苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠血脂的影響

張澤生，楊帥，雷萌萌，張云軒，徐夢瑩

（天津科技大學食品工程與生物技術學院，天津300457）

苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠血脂的影響

張澤生，楊帥，雷萌萌，張云軒，徐夢瑩

（天津科技大學食品工程與生物技術學院，天津300457）

研究生長時間為55 d～75 d苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠血脂調(diào)節(jié)作用。雄性倉鼠適應環(huán)境1周后，隨機分為5組（n=8），分別為空白組、模型組、苦蕎全葉組和苦蕎葉醇提物低、高劑量組。飼喂6周后眼底靜脈叢取血，斷頸處死，測定血清與肝臟中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和丙二醛（MDA）等各項指標。與模型對照組相比，苦蕎全葉及其醇提物各劑量組血清、肝臟和糞便中TC、TG含量均極顯著降低（P＜0.01），血清中HDL-C極顯著增高，動脈粥樣硬化指數(shù)（AI）極顯著降低（P＜0.01），血清和肝臟中的MDA含量均極顯著降低（P＜0.01）?？嗍w全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠具有降血脂的作用。

苦蕎葉；醇提物；倉鼠；降血脂

苦蕎麥（FagopyruMtararium（L.）Gaertn）屬雙子葉蓼科植物（Polygonaceae）蕎麥屬（Fagopyrum），也稱為苦蕎（tartay buckwheat），是自然界中甚少的藥食兩用作物。我國苦蕎麥種植分布較廣，主要集中在西南地區(qū)的四川、云南、貴州等地[1]。

苦蕎麥中含有大量的黃酮類化合物、D-手性肌醇、弱堿性淀粉、活性蛋白等，具有抗氧化、降血糖、降血脂、抗腫瘤等多種藥理活性，而發(fā)揮這些藥理活性的物質(zhì)主要是苦蕎麥中的黃酮類化合物[2-3]。Kim和Lee等[4-5]的研究表明，苦蕎麥的花、葉、莖、籽粒、殼中均含有一定量的黃酮類化合物，其含量依次為花＞葉＞籽＞莖＞殼＞根。本文旨在研究苦蕎葉黃酮含量最高時期苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠血脂水平的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 苦蕎種子

購自陜西。

1.1.2 動物

SPF級雄性倉鼠48只，體重（90±10）g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，合格證號為SCXK（京）2012-0001。

1.1.3 藥品及試劑

蘆丁標準品、總膽固醇試劑盒（TC）、甘油三酯試劑盒（TG）、高密度脂蛋白試劑盒（HDL-C）中生北控生物科技股份有限公司；丙二醛試劑盒（MDA）、考馬斯亮藍蛋白試劑盒：南京建成生物工程研究所。

1.1.4 儀器

MR2冷凍離心機、凍干機：美國Thermo公司；UVmini-1240型紫外-可見分光光度計：日本島津公司；旋轉蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠；XS20電子天平：METTLERTOLEDO公司。

1.2 方法

1.2.1 苦蕎葉粉末的制備

采摘生長時間在55 d到75 d內(nèi)苦蕎葉，60℃烘干，粉碎。

1.2.2 苦蕎葉醇提取的制備

苦蕎葉→苦蕎葉粉末→70%乙醇回流提取→過濾→濃縮→凍干。

1.2.3 動物分組及飼養(yǎng)

飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)動物房，20℃～23℃，12：12 h明-暗循環(huán)照。

倉鼠經(jīng)適應環(huán)境喂養(yǎng)1周后，隨機分成6組（n=8），分別為空白組、模型組、苦蕎全葉組和苦蕎葉醇提物低、高劑量組。各組倉鼠自由進食飲水，準確記錄日進食量，并且每周稱體重1次。各組動物飼料組成如表1所示[6]。

倉鼠飼喂6周后，禁食12 h，眼底靜脈叢取血，于4℃3 000 r/min離心15min，取上層血清待用。準確稱取肝臟組織，按重量體積比加9倍生理鹽水制成10%的勻漿液，4℃3 000 r/min離心10min，取上清待用。飼喂最后3 d收集倉鼠糞便，80℃烘干待用。

