麩炒對(duì)盤(pán)龍七中巖白菜素含量的影響

馮永輝 譚汗青

（西安醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，西安，710021）

麩炒對(duì)盤(pán)龍七中巖白菜素含量的影響

馮永輝 譚汗青

（西安醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，西安，710021）

目的：考察盤(pán)龍七麩炒前后巖白菜素的含量變化。方法：采用HPLC法測(cè)定盤(pán)龍七麩炒前后巖白菜素的含量，色譜柱：UltisilTMXB-C18柱（150mm×10mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇∶水（32∶68）；流速1.0mL/min；柱溫為室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm。進(jìn)樣量：20μL。結(jié)果：盤(pán)龍七麩炒前所測(cè)巖白菜素平均含量為16.82 mg/g；盤(pán)龍七麩炒后所測(cè)巖白菜素的平均含量為22.15 mg/g。結(jié)論：麩炒后盤(pán)龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤(pán)龍七，麩炒盤(pán)龍七可以提高其治療效果。

麩炒；盤(pán)龍七；巖白菜素

盤(pán)龍七為虎耳草科植物秦嶺巖白菜（Bergenia scopulosa T.P.Wang）的干燥根莖［1］，為陜西地區(qū)民間用藥，主要分布于秦嶺太白山、柞水、長(zhǎng)安太平峪等地方，廣泛用于脾胃病。其味甘、微澀。性平。歸肺、脾、肝、膀胱經(jīng)。功能補(bǔ)脾益胃，收澀固腸，除濕利水，活血，用于脘腹脹痛，水腫，崩漏，白帶，淋癥，痢疾，黃水瘡，禿瘡，疥癬［2-4］。盤(pán)龍七主要有效成分為巖白菜素，巖白菜素具止咳作用，已有藥品“巖白菜素”出售［5-6］。巖白菜素口服無(wú)毒，對(duì)咳嗽中樞有選擇性抑制，具有鎮(zhèn)痛抗炎，提高免疫，抗氧化性的作用［7-8］。筆者研究了不同采收期盤(pán)龍七中巖白菜素的含量變化［9］，確定出盤(pán)龍七最佳采收期，建立盤(pán)龍七中多糖的含量測(cè)定方法［10］，同時(shí)制定了盤(pán)龍七的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，研究中筆者發(fā)現(xiàn)盤(pán)龍七傳統(tǒng)炮制中采用麩炒法，但關(guān)于其麩炒機(jī)制尚不明確。查文獻(xiàn)知，迄今為止，尚未有報(bào)道麩炒對(duì)盤(pán)龍七中有效成分巖白菜含量的相關(guān)報(bào)道，我們采用HPLC法分別測(cè)定麩炒盤(pán)龍七前后巖白菜素的含量［11-13］，來(lái)分析比較麩炒是否對(duì)巖白菜素的含量有影響，旨在考察盤(pán)龍七麩炒前后巖白菜素的含量變化，進(jìn)一步闡明麩炒盤(pán)龍七的機(jī)制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 安捷倫高1220效液相色譜儀，UV—170紫外檢測(cè)器；超聲波儀器清洗儀（型號(hào)：KQ5200DE）；十萬(wàn)分之一電子天平（Q/SYDLKOO5-2012）；純水制備儀（型號(hào)：Scienetool R300）。

1.2 試藥 巖白菜素對(duì)照品（批號(hào)：MUST-12030102生產(chǎn)廠家：北京恒元啟天技術(shù)研究院和京世紀(jì)奧科生物技術(shù)有限公司聯(lián)合研制）；盤(pán)龍七藥材采自秦嶺太白山，經(jīng)陜西省食品藥品檢驗(yàn)所郭耀武主任藥師鑒定為Bergenia scopulosaT.P.Wang的干燥根莖。甲醇（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)）為色譜純，水為超純水，提取盤(pán)龍七所用甲醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：UltisilTMXB-C18柱（150 mm ×10 mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇：水（32∶68）；流量1.0 m L/min；柱溫為室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm。樣品及對(duì)照品進(jìn)樣量20μL，理論塔板數(shù)不低于4 500。在上述色譜條件下，對(duì)照品有較好的峰型；樣品中巖白菜素和其他雜質(zhì)有較好的分離。見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱(chēng)取巖白菜素對(duì)照品9.00 mg，置50 m L容量瓶中，加甲醇溶解并稀至刻度，搖勻，制成0.18 mg/mL的溶液，作為巖白菜素的對(duì)照溶液。

