淋巴管生成與惡性腫瘤關系的研究進展

孟翠翠，羅治彬

轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要生物學特征，淋巴結轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的重要途徑。淋巴管生成可以促進惡性腫瘤的淋巴結轉(zhuǎn)移，進一步促進惡性腫瘤的遠處轉(zhuǎn)移，此過程涉及復雜的分子調(diào)控機制。本文介紹了淋巴系統(tǒng)的構成、作用及胚胎時期淋巴管的生成，腫瘤淋巴管生成的分子調(diào)控機制，淋巴管生成促進腫瘤轉(zhuǎn)移的可能機制及抗腫瘤淋巴管生成治療的可能途徑。

1 淋巴系統(tǒng)及胚胎時期淋巴管的生成

淋巴系統(tǒng)是由淋巴管和淋巴器官組成的復雜網(wǎng)絡系統(tǒng)，在維持機體血液和組織液的平衡、保證機體的營養(yǎng)和氧氣供應、排泄代謝物等方面起著重要作用；同時形成機體的免疫系統(tǒng)，參與免疫反應。

淋巴管的生成在胚胎時期是非?；钴S的，在成年時期較少發(fā)生。胚胎時期的淋巴管是從頸靜脈出芽形成的。當一部分靜脈內(nèi)皮細胞開始表達同源異型核轉(zhuǎn)錄因子-1(Prox-1)時，原始的淋巴管囊即開始形成[1]。這些靜脈內(nèi)皮細胞在血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-C高梯度的指引下開始遷移，形成管狀結構[2]。Prox-1只是暫時性的表達在靜脈內(nèi)皮細胞，隨后淋巴內(nèi)皮細胞的分化是由轉(zhuǎn)錄因子Sox18、COUP-TFⅡ、miR-181和miR-31共同調(diào)控的[3-5]。

2 惡性腫瘤淋巴管生成的分子調(diào)控機制

人乳腺癌、胃癌、結直腸癌等前哨淋巴結的轉(zhuǎn)移往往是腫瘤轉(zhuǎn)移的第一步。腫瘤細胞從原發(fā)部位侵入淋巴管，轉(zhuǎn)移到前哨淋巴結，進而轉(zhuǎn)移到遠處淋巴結，隨血流播散到遠處器官。因此，淋巴管生成在腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。目前動物模型研究和臨床標本的檢測均提示乳腺癌[6]、胃癌[7]、頭頸部腫瘤[8]等多種惡性腫瘤中存在淋巴管生成。

腫瘤淋巴管生成，指從已經(jīng)存在的淋巴管出芽、增殖形成新的淋巴管，或者從循環(huán)中的淋巴內(nèi)皮祖細胞生成新的淋巴管。腫瘤細胞、腫瘤間質(zhì)細胞以及腫瘤微環(huán)境中浸潤的炎性細胞產(chǎn)生的細胞因子促進了瘤內(nèi)、瘤周淋巴管的生成。這些細胞因子中最重要的兩種淋巴管生成因子是VEGF-C[9]和VEGF-D[10]，其通過與淋巴內(nèi)皮細胞上的血管內(nèi)皮生長因子受體-3(VEGFR-3)結合，引起VEGFR-3二聚化、酪氨酸殘基磷酸化。磷酸化的VEGFR-3通過與接頭蛋白Shc、Grb2結合，激活Akt、JNK、Erk信號通路[11-12]，引起淋巴內(nèi)皮細胞的增殖、遷移、管狀結構的形成。P42/P44 MAPK信號通路也參與了VEGFR-3信號通路的激活[11]。其他與淋巴管生成有關的因子有胰島素樣生長因子-1、VEGF-A、環(huán)氧化酶-2、肝細胞生長因子、成纖維細胞生長因子-2、血小板源性生長因子、血管生成素-2等，其通過直接或間接的機制促進腫瘤淋巴管生成。

除了過表達的淋巴管生成因子促進腫瘤淋巴管生成外，重構在淋巴管生成過程中也起著一定作用。動物實驗顯示，敲除胰島細胞瘤鼠模型的神經(jīng)細胞黏附分子后，引起β1整合素介導的黏附消失，VEGF-C、VEGF-D表達上調(diào)，促進了淋巴管生成[13]。

3 淋巴管生成與腫瘤轉(zhuǎn)移機制

腫瘤淋巴管生成能促進腫瘤的淋巴管浸潤和淋巴結轉(zhuǎn)移。Da等[16]通過免疫組化方法檢測了68例原發(fā)性胃癌標本中環(huán)氧化酶-2、VEGF-C的表達情況，計數(shù)淋巴管密度，并分析其與臨床病理因素及患者生存時間的關系，結果顯示環(huán)氧化酶、VEGF-C的過表達與淋巴管浸潤及患者的不良預后有關。環(huán)氧化酶可能通過上調(diào)VEGF-C的表達，促進淋巴管生成及淋巴管浸潤。Schoppmann等[17]研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中過表達HER/neu與VEGF-C的表達密切相關，VEGF-C的過表達促進了淋巴管生成、淋巴管浸潤。抑制HER/neu表達可能能夠抑制VEGF-C介導的淋巴管生成，抑制腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。He等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在人肺癌裸鼠移植瘤模型中，淋巴轉(zhuǎn)移的發(fā)生與腫瘤淋巴管生成密切相關。淋巴結轉(zhuǎn)移的發(fā)生與淋巴管生成在同一時期，可溶性的VEGFR-3抗體可以抑制腫瘤淋巴管生成及淋巴結轉(zhuǎn)移。腫瘤細胞除了分泌淋巴管生成因子促進新的淋巴管生成外，腫瘤細胞分泌的VEGF-C還介導了淋巴管的擴張，促進了癌細胞叢引流入前哨淋巴結。

