復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下生長性能和抗氧化活性的影響

靳雙星，張桂枝

（河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院畜牧工程系，河南 鄭州450046）

肉雞由于生長速度快，代謝旺盛，基礎(chǔ)體溫高，皮膚無汗腺又被覆羽毛，極易在高溫環(huán)境下產(chǎn)生熱應(yīng)激。研究表明，熱應(yīng)激不僅影響肉雞的行為，降低其采食量、生產(chǎn)性能、飼料轉(zhuǎn)化率及產(chǎn)品質(zhì)量[1-3]，而且對(duì)組織臟器造成一定的損傷[4]，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量具有毒性的活性氧自由基，誘發(fā)雞體內(nèi)出現(xiàn)過氧化狀態(tài)，超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶活性下降，從而導(dǎo)致體內(nèi)自由基產(chǎn)生增加，機(jī)體自身清除自由基的能力降低，引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生氧化應(yīng)激，造成細(xì)胞膜損傷，機(jī)體的抗氧化能力降低[5]。許多學(xué)者研究表明，一些中藥經(jīng)配伍后添加到飼料或飲水中既可緩解熱應(yīng)激對(duì)雞的危害，又能增強(qiáng)免疫力，還能助消化促食欲，同時(shí)具有抑制細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，清除機(jī)體產(chǎn)生的多余自由基，保護(hù)機(jī)體免受過氧化危害。本課題組根據(jù)中獸醫(yī)理論和養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)需要科學(xué)組方，研制出復(fù)方中藥合劑。本試驗(yàn)通過在飲水中添加不同濃度的復(fù)方中藥合劑，研究其對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下生長性能和抗氧化活性的影響，旨在為該制劑的臨床推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品 復(fù)方中藥合劑由連翹、黃芪、板藍(lán)根、茯苓、白術(shù)、枳實(shí)、山楂、甘草8味中藥組成。連翹采用醇提法提取連翹提取物；白術(shù)、枳實(shí)采用蒸餾法提取揮發(fā)油，濾液與黃芪、茯苓、甘草、山楂、板藍(lán)根混合水煎2次，合并上述濾液濃縮至比重1.10（溫度60℃）、加入乙醇使其沉淀，濾過；濾液與連翹提取物混合，加入白術(shù)、枳實(shí)揮發(fā)油及吐溫-80，加入30%蔗糖，調(diào)節(jié)藥物濃度至1∶1，并調(diào)節(jié)pH值至中性，滅菌備用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì) 1日齡健康A(chǔ)A雄性肉仔雞，隔離飼養(yǎng)至7日齡，選取240只體重相近健康的肉仔雞，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞，分籠飼養(yǎng)。對(duì)照組正常飲水；試驗(yàn)1、2、3組從7日齡開始，飲水中分別添加0.5%、1.0%、1.5%的復(fù)方中藥合劑，連續(xù)用藥5周。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)雞采用兩階段四層籠養(yǎng)，24 h光照、自由采食、自由飲水。試驗(yàn)在高溫季節(jié)（7-8月份）進(jìn)行，并根據(jù)室內(nèi)溫度情況采用電暖器加溫，控制室內(nèi)溫度為33℃～36℃，濕度為70%～80%。整個(gè)飼養(yǎng)期分為1～21 d為前期；22～42 d為后期2個(gè)階段?；A(chǔ)日糧參照NRC（1994）肉仔雞營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制（見表1）。免疫程序：4組雞均在7日齡1倍量點(diǎn)眼滴鼻接種新城疫-傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗；14日齡1.5倍量滴口接種腔上囊病中等毒力偏弱疫苗；21日齡3倍量飲水接種新城疫-傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗；28日齡3倍量飲水接種腔上囊病中等毒力偏強(qiáng)疫苗。

1.4 生長性能測定 將所有1日齡雛雞以重復(fù)為單位稱重，并計(jì)算平均體重。于第21日齡和42日齡，稱重、結(jié)料，計(jì)算1～21日齡和22～42日齡的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）。