2.2.2 供試品溶液制備

2.2.2.1 生品盤(pán)龍七供試品溶液制備 稱(chēng)取7 g盤(pán)龍七，粉碎，過(guò)20目篩。精密稱(chēng)定粉末0.203 2 g，以4倍的甲醇超聲提取30 min，離心（3 000 r/min），取上清液，容至50 m L容量瓶中，作為供試品1。

2.2.2.2 麩炒盤(pán)龍七供試品溶液制備 稱(chēng)取7 g盤(pán)龍七，將鐵鍋預(yù)熱，均勻撒入麥麩，待起煙，將稱(chēng)量好的藥材加入其中，不斷攪拌，文火炒10 min，至藥物表面呈黃色至深黃色，出鍋，篩去麥麩，放涼［14］。粉碎，過(guò)20目篩。精密稱(chēng)定麩炒藥材粉末0.205 2 g，以4倍的甲醇超聲提取30 min［15］，離心（3 000 r/min），取上清液，容至50 mL容量瓶中，作為供試品2。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 線性關(guān)系 精密量取對(duì)照品溶液1，2，3，4，5 m L至10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得。取上述對(duì)照品溶液20μL過(guò)0.45μm濾膜，按上述色譜條件，分別進(jìn)樣測(cè)定。以濃度為橫坐標(biāo)（x），峰面積為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得巖白菜素回歸方程（圖2），表明線性關(guān)系良好。

圖2 線性關(guān)系圖

2.3.2 精密度試驗(yàn) 精密量取巖白菜素對(duì)照品溶液20μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得巖白菜素對(duì)照品峰面積的RSD為1.6%，表明精密度良好。

2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜供試品溶液，分別在0，2，4，8，12，24 h各進(jìn)樣20μL，分別測(cè)定2組供試品在不同時(shí)間段的峰面積的RSD，麩炒品的RSD為0.17%，生品的RSD為0.13%，結(jié)果表明，樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

2.3.4 重復(fù)性試驗(yàn) 精密量取麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜按供試品溶液的制備方法制的溶液，平行操作5次，測(cè)得峰面積RSD，麩炒品的RSD為0.18%，生品的RSD為0.12%，結(jié)果表明，具有良好的重復(fù)性。

2.3.5 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取以測(cè)的含量的上述以配好的麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜樣品各3份，分別加入對(duì)照品，進(jìn)行回收率試驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表1、表2，表明加樣回收率良好。

2.4 結(jié)果 樣品含量測(cè)定：以色譜峰面積（y）對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液巖白菜素濃度（x）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：y＝11 503x+88.17，r＝0.998 8，巖白菜素在0.02～0.10 mg/mL之間與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。精密量取麩炒盤(pán)龍七和生品盤(pán)龍七供試品溶液，各分3組，分別進(jìn)樣20μL，經(jīng)計(jì)算得，麩炒盤(pán)龍七中巖白菜素的平均含量為22.15 mg/g，生品盤(pán)龍七中巖白菜素的平均含量為16.82 mg/g。結(jié)果表明，麩炒后盤(pán)龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤(pán)龍七。

表1 麩炒盤(pán)龍七加樣回收率試驗(yàn)（n＝3）

表2 生品盤(pán)龍七加樣回收率試驗(yàn)（n＝3）

3 討論

3.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 查閱文獻(xiàn)，巖白菜素的檢測(cè)波長(zhǎng)在275 nm處有最大吸收峰［16］，經(jīng)對(duì)巖白素在UV200～400 nm掃描，發(fā)現(xiàn)巖白菜素在275 nm處有最大吸收峰，故選擇275 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 超聲提取時(shí)間的選擇 本實(shí)驗(yàn)分別考察了在超聲20、30、40、60 min的提取率，結(jié)果在20 min提取率不完全，在30、40、60 min提取率所測(cè)值基本一致。故選擇超聲提取30 min。

