結(jié)核蛋白芯片對肺結(jié)核及肺外結(jié)核的診斷價值

吳友根,劉紅兵，楊興萍，王軍，羅菊華

(攀枝花市第六人民醫(yī)院，四川攀枝花617023)

結(jié)核蛋白芯片對肺結(jié)核及肺外結(jié)核的診斷價值

吳友根,劉紅兵，楊興萍，王軍，羅菊華

(攀枝花市第六人民醫(yī)院，四川攀枝花617023)

目的探討結(jié)核蛋白芯片檢測對診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的價值。方法使用蛋白芯片系統(tǒng)檢測血清結(jié)核抗體的病例共4765例,其中肺結(jié)核334例,肺外結(jié)核83例,肺結(jié)核并肺外結(jié)核69例，非結(jié)核病4279例。我們采用的蛋白芯片包含了結(jié)核分枝桿菌(MTB)中5種成分，即ESAT-6、CFP10、LAM、38KD和16KD。結(jié)果334例肺結(jié)核中227例結(jié)核抗體陽性,83例肺外結(jié)核中50例陽性,69例肺結(jié)核并肺外結(jié)核中51例陽性，4279例非結(jié)核病797例陽性,結(jié)核蛋白芯片檢測肺結(jié)核的陽性率為67.96%,肺外結(jié)核的陽性率為60.24%,肺結(jié)核并肺外結(jié)核的陽性率為73.91%，非結(jié)核病的陽性率為18.62%。結(jié)論結(jié)核蛋白芯片是對肺結(jié)核及肺外結(jié)核的輔助診斷有重要價值。但在淋巴結(jié)結(jié)核、結(jié)核性胸膜炎中陽性率偏低,敏感性稍差。

結(jié)核蛋白芯片；肺結(jié)核；肺外結(jié)核；診斷價值

結(jié)核分枝桿菌不僅可引起肺結(jié)核，而且可引起肺外多種器官的感染。結(jié)核病是MTB感染引起的一種感染性疾病。全球已有1/3的人口，即約20億結(jié)核感染者[1]。在我國一些地區(qū)結(jié)核病已在感染性長期發(fā)熱的病因中上升至首位，其中肺外結(jié)核遠(yuǎn)較肺內(nèi)結(jié)核為多[2]。采用蛋白芯片技術(shù)檢測患者抗體的MTB中5種成分，為早期分泌性低分子量6KD抗原靶(ESAT-6)、培養(yǎng)濾液蛋白10 (CFP10)、脂阿拉伯甘露聚糖抗原(LAM)、結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群特異蛋白(38KD、16KD)。2009年12月至2014年4月，利用該技術(shù)進(jìn)行了臨床試驗，現(xiàn)將試驗報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源(1)結(jié)核組:選取我院感染科臨床表現(xiàn)、細(xì)菌學(xué)、影像學(xué)或抗結(jié)核治療有效而明確診斷的結(jié)核患者486例；其中肺結(jié)核334例；肺外結(jié)核83例(結(jié)核性胸膜炎29、淋巴結(jié)結(jié)核18例，骨結(jié)核19例，泌尿系結(jié)核8例，其他9例)；肺結(jié)核并肺外結(jié)核69例(含結(jié)核性胸膜炎46、淋巴結(jié)結(jié)核4例，骨結(jié)核7例，其他12例)。男320例，女166例，年齡1～84歲,平均年齡48歲。(2)非結(jié)核疾病組:選取我院非結(jié)核患者4279例(且以出院診斷為準(zhǔn)),男2539例，女1740例，年齡1月～94歲,平均年齡57歲。結(jié)核病患者中59例痰涂片查見抗酸桿菌，33例病理符合結(jié)核診斷。均抽取空腹血液5ml。所有研究對象均無HIV感染、妊娠、使用免疫抑制劑或增強(qiáng)劑。5種MTB復(fù)合群特異性的抗原來檢測待檢血清中的抗體,如果任一抗體檢測陽性,結(jié)果可判定為陽性,5種抗體檢測均為陰性,結(jié)果可判定為陰性。

1.1.2 儀器及試劑西安聯(lián)爾科技有限公司的配套儀器及相應(yīng)試劑盒。

1.2 檢測方法嚴(yán)格依照配套說明書進(jìn)行操作，結(jié)果由儀器自動判讀。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSSl0.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)核與非結(jié)核組患者的陽性率比較采用χ2檢驗，P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

