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    血液標本中分離到1株非脫羧勒克菌

    2014-02-08 03:06:23梁炯芳孫龍高峰平
    實驗與檢驗醫(yī)學 2014年3期
    關鍵詞:勒克脫羧酶革蘭

    梁炯芳,孫龍,高峰平

    (武警浙江總隊杭州醫(yī)院,浙江杭州310051)

    血液標本中分離到1株非脫羧勒克菌

    梁炯芳,孫龍,高峰平

    (武警浙江總隊杭州醫(yī)院,浙江杭州310051)

    血液標本;非脫羧勒克菌;感染

    非脫羧勒克菌是一群氧化酶陰性,革蘭陰性小桿菌,被認為是罕見的引起腸道外感染的條件致病菌.于1986年Tamura等提出歸屬萊克菌屬[1],非脫羧勒克菌是其唯一的一個種.臨床培養(yǎng)出此類細菌少見,其引起的血流感染少有報道,我們從1例腦炎患者血液中分離到1株非脫羧勒克菌現(xiàn)報告如下.

    1 病例簡介

    患者男性,19歲.四月前突發(fā)高熱,最高體溫40℃,伴頭暈昏迷及大小便失禁.于省中醫(yī)院住院,查頭顱MRI示右側顳葉可疑團片狀異常信號,雙側碟竇及右側篩竇異常信號,考慮"病毒性腦膜腦炎"抗病毒等對癥治療.一個星期后,因肺部感染加重,呼吸衰竭轉入ICU,行氣管插管,呼吸機輔助呼吸,同時抗感染治療.病情無好轉,一個月后轉入浙醫(yī)一附院,查胸部CT提示右肺感染伴右下肺部分實變,仍反復抽搐.予以哌拉西林/他唑巴坦控制肺炎,同時控制癲癇、營養(yǎng)神經(jīng)、降顱壓治療.患者病情好轉、意識轉清、肺部炎癥減輕,現(xiàn)為進一步康復治療收治我院.查體:入院血壓133/ 87mmHg,體溫37.1℃,脈搏70次/分、頸強直、氣管切開.心臟聽診無明顯異常,兩肺炎癥,呼吸音粗,伴有痰鳴音,痰液多次培養(yǎng)銅綠假單胞菌.入院后,予以抗感染、控制癲癇及高壓氧康復治療.11月25日夜間出現(xiàn)畏寒發(fā)熱最高體溫39.3℃,急查血常規(guī):WBC9.3X109/L,NE%0.566,CRP20.2mg/L,予安滅菌1.2gq8h靜滴抗炎,同時抽血培養(yǎng)送檢,經(jīng)鑒定血培養(yǎng)(雙側雙瓶)均檢出非脫羧勒克菌.27日病人仍畏寒高熱體溫40℃,查WBC7.2X109/L, NE%0.867,CRP97.9mg/L.停用安滅菌改用頭孢他啶2.0Q12H靜滴抗炎.考慮導管相關性血流感染,拔出PICC管,同時送導管末端培養(yǎng)也檢出非脫羧勒克菌.30日患者體溫正常,無明顯咳嗽咳痰,12月3日停用抗生素.后續(xù)康復治療,患者四肢震顫較前好轉,雙肺呼吸音粗,未及明顯干濕啰音,病情好轉半月后出院.

    2 實驗室檢查

    2.1 試劑與儀器哥倫比亞血瓊脂平板、MH干粉購自法國生物梅里埃公司;BACTEC 9120血培養(yǎng)儀、BD phoenix 100全自動細菌鑒定藥敏分析儀均購自美國BD公司;革蘭染色液購自珠海貝索生物技術有限公司;藥敏紙片購自杭州天和微生物試劑有限公司.

    2.2 細菌培養(yǎng)及藥敏取陽性血培養(yǎng)增菌液離心涂片革蘭染色,鏡檢為革蘭陰性短小桿菌,見圖1.轉種哥倫比亞血平板35℃孵育24h后,長出圓形、突起、濕潤、光滑、黃色、中等大小菌落,見圖2.用phoenix 100全自動細菌鑒定藥敏分析儀行細菌鑒定及藥敏試驗.同時用K-B法檢測13種抗菌藥物的敏感性.藥敏結果判讀參照2012年美國臨床與實驗室標準協(xié)會(CLSI)的解釋標準[2].

    圖1 光鏡下見革蘭陰性短小桿菌、單個排列(革蘭染色X1000)

    圖2 哥倫比亞血平板35℃孵育24h菌落形態(tài)

    2.3 細菌鑒定及藥敏結果全自動細菌鑒定提示99%鑒定符合率.生化反應為氧化酶、精氨酸雙水解酶、賴氨酸脫羧酶、尿酶、鳥氨酸脫羧酶、脂肪酶、山梨醇、V-P、枸櫞酸鹽、硫化氫等試驗陰性.觸酶、葡萄糖、核糖醇、甘露醇、果糖、蜜二糖、半乳糖苷酶、阿拉伯糖、七葉苷、鼠李糖、半乳糖、甲基紅,木糖均為陽性.藥敏結果MIC法及K-B法均提示阿米卡星、慶大霉素、亞胺培南、頭孢唑林、頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星均敏感,復方新諾明耐藥.

