促滲劑對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響＊

孔 霞柳 青張春燕孫珊珊△

（1濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院，山東濟(jì)寧 272011；2濟(jì)寧市中醫(yī)院，濟(jì)寧 272000；3濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，日照 276826）

促滲劑對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響＊

孔 霞1柳 青2張春燕3孫珊珊3△

（1濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院，山東濟(jì)寧 272011；2濟(jì)寧市中醫(yī)院，濟(jì)寧 272000；3濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，日照 276826）

目的探討促滲劑對(duì)奧美沙坦O／W微乳透皮吸收的影響，為奧美沙坦透皮吸收制劑的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。方法以水－油酸－PluronicF－68和Tween－60－正丁醇作為微乳組成部分，制備奧美沙O／W微乳體系，采用Franz擴(kuò)散池，SD雄性大鼠離體皮膚作為滲透屏障，利用紫外分光光度法測(cè)定奧美沙坦含量，比較氮酮、二甲亞砜、丙二醇對(duì)奧美沙坦透皮吸收的影響。結(jié)果氮酮和二甲基亞砜可明顯促進(jìn)藥物的透皮吸收，而丙二醇使微乳中奧美沙坦?jié)B透速率降低到。結(jié)論不同的促滲劑對(duì)奧美沙坦的經(jīng)皮滲透作用影響不同，3%氮酮具有最佳促滲效果。

O／W微乳；奧美沙坦酯；透皮；促滲劑

近年來(lái)藥物新劑型的研究和開(kāi)發(fā)是國(guó)內(nèi)外藥劑領(lǐng)域的一個(gè)重要研究課題，其中經(jīng)皮給藥系統(tǒng)可避免藥物的首過(guò)效應(yīng)，減少對(duì)胃腸道系統(tǒng)的刺激，降低毒副作用，具有較好的順應(yīng)性，且使用方便，已成為藥學(xué)領(lǐng)域的重要研究?jī)?nèi)容之一［13］。為增加藥物的透皮吸收效率，人們采用物理的或化學(xué)的方法促進(jìn)藥物的經(jīng)皮吸收，其中一些新型藥物傳遞系統(tǒng)如微乳、脂質(zhì)體等載藥體系的透皮吸收已成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)［45］。微乳用作經(jīng)皮給藥系統(tǒng)載體時(shí)，由于粒徑小，具有較強(qiáng)的組織親和力，可使活性物質(zhì)的經(jīng)皮擴(kuò)散速率增加，吸收明顯加快等優(yōu)點(diǎn)，因此微乳在經(jīng)皮轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中的研究已成為熱點(diǎn)之一［6］。促滲劑可進(jìn)一步降低皮膚角質(zhì)層的屏障作用，提高藥物滲透量，因此在透皮制劑的研究熱點(diǎn)之一中也是人們關(guān)注的重要內(nèi)容［7］。

1 材料與儀器

1.1 儀器

RYJ－6A型藥物透皮擴(kuò)散儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）、島津2450紫外分光光度計(jì)（日本島津），H－1650型高速臺(tái)式離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)有限公司）；Zetasizer納米粒度zeta電位分析儀（英國(guó)Mariner公司）；79HW－1型恒溫磁力攪拌器（江蘇金壇市榮華儀器制造有限公司）。

1.2 藥物與試劑

PluronicF－68（Sigma－Adrich公司），油酸（天津市博迪化工有限公司）、吐溫－60（天津市巴斯夫化工有限公司），蒸餾水（自制）、NaH2PO4／Na2HPO4（天津市天河化學(xué)試劑廠(chǎng)）；正丁醇（萊陽(yáng)市雙雙化工有限公司），乙醇（天津市廣成化學(xué)試劑有限公司）；丙二醇（天津市化學(xué)試劑三廠(chǎng)）；奧美沙坦酯（對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；二甲基亞砜（分析純，中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司）；氮酮（分析純，湖北省恒康醫(yī)藥有限公司）。

1.3 動(dòng)物

昆明純種雄性大白鼠，體重152g，由濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 奧美沙坦O／W型微乳的制備

