清熱藥解熱作用的文獻(xiàn)再評價(jià)

張 涓，李曉會(huì)，馬麗娜，張恩戶

(陜西中醫(yī)學(xué)院藥理教研室，陜西 咸陽 712046)

清熱藥是以清解里熱為主要作用的藥物，主要用于熱病高熱、痢疾、臃腫瘡毒、以及目赤腫痛、咽喉腫痛等各種里熱證候。大部分清熱藥都有解熱作用，對實(shí)驗(yàn)性熱證的各個(gè)環(huán)節(jié)都有抑制作用。全國高等中醫(yī)藥院校研究生規(guī)劃教材《中藥學(xué)》收載的清熱藥有抗病原體、抗細(xì)菌毒素、解熱、抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能、抗腫瘤等作用。為了驗(yàn)證清熱藥解熱作用的可靠性，本文以該教材中一部分清熱藥的解熱作用為研究對象，通過文獻(xiàn)查閱、歸納、整理，根據(jù)藥物解熱作用的評價(jià)原則，進(jìn)行文獻(xiàn)再評價(jià)，以明確其解熱作用。

1 藥物解熱作用評價(jià)

1.1 發(fā)熱的原因

發(fā)熱是由發(fā)熱激活物作用于機(jī)體，激活內(nèi)生致熱原細(xì)胞產(chǎn)生和釋放內(nèi)生致熱原(endogenous pyrogen，EP)，再經(jīng)一些后繼環(huán)節(jié)引起體溫升高。外源性致熱原的種類甚多，主要包括：(1)各種微生物病原體及其產(chǎn)物，如細(xì)菌、病毒、真菌及細(xì)菌毒素等；(2)炎性滲出物及無菌性壞死組織；(3)抗原抗體復(fù)合物；(4)某些類固醇物質(zhì)，特別是腎上腺皮質(zhì)激素的代謝產(chǎn)物原膽烷醇酮；(5)多糖體成分及多核苷酸、淋巴細(xì)胞激活因子等。內(nèi)源性致熱主要是一些是由免疫細(xì)胞和部分非免疫細(xì)胞合成和釋放的細(xì)胞因子，具有細(xì)胞間信息傳遞、免疫調(diào)節(jié)作用的一大類小分子蛋白質(zhì)或多肽。外源性致熱原通過激活血液中的中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，使其產(chǎn)生并釋放內(nèi)生致熱原，又稱白細(xì)胞致熱原，如白介素(IL-1)，腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素等。通過血-腦脊液屏障直接作用于體溫調(diào)節(jié)中樞的體溫調(diào)定點(diǎn)，另外可通過交感神經(jīng)使皮膚血管及豎毛肌收縮，停止排汗，散熱減少，體溫升高而引起發(fā)熱。

此外，還有如體溫調(diào)節(jié)中樞直接受損以及甲亢等引起產(chǎn)熱增多或心力衰竭等散熱減少的疾病，亦可引起發(fā)熱。總之，發(fā)熱是由于各種原因?qū)е庐a(chǎn)熱增多或散熱減少所致。

1.2 藥物解熱作用的評價(jià)方法

通過查閱文獻(xiàn)可知，常用的解熱作用實(shí)驗(yàn)方法為：先在正常的動(dòng)物體內(nèi)注入一定量的致熱原，造成動(dòng)物發(fā)熱模型，然后給予受試藥物治療，觀察受試藥物有無解熱作用，解熱強(qiáng)度如何。常用致熱源有生物刺激因子(如傷寒、副傷寒疫苗、細(xì)菌培養(yǎng)液、啤酒酵母混懸液等)或化學(xué)刺激因子(如內(nèi)毒素、二硝基苯酚、松節(jié)油、蛋白胨等)，采用皮下或靜脈注射給藥，引起動(dòng)物發(fā)熱。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用兔和大鼠。

