guān)系鑒定和Y－STR檢驗(yàn)，最終確定受害人內(nèi)褲上的可疑精斑與張某的DNA分型一致，張某即是本案犯罪嫌疑人。

2 討論

應(yīng)用PCR方法鑒定性別已被證實(shí)多年。目前被法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室廣泛采用的性別分型方法是Amelogenin系統(tǒng)。Amelogenin是編碼牙釉質(zhì)蛋白的基因，為X、Y染色體共有，AmelX－gene大小為2872bp，定位于X染色體p22區(qū)域；AmelY－gene大小為3272bp，定位于Y染色體p12.2區(qū)域[1]。最早的擴(kuò)增Amelogenin基因的特異性引物是由英國法庭科學(xué)服務(wù)部設(shè)計[2]。這些引物可連接于X染色體Amelogenin基因內(nèi)含子1中6bp缺失的側(cè)翼，使用AmpFlSTR試劑盒引物擴(kuò)增X和Y染色體課分別獲得106bp和112bp的產(chǎn)物。這種檢測方法非常靈敏，低DNA模板量或女性DNA多于男性DNA的情況下均能得到良好的分型結(jié)果，而且Amelogene基因可以與STR基因座復(fù)合擴(kuò)增。

然而，在法醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的性別鑒定中，供體與受體性別不一致的骨髓移植成功個體的性別檢測須謹(jǐn)慎，因?yàn)樵摲N情況下受體的血細(xì)胞性別檢測結(jié)果與供體一致而體細(xì)胞性別檢測結(jié)果與本人一致[3]。此外，Y染色體Amelogenin的稀有缺失可導(dǎo)致無法得到Y(jié)染色體擴(kuò)增產(chǎn)物[4]，類似AmelY基因變異的報道還有很多，而且一些學(xué)者認(rèn)為這是由引物結(jié)合區(qū)的某一處突變導(dǎo)致的，與AmelY基因序列無關(guān)[5－7]。意大利曾報道了2例AmelY基因缺失的案例[8]，日本也曾報道了1例同一家族中4名男性均缺失AmelY基因的案例[9]。Tozzo等認(rèn)為AmelY基因變異出現(xiàn)的頻率具有群體特異性[10]。

本案例中，經(jīng)Amelogene基因擴(kuò)增檢測發(fā)現(xiàn)，張某之父、張某的基因分型中只檢出AmelX－gene，AmelY－gene缺失。顯然，AmelY－gene發(fā)生了基因變異，而且這種變異可以遺傳給下一代。此種情況在實(shí)際檢案中比較少見，若擴(kuò)增之前忽略了查找精子的步驟，極易誤認(rèn)為擴(kuò)增出的是受害人（女性）的基因分型，從而延誤案件的偵辦或使案件最有力的直接證據(jù)缺失。有學(xué)者提出增加Y染色體性別決定序列的擴(kuò)增來避免此類情況的發(fā)生[10]，但是因其無法與其他STR同時復(fù)合擴(kuò)增而難以推廣。因此，在今后的檢案工作中需要辦案人員綜合分析，結(jié)合案情謹(jǐn)慎認(rèn)真的處理相關(guān)生物檢材，從而避免錯誤的發(fā)生。

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