不同濃度的同源益生素對(duì)21日齡肉雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響

張玉仙，王文利，王金秋，曹 靜，陳耀星，王子旭

（1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，北京 房山102442；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀100193）

同源益生素是從肉雞腸道內(nèi)分離出來(lái)的一類活性微生物添加劑。研究表明[1]，益生素被畜禽采食后能在腸道發(fā)育、繁殖并可促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高飼料用利率，防止腹瀉，提高機(jī)體的抗病力，被認(rèn)為是一種多功能的綠色飼料添加劑。益生素具有無(wú)污染、抗病力強(qiáng)、安全性高、無(wú)耐藥性、無(wú)殘留、低成本等優(yōu)點(diǎn)且不會(huì)對(duì)人和動(dòng)物產(chǎn)生“三致現(xiàn)象”，可替代抗生素，被廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)[1]。

小腸不僅是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收重要場(chǎng)所，也具有重要的免疫屏障功能。良好的小腸黏膜結(jié)構(gòu)是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收和動(dòng)物正常生長(zhǎng)的生理基礎(chǔ)[2-4]。本試驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接懭庾须u飼料中添加不同劑量的益生素對(duì)肉仔雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響，也為益生素在肉雞飼養(yǎng)中應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物分組 1 500羽1日齡AA肉雞（公母半），由北京華都肉雞場(chǎng)提供，平均體重42.90±0.26 g。隨機(jī)分為5個(gè)組：對(duì)照組飼喂全價(jià)基礎(chǔ)日糧；試驗(yàn)1、2、3、4組，分別在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%同源益生素，每組設(shè)10個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30羽。試驗(yàn)期為21 d。飼養(yǎng)管理按照北京市地方標(biāo)準(zhǔn)DB23/T169-93肉雞飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程進(jìn)行。按照所在地的防疫部門制定的免疫程序進(jìn)行常規(guī)免疫。

1.2 益生素的來(lái)源 同源益生素菌種的來(lái)源是從肉雞腸道中篩選出的，采用現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)提純，配以相應(yīng)的載體，其中含芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌等多種益生菌，產(chǎn)品為棕色粉末，活菌數(shù)為20億CFU/g。

1.3 樣品處理 在試驗(yàn)第21天剖殺，迅速取十二指腸、空腸、回腸中段各2～3mm，浸入新配置的生理鹽水涮洗掉內(nèi)容物后，用40 g/L多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1mol/L，pH值7.4)固定48 h，常規(guī)石蠟包埋，制備連續(xù)橫斷切片10張（厚5um），常規(guī)蘇木精-伊紅（H.E.）染色。

1.4 測(cè)定項(xiàng)目

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo) 在試驗(yàn)開(kāi)始到結(jié)束稱重并記錄體重、耗料量，數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析進(jìn)行兩組間獨(dú)立樣本雙尾t檢驗(yàn)。

1.4.2 組織學(xué)指標(biāo) 經(jīng)H.E.染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察小腸的黏膜結(jié)構(gòu)。每段小腸取5張切片，每張切片選2～5個(gè)視野，應(yīng)用Moditec照相處理軟件拍照，每張照片測(cè)量5根最長(zhǎng)腸絨毛的長(zhǎng)度（以腸腺絨毛連接處到絨毛頂端為準(zhǔn)）、最深隱窩深度（以腸腺絨毛連接處到腸腺基部為準(zhǔn)）、黏膜厚度和腸壁厚度。所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)測(cè)量數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和多重比較。試驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（-X±S）表示。

2 結(jié)果

2.1 各組肉仔雞的體重變化情況 見(jiàn)表1。

表1 同源益生素對(duì)21日齡肉仔雞生產(chǎn)指標(biāo)的影響

從表1中可以看出，各組仔雞初生重沒(méi)有差異，平均體重42.90±0.26 g，飼喂21 d后，從整體來(lái)看各試驗(yàn)組在末重、日增重、料重比等方面都優(yōu)于對(duì)照組，而且是增重快，耗料量低。在5個(gè)試驗(yàn)組中0.3%組增重最快，顯著高于對(duì)照組，差異極顯著（P＜0.01），也顯著高于其他各組；料重比0.3%組在5個(gè)試驗(yàn)組中最低，說(shuō)明該組肉仔雞吃料少長(zhǎng)肉快。

2.2 腸黏膜上皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化 H.E.染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，5個(gè)試驗(yàn)組肉仔雞的腸黏膜結(jié)構(gòu)均完整，層次分明，腸黏膜上皮細(xì)胞的輪廓清晰，染色鮮明，排列規(guī)則，小腸腸絨毛頂端均無(wú)脫落現(xiàn)象。

2.3 小腸絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度和絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度比值的變化 見(jiàn)表2、3、4。