將處方量的泊洛沙姆（1.35g）、吐溫－60（1.36g）、正丁醇（2.73g）和水（3.75g）、油酸（0.82g）在恒溫磁力攪拌器上充分混勻，形成均勻的互溶體系后，加入奧美沙坦（10.0mg）使之完全溶解，即得透明的微乳液。利用激光粒度儀測(cè)得其平均粒徑為90.2nm；放置兩周后其平均粒徑值為115.7nm，說(shuō)明體系較穩(wěn)定。

2.2 奧美沙坦標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

配制奧美沙坦標(biāo)準(zhǔn)溶液，在400～190nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果奧美沙坦在204nm處有最大吸收，確定216nm為測(cè)定波長(zhǎng)，測(cè)定不同濃度下奧美沙坦標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，得其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)A＝0.0233C＋0.0957，R2＝0.9998。

2.3 促滲劑對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收研究

2.3.1 離體大鼠皮膚的制取 將體重為152g的大白鼠腹部用脫毛劑脫毛，生理鹽水洗凈腹部，飼養(yǎng)2d后斷頸處死，取無(wú)毛的腹部皮膚，去掉皮下脂肪，用生理鹽水反復(fù)沖洗，置4℃的生理鹽水中保存?zhèn)溆?。使用前用pH＝6.8的磷酸鹽緩沖液浸泡30min，再用磷酸鹽緩沖液漂洗至洗液澄明，用濾紙吸干，備用。

2.3.2 空白微乳透皮吸收液的光譜掃描 采用改進(jìn)的Franz擴(kuò)散池進(jìn)行透皮實(shí)驗(yàn)，擴(kuò)散池用一個(gè)恒溫（37℃）循環(huán)水套保溫，皮膚固定在供給室和接收室之間，皮膚表層面向供給室，有效滲透面積S為2.8cm2，接收液為pH＝6.8的磷酸鹽緩沖溶液，接收室體積V為6.0ml。

將經(jīng)過(guò)處理后的新鮮大白鼠皮緊扎于體外釋放裝置樣品管口，鼠皮外側(cè)緊貼空白微乳，釋放池內(nèi)為pH＝6.8的磷酸鹽緩沖溶液，同時(shí)打開(kāi)磁力攪拌器，分別于2、4、6h吸取接受液0.3ml，同時(shí)補(bǔ)加0.3ml磷酸鹽緩沖溶液，對(duì)接受液進(jìn)行光譜掃描，空白微乳經(jīng)皮吸收后，釋放液于216nm處無(wú)吸收，因此實(shí)驗(yàn)中空白微乳對(duì)藥物的測(cè)定無(wú)干擾。

2.3.3 載藥微乳透皮吸收研究 將奧美沙坦微乳緩慢加入到供給室中的皮膚表面，開(kāi)啟電磁攪拌器以200r／min的速度攪拌。于0.5，1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0h取出接收液2ml（每次取樣后均補(bǔ)加等量的pH＝6.8的磷酸鹽緩沖液）。將取得的樣品經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾，以pH＝6.8的磷酸鹽緩沖溶液作對(duì)照，用紫外分光光度法測(cè)定奧美沙坦的含量，根據(jù)公式Q＝Cn×V＋Σ（Ci×V），求出藥物透皮吸收的累積滲透量Q。式中Q：累積滲透量；S：有效擴(kuò)散面積；V：接收室中接收液體積；Ci：第1次至上次取樣時(shí)接收液中藥物濃度；Cn：該次取樣時(shí)接收液中藥物濃度。

2.3.4 促滲劑對(duì)奧美沙坦透皮速率的影響 在供給池分別加入不同促滲劑，調(diào)節(jié)溫度至37℃，轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速為300r／min，6h后傾出兩池液體，用蒸餾水反復(fù)沖洗干凈，再于供給池中加入已配好的奧美沙坦酯微乳液，然后分別在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10h時(shí)取出接受池中的溶液，將取出的樣品用0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾，以pH＝6.8的磷酸鹽緩沖液作對(duì)照，測(cè)吸收度。