表1 倉鼠飼料組成Table1 CoMpositionsof diets for haMsters g/kg

1.2.4 指標的測定

根據(jù)試劑盒說明，采用酶比色法測定血清中TC和TG的含量，采用磷鎢酸-鎂沉淀法測定HDL-C的含量。

肝臟和糞便中TC、TG采用Folchmethod法萃取[7]，采用試劑盒測定。

血清及肝臟中MDA的含量采用MDA試劑盒（TBA法）測定。

1.2.5 統(tǒng)計學分析

采用SPSS11.5軟件對數(shù)據(jù)進行分析，結果以平均值±標準差（m±s）表示。

2 結果

2.1 苦蕎葉醇提物和苦蕎全葉對倉鼠體重、攝食量及相關臟器重量的影響

飼喂苦蕎全葉或其醇提物飲食對各組倉鼠體重、攝食量及相關臟器重量的影響見表2。

試驗各組經(jīng)過6周的自由進食飲水，日攝食量、腎臟重量、心臟重量、附睪脂肪重量、腎周脂肪重量沒有統(tǒng)計差異。與空白組相比，模型組的體重增加量、肝臟指數(shù)均有極顯著差異（P＜0.01），脂重指數(shù)有顯著差異（P＜0.05）。與模型組相比，各劑量組的體重增加量均有極顯著差異（P＜0.01），低劑量組的肝臟指數(shù)有顯著差異（P＜0.05），高劑量組和全葉組有極顯著差異（P＜ 0.01），脂重指數(shù)無顯著差異。

表2 苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠體重增加量、攝食量及相關臟器指數(shù)、脂重指數(shù)的影響（m±s，n=8）Table2 Effectsof Tartay Buckwheat leavesand itsalcoholextractssupplementation on bodyweightgain，feed intake，organ index and fatMass index of haMsters fed a high-fat diet（m±s，n=8）

2.2 苦蕎全葉及其醇提物對高血脂癥倉鼠血脂水平的影響

苦蕎全葉及其醇提物和對高脂血癥的倉鼠的血清、肝臟、糞便脂質(zhì)含量的影響見表3。

與空白組相比，模型組的血清、肝臟和糞便中TC、TG均有極顯著性差異（P＜0.01），血清中HDL-C、Non-HDL-C和AI均有極顯著性差異（P＜0.01）。與模型組相比，低劑量組的血清中TC有顯著差異（P＜0.05）、Non-HDL-C有極顯著性差異（P＜0.01）。高劑量組和全葉組的血清、肝臟和糞便中TG、TC均有顯著性差異（P＜0.01），血清中HDL-C、Non-HDL-C和AI均有極顯著性差異（P＜0.01）。

表3 苦蕎全葉及其醇提物對高脂血癥倉鼠的血清、肝臟、糞便脂質(zhì)含量的影響（m±s，n=8）Table3 Effectsof Tartay Buckwheat leavesand itsalcoholextractssupplementation on plasma，hepatic and faecal lipid concentration ofhamsters fed a high-fatdiet（m±s，n=8）

2.3 倉鼠血清、肝臟中丙二醛（MDA）的含量。

研究表明，隨著機體血脂的升高，血清過氧化脂質(zhì)增加。高脂膳食可引起倉鼠體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化反應發(fā)生，此過程可以產(chǎn)生大量脂質(zhì)過氧化物及中間產(chǎn)物，生成小分子的醛、酮和烯烴等許多有毒性的代謝產(chǎn)物。丙二醛（MDA）是脂質(zhì)過氧化最終產(chǎn)物，其含量的高低可作為機體脂質(zhì)過氧化程度的表征，MDA含量的增高會導致血清中自由基的產(chǎn)生增多，對細胞造成損害[8]。

苦蕎全葉及其醇提物對倉鼠血清、肝臟中丙二醛（MDA）含量的影響見圖1。

如圖可以看出，與空白組相比，模型組血清、肝臟中MDA含量極顯著升高（P＜0.01）。與模型組相比，低劑量組、高劑量組血清中MDA含量均有所降低，但無統(tǒng)計學意義；全葉組血清中MDA含量極顯著降低（P＜0.01）；低劑量、高劑量、全葉組肝臟中MDA含量均有極顯著降低（P＜0.01）。