雖然絕大多數(shù)引起發(fā)熱的方法都是通過機(jī)體產(chǎn)熱增加，散熱降低，體溫升高，但畢竟不同的外熱原致熱因子在起始階段作用途徑不同，加之定量藥理學(xué)研究所要求的致熱刺激的強(qiáng)度應(yīng)盡可能穩(wěn)定且易于控制，因而實(shí)驗(yàn)中必須根據(jù)所研究的目的和條件選擇相應(yīng)的致熱方法。如酵母性發(fā)熱、硝基苯酚性及內(nèi)毒素性發(fā)熱在我國解熱實(shí)驗(yàn)研究中使用較多。另外，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇也對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著一定的影響，如國內(nèi)大鼠對內(nèi)毒素所致發(fā)熱反應(yīng)一般不恒定，個(gè)體差異大，內(nèi)毒素量不宜控制，一定劑量下引起發(fā)熱，而劑量稍大則體溫反降。故評價(jià)清熱藥解熱作用的方法有酵母致熱法、2,4-二硝基苯酚致熱法、內(nèi)毒素致熱法、三聯(lián)菌苗致熱法、及細(xì)菌致熱法等。

2 再評價(jià)方法

2.1 文獻(xiàn)收集

文獻(xiàn)收集以新世紀(jì)全國高等中醫(yī)院校規(guī)劃教材《中藥學(xué)》記載的具有解熱作用的清熱藥為對象，查閱有關(guān)實(shí)驗(yàn)性研究文獻(xiàn)，以讀秀duxiu.com學(xué)術(shù)搜索、中國知網(wǎng)http：//www.cnki.net文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(1994-2013年)、萬方WANFANG DATA數(shù)據(jù)庫為主(1998-2013年)，西文生物醫(yī)學(xué)期刊和pubmed其他數(shù)據(jù)庫為輔進(jìn)行檢索、查閱。以“清熱作用”、“解熱作用”、“清熱”、“解熱”為關(guān)鍵詞檢索，查閱1993年至2013年間公開發(fā)表的相關(guān)清熱藥單味中藥解熱作用的實(shí)驗(yàn)研究期刊文獻(xiàn)。

2.2 文獻(xiàn)整理

詳細(xì)查看文獻(xiàn)信息，內(nèi)容包括供試藥制備、給藥途徑與劑量、動(dòng)物品系、實(shí)驗(yàn)方法、陽性藥結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論、作者及工作單位、刊物與發(fā)表年代等信息。研讀文獻(xiàn)，摘錄相關(guān)信息并填入表格，進(jìn)行分析(結(jié)果見表1)。

2.3 中藥解熱作用的評定標(biāo)準(zhǔn)

評價(jià)藥物解熱作用的實(shí)驗(yàn)方法較多，大多數(shù)選用外源性致熱原致熱的方法，但因不同的致熱原致熱因子在起始階段作用途徑不同，因此，單用一種方法評價(jià)藥物的解熱作用，帶有片面性。另外，中藥藥理作用復(fù)雜，藥理作用間也會(huì)相互影響，所以中藥藥理作用的評價(jià)應(yīng)符合綜合評價(jià)和重復(fù)性等原則。根據(jù)上述原則，確定評定標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)采用3種以上(包括3種)不同的模型，每種評價(jià)方法應(yīng)進(jìn)行不少于2次的重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果均為有效。

3 結(jié)果

結(jié)果表明，黃芩[1-4]、柴胡[5-8]、青蒿[9-11]、板藍(lán)根[12-13]、金銀花[14-15]解熱作用的研究文獻(xiàn)均超過10篇，而且同一實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)5次以上。其中有關(guān)柴胡解熱作用的研究文獻(xiàn)最多，以酵母致熱法、LPS誘導(dǎo)致熱法和內(nèi)毒素致熱法為主，每種實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)5次以上，均對發(fā)熱大鼠的體溫有顯著的抑制作用。柴胡的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)有47篇，對發(fā)熱大鼠均具有明顯的解熱作用。青蒿，板藍(lán)根，金銀花的文獻(xiàn)數(shù)分別為15、13、17篇，對酵母致熱及內(nèi)毒素致熱的實(shí)驗(yàn)大鼠體溫均有明顯抑制作用。說明上述5味中藥解熱作用確切。連翹[16]有研究文獻(xiàn)7篇，且同一實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)了5次，表明連翹有解熱作用。

