iQTM-200尿液分析工作站在尿紅細胞檢測中的應(yīng)用

鐘蘭香，馮霞

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢測中心，江蘇 揚州225001)

尿沉渣檢查是尿液常規(guī)分析的重要組成部分，對腎臟、泌尿道及循環(huán)系統(tǒng)疾病有重要的診斷價值和鑒別診斷價值，其中尿紅細胞是最重要也是最常見的病理指標(biāo)之一，其檢測方法有干化學(xué)法、尿有形成分分析儀法及顯微鏡檢查(鏡檢)等。iQTM-200尿液分析工作站是由AUTION MAX AX-4280尿液干化學(xué)分析儀聯(lián)合iQ-200全自動尿有形成分分析儀(iQ-200)構(gòu)成，實現(xiàn)了尿干化和有形成分分析的一體化和全自動化，本文通過分析人工鏡檢方法測定的尿紅細胞結(jié)果和iQTM-200尿液分析工作站檢測尿紅細胞結(jié)果的差異，探討iQTM-200尿液分析工作站在尿紅細胞檢測中的價值，并為尿紅細胞的復(fù)檢提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 隨機選取本院門診、住院患者尿液2012例，男943例，女1069例，年齡1~87歲。

1.2 儀器與試劑 AUTION MAX AX-4280及配套試劑 (日本ARKRAY有限公司生產(chǎn))；iQ-200及配套試劑 (美國IRIS公司生產(chǎn))；離心機；Leica顯微鏡；10ml刻度尿沉渣離心管。

1.3 方法 AX-4280進行日常質(zhì)控，iQ-200按照儀器操作規(guī)程進行日常的焦距(FOCUS)調(diào)焦操作和質(zhì)控(陰性和陽性質(zhì)控)，質(zhì)控均在控后將留取的尿液標(biāo)本先按照iQTM-200尿液分析工作站操作說明進行檢測，再按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[1]進行顯微鏡檢，由熟練操作者在2h內(nèi)完成。

1.4 結(jié)果判讀 AX-4280尿干化學(xué)分析儀參考值由日本ARKRAY有限公司提供，尿紅細胞(BLD)以1+及以上為陽性 (1+相當(dāng)于20/μl個紅細胞)，iQ-200全自動尿有形成分分析儀參考值由IRIS公司提供，紅細胞(RBC)≤17/μl，超出為陽性，顯微鏡檢按RBC≤3/HP，超出為陽性。

1.5 統(tǒng)計方法 統(tǒng)計分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，對3種方法的檢測結(jié)果用χ2檢驗比較,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種方法的RBC檢出率 2012份標(biāo)本中儀器法尿干化、iQ-200尿有形成分檢測(儀器法)及顯微鏡法對尿紅細胞的檢出率分別是29.3%、23.5%、24.2%，以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn)，尿干化與鏡檢紅細胞陽性檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，儀器法與鏡檢紅細胞陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

2.2 不同條件下RBC檢測的假陰性率、假陽性率以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn),儀器法檢測紅細胞的假陰性率為10.5%，假陽性率為2.4%，AX-4280尿干化檢測紅細胞的假陰性率為13.3%，假陽性率為11.0%，尿干化學(xué)和顯微鏡檢尿紅細胞結(jié)果符合率是85.0%，儀器法尿紅細胞檢測和顯微鏡檢尿紅細胞結(jié)果符合率是90.7%。比較不同尿比重(SG)、BLD及不同性別條件下,儀器法與鏡檢紅細胞結(jié)果差異見表1。

表1 儀器法與鏡檢法在不同SG、BLD及不同性別時檢測尿紅細胞結(jié)果比較

2.3 綜合SG、BLD和性別三因素，RBC檢測的假陰性率、假陽性率 以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn),比較相同SG、BLD不同性別條件下，儀器法與鏡檢紅細胞結(jié)果差異見表2。

表2 相同SG、BLD不同性別時儀器法與鏡檢尿紅細胞結(jié)果比較

3 討論

AX-4280尿液干化分析儀采用血紅蛋白類過氧化酶法，測定尿液中游離的血紅蛋白，但如果尿中含有肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或細菌均可導(dǎo)致假陽性的出現(xiàn)，如果尿液中存在大量維生素C或其他還原性物質(zhì)，可競爭性抑制氧化反應(yīng)而產(chǎn)生假陰性，這使尿液紅細胞沉渣和干化檢查結(jié)果出現(xiàn)一定程度的不一致，符合率僅85.0%。本次數(shù)據(jù)收集中尿干化出現(xiàn)較高的假陰性率與判斷標(biāo)準(zhǔn)也有一定關(guān)系，BLD為1+時紅細胞約為20/μl，接近尿沉渣的紅細胞正常值 (17/μl)，所以以BLD1+及以上為陽性，而部分BLD±未計在內(nèi)，如果將其計在陽性范圍內(nèi)，假陰性率降低，假陽性率會增高，如尿液中的紅細胞新鮮完整，試紙上BLD區(qū)顯示斑點樣，AX-4280尿儀會判讀為±或-，引起假陰性。Hoffmann P等也報道尿干化紅細胞檢測出現(xiàn)一定的假陰性率和假陽性率[2]，這是受反應(yīng)原理所限。