圖1 苦蕎全葉及其醇提物對倉鼠血清、肝臟中丙二醛（MDA）含量的影響（m±s，n=8）。與空白組相比Fig.1 Effectsof Tartay Buckwheat leavesand itsalcoholextracts supplementation on MDA in seruMand liver of hamster（m±s，n=8）.CoMpared to the NorMalgroup

3 結論與討論

攝入富含黃酮類化合物的苦蕎全葉及其醇提物，均有利于改善由攝入高脂膳食造成的肝臟腫大和脂肪肝等，從而抑制高脂膳食的倉鼠體重的增加，并能不同程度降低血清和肝臟中脂質(zhì)濃度，降低脂質(zhì)過氧化物（MDA）的含量，同時增加糞便脂質(zhì)含量，大大降低了動脈粥樣硬化的風險。攝入苦蕎全葉組較攝入苦蕎葉醇提取組效果更好，可能是因為苦蕎葉中還含有大量的纖維可以促進脂質(zhì)的排出。以上可以充分說明苦蕎全葉及其醇提物均有利于調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝或預防高脂高脂血癥。

[1]Lin R F．China Buckwheat(中國蕎麥)[M]．Beijing：China Agriculture Press,1994

[2]田秀紅,任濤．苦蕎麥的營養(yǎng)保健作用與開發(fā)利用[J]．中國食物與營養(yǎng),2007(10)：44-46

[3]胡一冰,楊敬東,鄒亮等．苦養(yǎng)麥藥理研究及臨床應用概況[J].威都大學學報：自然科學版,2006(4)：271－276

[4]KiMJS,Park Y J,Yang MH,etal．Variation of rutin content in seed and plant of buckwheat germplasms(fagopyruMesculentuMMoench)．Korean Journalof Breeding,1994,26(4),384－388

[5]Lee H B,KiMSL,Park CH.Productivity ofwhole plant and rutin content under the different quality of light in buckwheat[J]．In The proceedingof theeighth ISB,2001：84－89

[6]王浩,張澤生,梁麗雅,等．高膽固醇膳食對SD大鼠和倉鼠血液膽固醇水平及小腸ACAT活性的影響[J].食品研究與開發(fā),2010(5)：10－14

[7]Folch J,LeesM,Sloan－Stanley G H.A simplemethod for isolation and purification of total lipids froManimal tissues[J]．Journalof BiologicalChemistry,1957，226：497－509

[8]Loeckie L,De Z,John HN,etal．Biomarkersof free radical damage applications in experimental animals and in humans[J]．Free Radical biology andmedicine,1999,26(1/2)：202－226

Effect of Tartay Buckwheat Leaves and Alcohol Extract on Blood Lipid in HyperlipeMia Hamsters

ZHANGZe-sheng，YANGShuai，LEIMeng-meng，ZHANGYun-xuan，XUMeng-ying
（Collegeof Food Engineeringand Biotechnology，Tianjin Universityof Scienceand Technology，Tianjin 300457，China）

Thisstudywas conducted to investigate the effectsof tartay buckwheat leavesand itsalcoholextracts on hypolipidemic hamsters.Male hamsterswere randoMly divided into six groups（n=8）：normalgroup，model group，low-dose and high-dose groupsof tartay buckwheat leavesalcoholextracts and tartay buckwheat leaves group.After feeding 6weeks，hyperlipidemia indicatorswere tested.Compared with themodelgroup，the total cholesterol（TC）and triglyceride concentrations（TG），atherogenic indexofseruMand liverwere significantly decreased by feeding the tartay buckwheat leaves and alcohol extracts；the concentration of high density lipoprotein cholesterolin seruMexhibited a significantly increase.Meanwhile，the contentofMDAwasdecreased in seruMand liver.The resultssuggested that the tartay buckwheat leavesand alcoholextractshad hypolipidemic activity.

tartay buckwheat leaves；alcoholextract；hamster；hypolipidemic

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.18.022

2014-09-15

張澤生（1956—），男（漢），教授，博士生導師，博士，研究方向：食品添加劑與功能配料。