3.3 麩炒盤(pán)龍七后巖白菜素含量提高的原因分析巖白菜素，沸點(diǎn)236～238℃，從理論上講麩炒不會(huì)影響巖白菜素的提取率，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明麩炒盤(pán)龍七后巖白菜素含量提高，其原因可能是：1）麩炒后盤(pán)龍七藥材水分含量降低，可能導(dǎo)致巖白菜素含量偏高；2）麩炒后可能破壞盤(pán)龍七細(xì)胞壁，從而影響其多糖成分、揮發(fā)油等化學(xué)成分發(fā)生變化，從而可能改變巖白菜素的提取率，導(dǎo)致麩炒后所測(cè)盤(pán)龍七中巖白菜素含量偏高［17］。關(guān)于傳統(tǒng)炮制方法采用麩炒法炮制盤(pán)龍七的機(jī)制還有待于進(jìn)一步深入研究。

4 結(jié)論

麩炒后盤(pán)龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤(pán)龍七，麩炒盤(pán)龍七可以提高其治療效果。本文通過(guò)HPLC法對(duì)盤(pán)龍七麩炒前后巖白菜素的含量進(jìn)行對(duì)比測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)麩炒后盤(pán)龍七中巖白菜素的含量相對(duì)較高，因而麩炒盤(pán)龍七后可以提高其治療效果。

盤(pán)龍七功能補(bǔ)脾益胃，收澀固腸，民間廣泛使用于脾胃病。傳統(tǒng)認(rèn)為，麩炒能夠緩和藥性，能夠增強(qiáng)藥物健脾和中的功能［18］。酚羥基化合物可以清除自由基，其主要機(jī)制是酚羥基與自由基反應(yīng)形成穩(wěn)定半酮式自由基結(jié)構(gòu)終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)［19］。盤(pán)龍七主要有效成分巖白菜素是多酚類(lèi)化合物，含有較多的酚羥基化合物，因而具有獨(dú)特的藥理活性。麩炒盤(pán)龍七后提高了巖白菜素的含量即提高了多酚類(lèi)化合物，因而提高了盤(pán)龍七清除自由基的效果，從而提高其治療效果。

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（2014-07-10收稿 責(zé)任編輯：洪志強(qiáng)）

Effects of Stir Fried Bran on Bergenin Content in Rhizom a Bergeniae Scopulosae

Feng Yonghui，Tan Hanqing
（School of Pharmaceutical Sciences，Xi'an Medical University，Xi'an 710021，China）

Objective：To study the content changesofbergenin in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before and after stir-bakingwith bran.Methods：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae was determined by HPLC.Chromatographic column：UltisilTM XB-C18column（150 mm×10 mm，5μm）；moving phase：takingmoving phase as carbinol to nater（32∶68）；flow velocity：taking flow velocity as 1.0ml/min；column temperature：taking colum temperature as room tomperature；determinewavelength was 275nm；sample sizewas20 μl.Results：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before stir-baking with bran was 16.82 mg/g，and after bran fried was 22.15 mg/g.Conclusion：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae after stir-baking with bran is higher than before.So we can see that stir-baking with bran can increase therapeutic effect of Rhizoma Bergeniae Scopulosae.

Bran Fried；Rhizoma Bergeniae Scopulosae；Bergenin

R284

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2014.10.031

陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（編號(hào)：2010JM3014）；陜西省食品藥品監(jiān)督管理局資助項(xiàng)目（陜西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2010-86）

馮永輝，男，陜西韓城人，西安醫(yī)學(xué)院副教授，從事天然藥物學(xué)研究，Tel：（029）86177539，E-mail：f20048858＠126.com