3 結(jié)果與討論

3.1 奧美沙坦微乳透皮吸收研究

奧美沙坦微乳的透皮吸收曲線(xiàn)與磷酸鹽緩沖體系中奧美沙坦的透皮吸收曲線(xiàn)對(duì)比結(jié)果，見(jiàn)圖1。

圖1 微乳體系與磷酸鹽緩沖體系中奧美沙坦的滲透曲線(xiàn)

以各時(shí)間點(diǎn)的累積滲透量Q對(duì)時(shí)間t進(jìn)行回歸，得其直線(xiàn)回歸方程：處方.微乳體系的Q－t曲線(xiàn)及滲透速率和滲透系數(shù)如下：Q＝35.8t－8.4，r＝0.9959，由直線(xiàn)斜率得其滲透速率為J＝（35.8 ±0.90）μg／cm2／h，其滲透系數(shù)為，Ps＝0.014± 0.0003。由此可以看到奧美沙坦在該微乳體系中有較高的滲透速率，且其釋放基本上是恒速釋放，釋放速率符合Fick第一定律。

磷酸鹽緩沖液中奧美沙坦?jié)B透情況，以各時(shí)間點(diǎn)的累積滲透量Q對(duì)時(shí)間t進(jìn)行回歸，得到直線(xiàn)的回歸方程：Q＝6.86t－1.43，r＝0.9885，透皮速率為J＝（6.86±0.31）μg／cm2／h，滲透系數(shù)Ps＝0.01±0.005。

由圖1可以看到，微乳體系中奧美沙坦的透皮速率明顯高于其磷酸鹽緩沖溶液中的透皮速率，這是由于在微乳體系中表面活性劑的存在增加了角質(zhì)層的通透性，減低了藥物經(jīng)皮滲透的阻力，同時(shí)微乳體系中的油酸可破壞角質(zhì)層類(lèi)脂膜結(jié)構(gòu)及在角質(zhì)層細(xì)胞間形成腔隙易于滲入角質(zhì)層結(jié)構(gòu)，因此油酸的存在也具有促進(jìn)奧美沙坦透皮擴(kuò)散的能力，故使其在微乳中的透皮速率顯著增加。此外由于磷酸鹽緩沖溶液中奧美沙坦的溶解度較低，因此擴(kuò)散液與接收液間的濃度梯度相對(duì)于微乳體系來(lái)說(shuō)較小，因此也使得磷酸鹽緩沖溶液中奧美沙坦的透皮速率低于微乳體系中的透皮速率。

3.2 促滲劑對(duì)奧美沙坦透皮速率的影響

為進(jìn)一步提高藥物的滲透量，本部分考察了常用促滲劑對(duì)奧美沙坦微乳的透皮速率的影響?？疾炝吮?、月桂氮酮、二甲亞砜等促滲劑對(duì)微乳中奧美沙坦透皮速率的影響。測(cè)定奧美沙坦酯的透皮情況，比較不同促滲劑的促滲效果，計(jì)算累積滲透量Q，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，累積釋放t為縱坐標(biāo)，得奧美沙坦酯的累積滲透曲線(xiàn)。

3.2.1 月桂氮酮對(duì)微乳透皮吸收的影響 分別考察1%氮酮、3%氮酮、5%氮酮對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響，結(jié)果見(jiàn)圖2、表1。

以各時(shí)間點(diǎn)的累積滲透量Q對(duì)時(shí)間t進(jìn)行回歸，得不同濃度氮酮條件下的其直線(xiàn)回歸方程分別可得數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

又圖2及表1結(jié)果可見(jiàn)，氮酮體系對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收具有明顯的促滲透效果，其中3%的氮酮對(duì)奧美沙坦的經(jīng)皮滲透作用促滲效果最佳。

3.2.2 二甲亞砜對(duì)微乳透皮吸收的影響 考察10%二甲基亞砜和15%二甲基亞砜為促滲劑時(shí)對(duì)奧美沙坦?jié)B透能力的影響及其與3%氮酮體系的對(duì)比結(jié)果，見(jiàn)圖3和表2。

圖2 不同濃度氮酮為促滲劑時(shí)微乳透皮累積滲透曲線(xiàn)