表1 清熱藥解熱作用研究文獻(xiàn)一覽表

注：-表示未見原始研究文獻(xiàn)，*表示解熱作用弱或沒有解熱作用

大青葉[17]有7篇文獻(xiàn)，且分別采用了酵母致熱法，傷寒副傷寒菌苗混合制劑致熱法和內(nèi)毒素致熱法，每種方法都重復(fù)了2次，但是研究文獻(xiàn)比較少，實(shí)驗(yàn)證據(jù)不足。忍冬[18]有3篇文獻(xiàn)采用酵母致熱法進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)方法較單一。玄參[19]、地骨皮[20]、石膏[21]、梔子[22]、黃連[23]、丹皮[24]、半枝蓮[25]只采用了1～2種實(shí)驗(yàn)方法，且文獻(xiàn)數(shù)較少。故上述9種清熱藥實(shí)驗(yàn)依據(jù)不足。黃柏解熱方面的研究文獻(xiàn)只有一篇，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃柏沒有明確的解熱作用。知母，苦參，生地黃，蒲公英未見相關(guān)研究文獻(xiàn)。

4 討論

《中藥學(xué)》(中國中醫(yī)藥出版社，2009)中收載的具有解熱作用的20味清熱藥解熱作用的研究文獻(xiàn)共搜索到158篇，柴胡類論文有47篇，為最多，有的藥物未見相關(guān)研究文獻(xiàn)。從已有文獻(xiàn)分析可以看出，大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)研究方法主要集中在對外源性致熱原致熱后解熱效應(yīng)的觀察。在這些文獻(xiàn)中，酵母致熱法約占總數(shù)的48.7%，二硝基苯酚致熱法占8.22%，內(nèi)毒素致熱法占25.3%，傷寒副傷寒菌苗混合制劑致熱法占11.4%。有些文獻(xiàn)憑借一兩種實(shí)驗(yàn)就下結(jié)論，缺乏可重復(fù)性；有些有統(tǒng)計(jì)學(xué)問題。因此有必要規(guī)范中藥解熱作用的評價(jià)方法，如實(shí)驗(yàn)方法、供試藥制備、給藥途徑、重復(fù)次數(shù)等。鑒于此，本文確定中藥解熱作用的評定標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)采用3種以上(包括3種)的不同的模型，每種模型應(yīng)有不少于2次的重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果均為有效。按照此標(biāo)準(zhǔn)對《中藥學(xué)》教材收載的具有解熱作用的20種清熱藥進(jìn)行文獻(xiàn)再評價(jià)結(jié)果表明，黃芩、柴胡、青蒿、板藍(lán)根、金銀花、連翹作用確切，黃連、半枝蓮、地骨皮、忍冬、玄參、石膏、大青葉、牡丹皮、梔子實(shí)驗(yàn)依據(jù)不足，黃柏?zé)o解熱作用，知母、苦參、蒲公英、生地黃、赤芍未見相關(guān)研究文獻(xiàn)。單味藥未見相關(guān)研究文獻(xiàn)，一則可能是該中藥解熱作用實(shí)驗(yàn)依據(jù)不足，二則可能是該中藥臨床通常是配伍應(yīng)用，所以沒有單味藥的實(shí)驗(yàn)研究，下一步應(yīng)該深入研究。在本文研究中，該評定標(biāo)準(zhǔn)可行，可操作性強(qiáng)。

發(fā)熱的產(chǎn)生是多因素、多途經(jīng)綜合作用的結(jié)果。從已有文獻(xiàn)來看，清熱藥解熱作用及其機(jī)理的研究還比較孤立和分散，缺乏某一水平的多位點(diǎn)或從外周到中樞縱向通路的綜合研究，且中藥的劑量及起效時(shí)間的長短，均不一致，藥理作用復(fù)雜，有可能相互影響，亦受實(shí)驗(yàn)條件的限制。因此對具有解熱功效的中藥進(jìn)行解熱作用評價(jià)時(shí)，要根據(jù)主治病癥、發(fā)熱類型等選擇適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型進(jìn)行綜合評價(jià)，最好按照盲法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]徐 珊,孟慶剛,宋琳莉，等.不同來源的黃芩提取物解熱藥效差異比較[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009,27(6):1176-1180.