21日齡肉仔雞小腸絨毛從前至后，即從十二指腸、空腸至回腸，小腸絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度逐漸降低。從表2中可以看出在十二指腸黏膜結(jié)構(gòu)指標(biāo)方面，0.3%組在絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值（C/V值）等方面顯著優(yōu)于其他試驗(yàn)組，表明在肉雞飼料中添加益生素時(shí)0.3%的濃度最佳。從表3中可以看出在空腸黏膜結(jié)構(gòu)指標(biāo)方面，0.3%組在絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值（C/V值）等方面顯著優(yōu)于其他試驗(yàn)組，表明在肉雞飼料中添加益生素時(shí)0.3%的濃度最佳。從表4中可以看出在回腸黏膜結(jié)構(gòu)指標(biāo)方面，0.3%組極顯著高于對(duì)照組、0.2%組和0.4%組（P＜0.01）。在回腸V/C指標(biāo)方面，0.3%組極顯著地高于對(duì)照組和其他試驗(yàn)組（P＜0.01）。

表2 不同濃度的同源益生素對(duì)21日齡肉仔雞十二指腸的小腸絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值的影響

表3 不同濃度的同源益生素21日齡肉仔雞空腸的小腸絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值的影響

表4 不同濃度的同源益生素對(duì)21日齡肉仔雞回腸的小腸絨毛長(zhǎng)度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值的影響

3 討論與分析

3.1 不同劑量的同源益生素對(duì)肉仔雞體重增長(zhǎng)的影響 從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，試驗(yàn)采用的益生素是從肉仔雞腸道中提取的芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌等有益菌。其中芽孢桿菌是一種需氧菌，這給乳酸菌創(chuàng)造了一個(gè)缺氧的生長(zhǎng)環(huán)境，同時(shí)將淀粉轉(zhuǎn)化為單糖，供乳酸菌利用[9]。滑靜[10]等研究表明，枯草芽孢桿菌可以促進(jìn)肉仔雞體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂類的合成代謝，促進(jìn)骨骼和肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育，有利于促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。本試驗(yàn)是將不同濃度的同源益生素飼喂肉雞，結(jié)果表明，在肉仔雞飼料中添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的濃度均可提高肉仔雞的增重，提高飼料的利用率，降低料重比，但以0.3%濃度的效果最佳，取得的經(jīng)濟(jì)效益最高。

3.2 不同劑量的同源益生素對(duì)肉仔雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響 小腸的正常結(jié)構(gòu)與功能是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被充分消化與吸收的基本保證，特別是小腸的腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度、黏膜厚度及絨毛表面積是衡量小腸消化吸收功能的重要指標(biāo)[4-5]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，5個(gè)試驗(yàn)組肉仔雞腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，層次分明，腸黏膜上皮細(xì)胞的輪廓清晰，染色鮮明，排列規(guī)則，腸黏膜上皮無(wú)脫落現(xiàn)象，尤其在絨毛頂端。肉仔雞飼料中添加益生素后，小腸絨毛高度在十二指腸、空腸和回腸呈劑量依賴性增長(zhǎng)，且益生素組小腸絨毛高度高于對(duì)照組。其中，0.3%組腸絨毛高度、黏膜厚度、腸壁厚度在十二指腸、空腸和回腸極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）。小腸絨毛V/C比值在十二指腸呈劑量依賴性增長(zhǎng)，且0.3%組小腸絨毛V/C比值極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）。營(yíng)養(yǎng)生理學(xué)的研究也表明，絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度比值綜合反映小腸的功能狀況，比值下降表明消化吸收功能下降[6]。動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育受阻。本試驗(yàn)表明，益生素對(duì)肉仔雞小腸消化吸收有影響，0.3%的濃度影響較大，不同濃度均可增強(qiáng)肉雞小腸的消化吸收能力，使肉仔雞的生長(zhǎng)發(fā)育加快，但以0.3%益生素濃度最為合理，最能改善和維護(hù)肉仔雞小腸黏膜的正常結(jié)構(gòu)，最能提高肉仔雞小腸的消化吸收能力，而且日增重最明顯，耗料量最少，生長(zhǎng)發(fā)育最快，料重比最低，經(jīng)濟(jì)效益最高。

4 結(jié)論

4.1 在肉仔雞基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的同源益生素，從增重、耗料量、料重比、飼料報(bào)酬及經(jīng)濟(jì)效益分析結(jié)果看，在飼料中添加0.3%益生素效果最佳。

4.2 從21日齡肉仔雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)來(lái)看，0.3%組可使肉仔雞體重增加最多，使小腸的絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度及等指標(biāo)最大，消化吸收能力最強(qiáng)；所以在促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)時(shí)，0.3%的添加劑量最為合理。

4.3 從本試驗(yàn)來(lái)看，益生素雖然是由雞的腸道中分離的有益菌，但也不是添加的濃度越大越好，一定要適度，才能取得事半功倍的效果。

[1]李焰，許正金，洪楓.復(fù)合益生素在規(guī)?；怆u生產(chǎn)中的應(yīng)用效果觀察[J].中國(guó)家禽，2008，30（23）：55-56.

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[6]張玉仙，王文利，陳耀星，等.不同濃度的大蒜溶液對(duì)小鼠小腸黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞數(shù)量變化的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)雜志，2009，39（6）：42-45.

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[10]滑靜，郭玉琴，張淑萍，等.肉仔雞日糧中添加枯草芽孢桿菌對(duì)平均日增質(zhì)量和血液生化指標(biāo)的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)雜志，2003，33（2）：14-15.