1.5 抗氧化指標(biāo)測定 于42日齡，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取2只雞，頸靜脈采血5mL，3 000 r/min離心10 min制備血清樣品，編號(hào)分裝。同時(shí)，將雞屠宰，分別取相同部位的胸肌及腿肌各50 g左右，編號(hào)，裝入塑料袋中；取肝臟，拭去表面血污后編號(hào)。血清、肌肉和肝臟樣品冷凍存放于-20℃待測。血清、肌肉和肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）及丙二醛(MDA)含量的測定均采用南京建成生物工程研究所研制的試劑盒，測定過程完全按照試劑盒說明書進(jìn)行。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧及營養(yǎng)成分

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0軟件中One-Way ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析，并進(jìn)行Duncan′s多重比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下生長性能的影響 由表2可知，在肉仔雞試驗(yàn)前期（1～21 d），各處理組間ADG、ADFI和FCR均無顯著性差異（P＞0.05）。試驗(yàn)后期（22～42 d），試驗(yàn)1、2組的ADG、ADFI和FCR均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)3組ADG、ADFI和FCR與對(duì)照組相比無顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞抗氧化水平的影響

由表3可知，試驗(yàn)1組肉仔雞血清中的SOD和GSH-Px均高于對(duì)照組，MDA含量低于對(duì)照組，但均無顯著性差異（P＞0.05）；試驗(yàn)2、3組肉仔雞血清中的SOD和GSH-Px均極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），MDA含量極顯著低于對(duì)照組（P＜0.01）。

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2、3組肉仔雞肝臟中的SOD顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）；試驗(yàn)2、3組肉仔雞肝臟中的GSH-Px顯著升高（P＜0.05）；試驗(yàn)2、3組肉仔雞肝臟中的MDA含量極顯著降低（P＜0.01）。

表2 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下生產(chǎn)性能的影響

表3 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下血清中抗氧化指標(biāo)的影響

表4 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔熱應(yīng)激下雞肝臟中抗氧化指標(biāo)的影響

表5 復(fù)方中藥合劑對(duì)肉仔雞熱應(yīng)激下肌肉中抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2、3組肉仔雞胸肌和腿肌中的SOD均極顯著升高（P＜0.01）；而胸肌和腿肌中的MDA含量各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

熱應(yīng)激可減弱雞消化道的蠕動(dòng)，降低消化道內(nèi)酶的活性，導(dǎo)致雞的采食量下降，增重減慢[8]；而且熱應(yīng)激可降低血清球蛋白水平，降低機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫水平，死淘率增加，給養(yǎng)雞生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在飲水中添加復(fù)方中藥合劑可增加熱應(yīng)激下肉仔雞的采食量，提高日增重和飼料利用率，尤其在試驗(yàn)后期效果較明顯。但飲水中添加量超過1.5%時(shí)對(duì)肉仔雞的采食量有一定影響，可能與所含藥物成分的適口性及藥性有關(guān)，有待于進(jìn)一步研究。

動(dòng)物機(jī)體內(nèi)在代謝過程中會(huì)產(chǎn)生一些氧自由基，攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用。SOD可清除動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的對(duì)細(xì)胞破壞力極強(qiáng)的氧自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，SOD活力間接地反映了機(jī)體清除氧自由基的能力。GSH-Px是機(jī)體內(nèi)催化還原過氧化氫的重要酶，能特異的催化還原型谷胱甘肽對(duì)過氧化氫的還原反應(yīng)，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。MDA是氧自由基引起的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)所產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物在機(jī)體內(nèi)代謝的終產(chǎn)物，細(xì)胞內(nèi)的MDA濃度是脂質(zhì)過氧化強(qiáng)度和膜系統(tǒng)傷害程度的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飲水中添加復(fù)方中藥合劑可提高肉仔雞血清、肝臟和肌肉中SOD活性，提高血清、肝臟中的GSH-Px活性，降低血清和肝臟中的MDA水平。

4 結(jié)論

飲水中添加復(fù)方中藥合劑，可提高熱應(yīng)激下肉仔雞的生長性能，增強(qiáng)機(jī)體清除自由基的能力，提高機(jī)體抗氧化水平。在實(shí)際生產(chǎn)中，為兼顧復(fù)方中藥合劑在肉仔雞熱應(yīng)激下的促生長和抗氧化兩方面的作用，建議在飲水中添加1.0%的劑量。

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