表1 不同濃度氮酮為促滲劑時(shí)奧美沙坦微乳體系透皮吸收結(jié)果

圖3 不同濃度二甲基亞砜對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響

表2 不同二甲亞砜為促滲劑時(shí)奧美沙坦微乳體系透皮吸收結(jié)果

由圖3及表2可見(jiàn)，15%二甲亞砜促滲效果優(yōu)于10%的二甲亞砜體系，但其促滲效果較3%的氮酮體系弱得多。

3.2.3 丙二醇對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響5%的丙二醇對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 丙二醇對(duì)奧美沙坦微乳透皮吸收的影響

由圖4可以得到加入丙二醇后得到微乳Q－t關(guān)系式為，Q＝25.86t－9.58，r＝0.9916，J＝（25.86±1.30）μg／cm2／h，Ps＝0.010±0.001；由此可以看到丙二醇的加入不但沒(méi)有使其滲透速率增加，反而使?jié)B透速率降低到，這是由于丙二醇的加入，使微乳的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，從而影響了藥物的滲透速度。

不同的促滲劑及同一促滲劑濃度的差異對(duì)藥物的經(jīng)皮滲透作用不同，大白鼠皮經(jīng)3%氮酮處理后，能夠顯著提高藥物的Js，亦可縮短藥物的Tlag，因此采用3%氮酮作為奧美沙坦微乳經(jīng)皮吸收滲透劑，能最大程度提高奧美沙坦的滲透速率，縮短滯留時(shí)間。二甲亞砜易于滲入角質(zhì)層結(jié)構(gòu)對(duì)奧美沙坦微乳也具有明顯的促滲作用，但其對(duì)奧美沙坦的促滲作用明顯低于氮酮的促滲作用，二丙醇不僅不能促進(jìn)奧美沙坦的透皮速率反而使其透皮速率下降。

4 結(jié)論

1）奧美沙坦在O／W型微乳體系中有較高的滲透速率，且其釋放基本上是恒速釋放，釋放速率符合Fick第一定律。

2）促滲劑氮酮及二甲亞砜可明顯增加奧美沙坦微乳的透皮速率及累計(jì)滲透量，而且在本研究體系中氮酮的促滲能力明顯優(yōu)于二甲亞砜。促滲劑丙二醇使奧美沙坦微乳的滲透速率降低。

3）奧美沙坦微乳制劑有望開(kāi)發(fā)成為新的奧美沙坦外用制劑。

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Influence of enhancers on the Transdermal Adsorption of Olmesartan Microemulsion

KONG Xia，LIN Qing，ZHANG Chun－yan，et al
（Shandong Jining No.1People＇s Hospital，Jining 272013，China）

ObjectiveTo provide guidance and basis for the transdermal preparation of Olmesartan，the influences of enhancers on transdermal adsorption of Olmesartan O／W microemulsion were studied.MethodsThe O／W microemulison contained Olmesartan was prepared by self emulsified using the mixture of PluronicF－68 and tween 60 as surfactant，butanol as cosurfactant，oleic acid as oil phase and distilled water as the water phase.The transdermal effects of azone，dimethylsulphoxide and propylene glycol to Olmesartan were studied in transdermal experiments in vitro.Drug permeation tests were performed in Franz diffusion cell with two－compartment diffusion cell through excised rats skin.Sample were collected from the receiver compartment.Olmesartan concentration in samples was determined by UV spectrometer.ResultsAzone and dimethylsulphoxide could obviously enhance the permeation of Olmesartan across the skin of SD male rats.However，propylene glycol weakened the penetration ability of Olmesartan.ConclusionThere existed different enhance ability among the above enhancers for Olmesartan across the skin of SD male rats.And 3%Azone had strongest effect on the transdermal permeation of Olmesartan.

O／W microemulsion；Olmesartan；Transdermal delivery enhancers

R94

A

1000－9760（2014）04－084－04

2014－02－15）

10.3969／j.issn.1000－9760.2014.02.003

2006年山東省教育廳課題（編號(hào)：J06L59）

△［通信作者］孫珊珊，E－mail：sss－815＠163.com