淋巴管生成能促進腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移，首先是因為腫瘤淋巴管本身的結構特點——淋巴內(nèi)皮細胞之間連接疏松，缺乏基底膜。其次是腫瘤淋巴管、腫瘤細胞表達的一些分子的改變，二者相互作用，促進了腫瘤細胞進入淋巴管。正常淋巴管內(nèi)皮細胞表達的淋巴細胞趨化因子CCL21，促進了趨化因子受體7(CCR7)+的樹突狀細胞的淋巴結歸巢。而在惡性黑色素瘤中，表達CCR7的腫瘤細胞向表達CCL21的淋巴內(nèi)皮細胞遷移，促進了腫瘤淋巴管浸潤，淋巴結轉(zhuǎn)移[19]。Nakata等[20]研究發(fā)現(xiàn)，CCR7的陽性表達與胰腺導管癌淋巴結轉(zhuǎn)移密切相關，多因素生存分析提示，CCR7是胰腺癌的獨立預后因素。趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在腫瘤細胞的淋巴轉(zhuǎn)移中也起著重要作用。Hirakawa等[21]研究發(fā)現(xiàn)在乳腺Paget病中，淋巴內(nèi)皮細胞表達的CXCL12可以促進表達CXCR4的腫瘤細胞侵入淋巴管，促進淋巴結轉(zhuǎn)移。

淋巴內(nèi)皮細胞表達的巨噬細胞甘露醇受體-1(MR1)也參與了腫瘤細胞的淋巴管轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細胞MR1的缺失使得腫瘤細胞與淋巴內(nèi)皮細胞之間的黏附性減弱，抑制了腫瘤細胞的淋巴管浸潤[22]。

炎性腫瘤微環(huán)境為腫瘤的淋巴管浸潤及淋巴結轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了有利條件。炎性腫瘤微環(huán)境中浸潤的細胞主要包括巨噬細胞、樹突狀細胞、中性粒細胞、肥大細胞等，還包括成纖維細胞、惡性腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞等。來源于這些細胞的炎癥刺激主要通過激活核因子κB(NF-κB)通路發(fā)揮作用。NF-κB可以誘導VEGF-C[23]、VEGF-A[24]的表達而促進腫瘤淋巴管生成。NF-κB介導了腫瘤壞死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-7、IL-8、環(huán)氧化酶等轉(zhuǎn)錄，通過間接機制上調(diào)VEGF-C、VEGF-D的表達，促進腫瘤淋巴管生成。NF-κB調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶、尿激酶的活性，降解細胞外基質(zhì)，同時使得VEGF-C、VEGF-D裂解為成熟形式，增加與VEGFR-3受體結合而促進腫瘤淋巴管生成[25]。腫瘤微環(huán)境的改變增加了腫瘤細胞與淋巴管的接觸機會，促進腫瘤淋巴管播散和轉(zhuǎn)移發(fā)生。

淋巴結淋巴管生成進一步促進了腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。在腫瘤細胞轉(zhuǎn)移至淋巴結前，引流淋巴結部位即可以生成新的淋巴管，這種淋巴管生成過程不依賴于腫瘤原發(fā)部位的淋巴管生成。引流淋巴結部位聚集的B細胞通過分泌VEGF-A促進了淋巴結淋巴管生成[26]。進一步引起更多的淋巴液及惡性腫瘤細胞進入淋巴結區(qū)域，淋巴結區(qū)域腫瘤微環(huán)境的改變，也為腫瘤的生長提供有利條件，進而促進腫瘤的生長及遠處淋巴結的轉(zhuǎn)移。

4 淋巴管生成與癌癥治療

淋巴管生成促進腫瘤淋巴管浸潤，淋巴轉(zhuǎn)移。因此，抗腫瘤淋巴管生成治療或許可以有效抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移播散?？赡艿姆椒ㄓ幸种茀⑴c淋巴管生成主要的信號通路，如VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3。抑制促進腫瘤淋巴管浸潤的配體·受體，如CXCL12·CXCR4、CCL21·CCR7。抑制促淋巴管生成的其他因子如炎性遞質(zhì)等。途徑包括藥物干預、RNAi技術、VEGFR-3單抗。黃國民等[27]利用RNAi技術，抑制淋巴管生成因子環(huán)氧化酶-2的表達，從而抑制了胃癌裸鼠移植瘤的生長，降低了VEGF-C的表達及淋巴管密度。在胃癌裸鼠移植瘤模型中，環(huán)氧化酶-2抑制劑依托度酸通過抑制腫瘤淋巴管生成，抑制了胃癌淋巴結轉(zhuǎn)移[28]。

腫瘤淋巴管生成是一個復雜的過程，單一抑制某一種因子或者某一條通路或許效果有限[29]；淋巴管已經(jīng)形成、前哨淋巴結微轉(zhuǎn)移已經(jīng)發(fā)生時，抗轉(zhuǎn)移治療效果甚微?？沽馨凸苌芍委煈糜谂R床還需要臨床試驗的驗證。抗腫瘤淋巴管生成治療與放化療的聯(lián)合效果有待進一步的研究。希望隨著研究的深入，抗腫瘤淋巴管生成治療會如抗腫瘤血管生成治療一樣，很好地服務于臨床。

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