iQ-200尿有形成分分析儀采用了美國國際遙感圖像系統(tǒng) (IRIS)公司創(chuàng)建的尿沉渣分析最新技術(shù),它主要特點是應(yīng)用高速頻閃光源和電視攝像的光學(xué)系統(tǒng),根據(jù)動力學(xué)原理,在與CCD攝像機相連的顯微鏡下,對每個待測標(biāo)本進行流動檢測,攝像機對每個樣品捕捉500幀,并送到分析處理器,通過自動微粒識別軟件對每幀中的各個微粒影像加以區(qū)別[3]。由于尿液成分的復(fù)雜，儀器法檢測紅細胞易受尿液中的結(jié)晶、霉菌[4，5]的影響而出現(xiàn)假陽性，但其軟件的優(yōu)點是提供定量結(jié)果的同時將圖像儲存在屏幕上以供觀察，對可疑成分可任意選取進行人工復(fù)核，這大大降低紅細胞檢測的假陽性率，使儀器檢測與顯微鏡檢紅細胞的符合率從高淑芳等報道的73.6%[6]增高到90.7%，謝文鋒等[7]也報道iQ-200修正后的RBC與人工鏡檢結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

顯微鏡檢雖是尿液沉渣分析的金標(biāo)準(zhǔn)，也有其無法克服的缺點，如離心使細胞破壞、變形，不能檢測已溶解破壞的紅細胞,不同操作人員識別水平及判別標(biāo)準(zhǔn)的差異，可能造成診斷的假陰性,當(dāng)鏡檢紅細胞正常，與干化不符且臨床懷疑有出血時可用單克隆抗體免疫法檢查尿液紅細胞[8]，以確保不漏檢。本文以SG(因低比重尿RBC會溶解)、BLD(與RBC有很大的相關(guān)性)、性別(生理解剖特征不同)三因素探討iQTM-200尿液分析工作站和手工鏡檢尿RBC的差異。結(jié)果顯示，在不同的SG時，儀器法檢測結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義；男性尿RBC儀器法與鏡檢結(jié)果的一致性高于女性；在鏡檢陰性、BLD陰性時，儀器法的尿RBC假陽性率女性大于男性(P<0.05)，而鏡檢陰性、BLD陽性時，儀器法的尿RBC假陽性率男性大于女性，這可能與不同性別中尿液中有形成分的差異及尿液有形成分分析儀的識別能力、不同工作人員的細胞識別能力有關(guān)；在鏡檢陽性時，不同的SG、BLD時儀器法假陰性率不同，說明在儀器尿液分析中SG也是一個影響因素，因多數(shù)尿液標(biāo)本的SG均正常，SG無法細分，無法探討低滲、高滲尿液儀器分析的不正確率是本次研究的不足之處；表2中有多項無法統(tǒng)計，主要是這幾種模式的少見，從側(cè)面反映了iQ-200與手工鏡檢的高一致性90.7%。有些儀器法的陰性結(jié)果受它的原理和技術(shù)所限，將其分辨不清的細胞全都歸入未分類細胞中，這就要求工作人員不斷提高對不同細胞在屏幕上的識別能力，進一步提高儀器法與手工鏡檢的一致性，但由于尿液成分的復(fù)雜，儀器法不能完全替代顯微鏡檢。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,等.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第 3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:294.

[2]Hoffmann P,Hoffmanna C,Ziebig R,et al.Evaluation of the iChem VelocityTMurine chemistry analyzer in a hospital routine laboratory[J].Clin Chem Lab Med,2011,49(3):509-513.

[3]Deindoerfe FH,Gangwer JR,Laird CW,et al.“The Yellow IRISTM” urinalysis workstation-the first commercial application of “automated intelligent microscopy”[J].Clin Chem,1985,31 (9):1491-1493.

[4]梁騎,李君安,王東生,等.四種全自動尿沉渣分析儀對尿液中紅細胞和白細胞的檢測性能研究 [J].中國全科醫(yī)學(xué)，2012，15(32):3737-3742.

[5]劉旗,王明麗,徐笑紅.菌尿?qū)Q-200尿液分析儀測定尿紅細胞的影響[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2008,26(3)326-327.

[6]高淑芳,張雪清,陸波,等.人工鏡檢與科寶XS全自動尿沉渣分析儀及IQ 200尿沉渣分析儀的比較和評價[J].檢驗醫(yī)學(xué),2011,26(4):231-234.

[7]謝文鋒,林川,嚴(yán)海燕,等.IRIS iQ200與 Sysmex UF-1000i自動尿沉渣分析儀檢測尿液紅、白細胞的性能評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2010,28(6):595-596,612.

[8]叢玉隆,馬駿龍.幾種檢測尿紅細胞方法的價值與互補關(guān)系[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2002,25(5):263-264.