    3 討論

    萊克勒菌最早于1962年被發(fā)現(xiàn)[3],由于生化特性與大腸埃希菌相近,曾命名為不脫羧埃希菌(Escherichia adecarboxylata),直到1986年才被確定為萊克菌屬[1,4].分離自人類的非脫羧勒克菌,多數(shù)來自血液、尿液等無菌體液,少數(shù)來自痰、傷口分泌物,該菌可引起食物中毒,文獻報道腹瀉患者糞便中可查見該菌.國內(nèi)蔡妙英等[5]報道腹瀉患者糞便檢出3株非脫羧勒克菌.趙卓等[6]報告11株非脫羧勒克菌,8株來自腹瀉便.吳堯蘭等[7]報告腹膜透析液中檢出該菌.國外學者從血液、膽囊組織、腹膜透析液、尿液中分離出非脫羧勒克菌[8,9].非脫羧勒克菌對多數(shù)抗生素敏感,但國外已有從血液中分離出產(chǎn)SHV-12型產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶非脫羧勒克菌的報告[10].國內(nèi)也有該菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的報道[11].本例患者發(fā)熱,最初應用阿莫西林/克拉維酸抗炎治療效果不佳,但藥敏結果提示為敏感.考慮患者有PICC管,不能排除導管相關性血流感染,經(jīng)培養(yǎng)證實血液中及導管末端均檢出該菌.后改用頭孢他啶抗炎治療同時拔除PICC管,病人體溫恢復正常炎癥減輕.提示抗感染治療時要及時發(fā)現(xiàn)及消除潛在感染源,否則單純抗感染藥物治療難以達到滿意效果.

    非脫羧勒克菌鑒別時易與腸桿菌屬混淆,其與大腸埃希菌生化反應相似,兩者主要區(qū)別在于精氨酸雙水解酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶前者陰性后者陽性,同時非脫羧勒克菌通常產(chǎn)不擴散黃色素,故菌落偏黃.DNA同源性分析大腸埃希菌與非脫羧勒克菌同源性僅有7.5%~29.1%.

    綜上所述,通過對該病例的報道和分析,希望能增加臨床微生物工作者對非脫羧勒克菌引起血流感染的認識,并提高對該菌的鑒定準確率.

    [1]Tamura K,Sakazaki R,Kosako Y,et a1.Isolation from Gen.Nov., Comb.Nov.formerlyknown asEscherichiaadecarboxylata, Current Microbiology[J].1986,13(14):179-184.

    [2]Clinical and Laboratory Standards Instiute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Twenty-Second Informational Supplement[S].CLSI document M100-S22.Wayne,PA:CLSI, 2012.

    [3]Leelere H.Biochemical study of pigmented Enterobacteriaceae[J]. Ann Inst Pasteur(Paris),1962,102:726-741.

    [4]陳東科,孫長貴.實用臨床微生物學檢驗與圖譜[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:367-368.

    [5]蔡妙英,楊伏署.我國腹瀉患者糞中非脫羧勒克氏菌的分離與鑒定[J].微生物學報,1992,32:119-123.

    [6]趙卓,郭軍巧,何丹江,等.非脫羧勒克氏菌的分離鑒定及致病性研究[J].中國公共衛(wèi)生,1996,12(3):111-112.

    [7]吳堯蘭,許俏梅.腹膜透析液中檢出非脫羧勒克菌1例[J].臨床檢驗雜志,2011,29(6):436.

    [8]Daza RM,Iborra J,Alonso N,et al.Isolation of Leclercia adecarboxylata in a cirrhotic patient[J].Enferm Infecc MicrobiolClin, 1993,11(1):53-54.

    [9]Stock I,Burak S,Wiedemann B.Natural antimicrobial susceptibility patterns and biochemical profiles of Leclerciaadecarboxylata strains[J].Clin Microbiol Infect,2004,10(8):724-733.

    [10]Mazzariol A,Zuliani J,Fontana R,et al.Isolation from Blood Culture of a Leclercia adecarboxylata strain producing an SHV-12 extended-spectrum beta-lactamase[J].J Clin Micrbiol,2003,41(4): 1738-1739.

    [11]張勇昌,陳月星,賴偉忠,等.醫(yī)院感染非脫羧勒克菌的分離結果及耐藥性分析[J].廣西醫(yī)學,2013,35(9):1247-1248.

    R446.5

    B

    1674-1129(2014)03-0361-02

    10.3969/j.issn.1674-1129.2014.03.056

    2014-03-17;

    2014-04-22)

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