[2]尹華熙,白筱璐,鄧文龍.黃芩的解熱作用研究[J].中藥藥理與臨床,2007,23(6):51-53.

[3]楊 忻.黃芩解熱藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其解熱機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文,2009.

[4]Tisai CC,Lin MT,Wang JJ,et al.The antipyretic effects of baicalin in lipopolysaccharide-evoked fever in rabbits[J].Neuropharmacology,2006,51(4):709-717.

[5]張?jiān)撇?梁 園,夏愛軍.柴胡解熱作用的藥理研究進(jìn)展[J].中國藥業(yè),2011,20(3):79-80.

[6]衛(wèi) 昊,劉 清.秦嶺柴胡抗菌解熱作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2012,23(2):315-316.

[7]Chiang LC,Ng LT,Liu LT,et al.Cytotoxicity and anti-hepatitis B virus activities of saikosaponins from Bupleurum species[J].Planta Med,2003,69(8):705-709.

[8]Hiai S,Yokoyama H,Nagasawa T,et al.Stimulation of the pituitary-adrenocortical axis by saikosaponin of Bupleuri radix[J].Chem Pharm Bull(Tokyo),1981,29(2):495-499.

[9]黃 黎,劉菊福,劉林祥，等.中藥青蒿的解熱抗炎作用研究[J].中國中藥雜志,1993,18(1):44-48.

[10]黃修奇.青蒿的解熱作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(9):4581-4582.

[11]Shi KM,Zhou YF.An improved method of extracting Artermisia abrotanum Genomic DNA[J].Agricultural Science&Technology,2008,(2):36-38.

[12]林愛華,劉奕明,丘小惠，等.板藍(lán)根F022部位對內(nèi)毒素致家兔發(fā)熱模型的解熱作用[J].中藥新藥與臨床藥理,2005,16(6):420-421.

[13]陳 妍，李 祥，許金國，等.板藍(lán)根有效部位的抑菌解熱藥效研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2010,21(6):589-592.

[14]李興平,白筱璐,雷 玲，等.金銀花的解熱作用[J].中藥藥理與臨床，2012,28(2):36-39.

[15]宋建華.金銀花解熱抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].重慶醫(yī)學(xué),2011,40(25):2552-2553.

[16]胡竟一,雷 玲.連翹的抗炎解熱作用研究[J].中藥藥理與臨床,2007,23(3):51-52.

[17]吳啟南,王立新,蔣小文，等.大青葉中有機(jī)酸藥理作用研究[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2008,24(3):187-189.

[18]李金玲，唐 清，陳 剛，等.灰氈毛忍冬芽提取物的抑菌活性及其鎮(zhèn)痛抗炎解熱作用的研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(19):82-87.

[19]王 強(qiáng),李興平.玄參的抗炎解熱作用研究[J].中藥藥理與臨床，2011,27(3):76-78.

[20]黃小紅，周興旺,王 強(qiáng)，等.3種地骨皮類生藥對白鼠的解熱和降血糖作用[J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2000,29(2):229-232.

[21]周永學(xué)，李 敏，唐志書，等.中藥石膏及其主要成分解熱抗炎作用及機(jī)制研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012,35(5):74-76.

[22]張雪蘭，孫秀梅，牛序莉，等.炮制對梔子部分成分及解熱作用的影響[J].中藥材,1995,18(3):136-139.

[23]谷臣君.黃連注射液抗內(nèi)毒素致兔發(fā)熱及機(jī)理研究[D].重慶：西南大學(xué)碩士學(xué)位論文,2008.

[24]蔣舜媛，李興平,白筱璐，等.丹皮的抗內(nèi)毒素和解熱作用的研究[J].中藥藥理與臨床,2012,28(3):77-79.

[25]佟繼銘，陳光暉，高 巍，等.半枝蓮的解熱作用實(shí)驗(yàn)研究[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志,1999,27(10):166-167.