4765例血清標(biāo)本MTB-IgG抗體的敏感性為67.49%(328/486),特異性為81.38%(3482/4279)。詳見表1、表2。

表1 結(jié)核蛋白芯片法檢測結(jié)核病人和對照組的結(jié)果

表2 83例單純肺外結(jié)核抗體蛋白芯片法結(jié)果

3 討論

輔助結(jié)核病診斷的蛋白芯片是近年來蛋白質(zhì)組學(xué)研究中興起的一種新方法，此技術(shù)是一高特異性、高通量、高靈敏度且微型化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)，朱同華[3]報告該方法診斷結(jié)核病的特異性96．5%，靈敏度為83.0%，因此，可用于結(jié)核病的快速診斷，特別是肺外結(jié)核及菌陰肺結(jié)核病的快速診斷，該技術(shù)為臨床診斷結(jié)核病起到了積極的作用。本研究淋巴結(jié)結(jié)核(均為手術(shù)病理診斷)、結(jié)核性胸膜炎抗體陽性率過低具體原因理論上不好解釋，可能是結(jié)核性胸膜炎等肺外結(jié)核并不都是由MTB感染所致的疾病，可能也包含部分非結(jié)核分枝桿菌(NTM)肺外疾病。李寧等[4]對283株分枝桿菌的菌型鑒定結(jié)果顯示，MTB占152株，NTM占131株，NTM占46.3%，應(yīng)該引起同行重視[4]。雖然目前診斷技術(shù)日益提高肺外結(jié)核在FUO病因診斷中仍是個難點(diǎn)，有文獻(xiàn)報告[5]FUO的肺外結(jié)核大多數(shù)是依靠診斷性抗結(jié)核治療確診，因此開展結(jié)核病診斷研究很有意義。如果將蛋白芯片抗體與張周云等[6]利用基因工程方法檢測患者血清中結(jié)核抗原相結(jié)合，筆者推測抗體與抗原聯(lián)合檢測，相互印證，更有利于結(jié)核病的診斷。本研究敏感性為67.49%,特異性為81.38%，P<0.01說明與對照組有顯著性差異，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1]葛均波,徐永健,梅長林,等.內(nèi)科學(xué)[M].第8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:61.

[2]陳灝珠,廖履坦,楊秉輝,等.實(shí)用內(nèi)科學(xué)[M].第12版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:782-786.

[3]朱同華.血清結(jié)核抗體蛋白芯片檢測與痰抗酸染色實(shí)驗室分析[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(5):492-496.

[4]李寧,伍嚴(yán)安,胡辛蘭,等.結(jié)核分枝桿菌的實(shí)驗室檢測方法學(xué)評價及耐藥情況分析[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(3):214-216.

[5]石秋萍,王超,徐定華,等.不明原因發(fā)熱372例臨床分析[J].中華內(nèi)科雜志,2014,53(4):298-302.

[6]張周云,熊國亮.探討ELISA法檢測血清結(jié)核桿菌抗原對肺結(jié)核病的診斷價值[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(6):537-538.

Clinical value of tuberculosis protein chip in diagnosis of pulmonary and extra pulmonary tuberculosis

WU Yougen,LIU Hongbing,YANG Xingping,et al.The Sixth People's Hospital of Panzhihua,Sichuan Panzhihua 617023，China

Objective To explore the diagnosis value of tuberculosis protein chip for pulmonary and extra pulmonary tuberculosis(TB).Methods The serum tuberculosis antibodies were detected by using protein chip system in 4765 cases,including 334 cases of pulmonary tuberculosis,83 cases of extra pulmonary tuberculosis,69 cases of pulmonary tuberculosis and extra pulmonary tuberculosis,4279 cases of non tuberculosis.The protein chip we used contain 5 components of Mycobacterium tuberculosis,namely ESAT-6、CFP10、LAM、38KD and 16KD.ResultsThe TB antibody was detected positive in 227 of 334 pulmonary TB cases，positive in 50 of 83 extra pulmonary TB cases,positive in 51 of 69 pulmonary TB and extra pulmonary TB cases,and positive in 797 of 4279 non-TB cases.The positive rate of detection of tuberculosis antibody using tuberculosis protein chip in pulmonary tuberculosis group was 67.96%.The positive rate in extra pulmonary tuberculosis group was 60.24%.The positive rate in pulmonary and extra pulmonary group was 73.91%.The positive rate in non-TB group was 18.62%.Conclusion The TB protein chip is a fast,easy and effective method for diagnosing the pulmonary TB and extra pulmonary TB with good specificity,but it is less sensitive in the diagnosis of lymphoid tuberculosis and tuberculous pleurisy.

Tuberculosis protein chip；Pulmonary tuberculosis；Extra pulmonary tuberculosis；Diagnostic value

R378.91+1

A

1674-1129(2014)05-0503-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.004

2014-04-14；

2014-07-07)

攀枝花市應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)項目(編號：2013CYS-16-10)

吳友根，1967年生，男，本科，主任醫(yī)師，主要從事傳染病臨床診治與醫(yī)療質(zhì)量。