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    烏藥水提取物抗心律失常作用的研究

    2014-01-30 00:54:18郭曉秋王莉萍
    中國當(dāng)代醫(yī)藥 2014年10期
    關(guān)鍵詞:烏藥室顫動作電位

    郭曉秋 李 武 王莉萍 何 躍

    1.江西省中醫(yī)院藥劑科,南昌 330006;2.江西省撫州市第一人民醫(yī)院藥劑科,江西撫州 344000

    烏藥水提取物抗心律失常作用的研究

    郭曉秋1李 武2王莉萍2何 躍2

    1.江西省中醫(yī)院藥劑科,南昌 330006;2.江西省撫州市第一人民醫(yī)院藥劑科,江西撫州 344000

    目的 研究烏藥水提取物的抗心律失常作用。 方法 采用常規(guī)抗心律失常方法,將三氯甲烷誘發(fā)小鼠室顫試驗和氯化鈣誘發(fā)大鼠室顫試驗分為生理鹽水組、維拉帕米組、10.0 mg/kg烏藥水提取物組和30.0 mg/kg烏藥水提取物組;將腎上腺素誘發(fā)家兔心律失常試驗分為給藥前后組;蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位試驗分為任氏液組、1.0%鹽酸普魯卡因溶液組、0.5 g/ml和1.0 g/ml烏藥水提取物組。 結(jié)果 烏藥水提取物對三氯甲烷誘發(fā)的小鼠室顫具有明顯的治療作用(P<0.05),對氯化鈣誘發(fā)的大鼠室顫具有明顯的預(yù)防效果(P<0.05),能明顯對抗腎上腺素誘發(fā)的家兔心律失常(P<0.01),可明顯降低蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位振幅(P<0.05)。 結(jié)論 烏藥水提取物具有明顯的抗試驗性心律失常作用,能對抗由三氯甲烷、氯化鈣、腎上腺素等誘發(fā)的心律失常,其抗心律失常作用可能與其抑制Na+內(nèi)流及與阻斷β-腎上腺素受體有關(guān)。

    烏藥;水提取物;心律失常

    心血管疾病是一類嚴(yán)重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病,其發(fā)病率和死亡率在各類疾病中占首位,嚴(yán)重心律失常已經(jīng)成為導(dǎo)致人類死亡的主要原因之一。近年來,對于心律失常的非藥物治療已取得了不少進展,雖然非藥物治療可以解決一部分心律失?;颊叩闹委焼栴},但是大部分心律失常患者還需用藥物治療,因此,藥物治療仍是心律失常疾病的主要治療方法。烏藥又名銅錢樹、土木香,是樟科山胡椒屬植物烏 藥[Lindera Aggregata(Sims) Kosterm.(LAK)]的 塊根,主產(chǎn)于江西、浙江、安徽、江蘇、陜西等地。味辛,性溫,歸肺、脾、腎、膀胱經(jīng),具有行氣止痛、溫腎散寒等功效,臨床主要用于胃寒氣滯、胸悶脘痛、呃逆、痛經(jīng)等癥[1-2]。烏藥各部位含有糖類、酚類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、生物堿、皂苷、黃酮、蒽醌、香豆素、內(nèi)酯、甾體等成分,但是各成分在不同器官中的含量有差異,如氨基酸在塊根中含量較高,生物堿在直根和塊根中含量較高。烏藥主要由揮發(fā)油、異喹啉類生物堿及呋喃倍半萜三大類成分組成[3-5],同時烏藥中還含有烏藥醚內(nèi)酯、異烏藥內(nèi)酯、烏藥內(nèi)酯和去甲異波爾定等[6]。有報道烏藥提取物有明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎作用[7-8],烏藥葉總黃酮具有降脂作用、抗氧化作用及肝損傷的保護作用[9-10],烏藥提取物還具有抗疲勞作用[11]。本次研究主要分析烏藥水提取物抗心律失常的作用。

    1 材料與方法

    1.1 藥品與試劑

    烏藥水提取物的制備:取干燥烏藥全草(從撫州市醫(yī)藥公司購置)300 g,加雙蒸水過液面2 cm,煮沸3次。30 min/次,合并濾液,濾液濃縮至300 ml。濃縮液加3倍量95%的乙醇混勻,冰箱靜置過夜,次日減壓蒸留,回收乙醇,得300 ml無醇味的烏藥提取物。提取物相當(dāng)于1 g/ml的烏藥。用0.5%NaHCO3溶液調(diào)整pH為7.0,置冰箱中備用。

    維拉帕米(上海禾豐制藥有限公司,批號:20120234),三氯甲烷(上海試劑總廠,批號:20110820),腎上腺素(上海禾豐制藥有限公司,批號:20120234),鹽酸普魯卡因(天津世紀(jì)藥業(yè)有限公司,批號:20120402),氯化鈣(天津金耀氨基酸有限公司,批號:20100904)。

    1.2 試驗動物與儀器

    動物:家兔、SD大鼠和昆明種小鼠購自江西中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心(級別:清潔級),蟾蜍由贛南醫(yī)學(xué)院動物中心提供。

    儀器:SBR-1示波器(汕頭電子儀器廠),XDH-3心電圖機(上海醫(yī)療電子儀器廠)。

    1.3 方法

    1.3.1 烏藥水提取物對三氯甲烷誘發(fā)小鼠室顫影響試驗 昆明種小鼠80只,雌雄兼用,體重(22.3±1.8)g,隨機分為4組。分別腹腔注射10.0 mg/kg烏藥水提取物、30.0 mg/kg烏藥水提取物、5.0 mg/kg維拉帕米和等容積的生理鹽水,25 min后將小鼠移入含有10 ml三氯甲烷藥棉的燒杯中,至小鼠呼吸停止后,立即剖胸觀察,以確定是否發(fā)生心室纖顫。

    1.3.2 烏藥水提取物對氯化鈣誘發(fā)大鼠室顫影響試驗取SD大鼠24只,雌雄兼用,體重(190±20)g,隨機分為4組,腹腔注射烏拉坦1.2g/kg,麻醉,記錄Ⅱ?qū)?lián)ECG,分別腹腔注射10.0 mg/kg烏藥水提取物、30.0 mg/kg烏藥水提取物、5.0 mg/kg的維拉帕米和等容積的生理鹽水,5 min 后快速(10 s內(nèi))靜脈注射 CaCl2,140 mg/kg,記錄大鼠發(fā)生心室纖顫的只數(shù)和發(fā)生率。

    1.3.3 烏藥水提取物對腎上腺素誘發(fā)家兔心律失常影響試驗 取家兔 16只,體重(2.0±0.5)kg。 首次快速(1 min內(nèi)注完)靜脈注射0.025%腎上腺素75 μg/kg,記錄出現(xiàn)室性心律失常的時間以及心律失常的持續(xù)時間。45 min后,靜脈注射20.0 mg/kg的烏藥提取物,5 min后再次快速靜脈注射等量的腎上腺素。采用自身對照方法,比較給藥前后開始出現(xiàn)室性心律失常的時間和心律失常持續(xù)時間。

    1.3.4 烏藥水提取物對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位影響試驗 制備蟾蜍離體坐骨神經(jīng)標(biāo)本,標(biāo)本于任氏液中穩(wěn)定0.5 h,坐骨神經(jīng)近心端用0.25 ms、2 Hz、2倍閾電壓強度的方波刺激,遠(yuǎn)心端通過引導(dǎo)電極與SBR雙線示波器連接,觀察坐骨神經(jīng)正常動作電位。在位于刺激電極與引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)干上,分別放置浸濕試藥的小棉球,觀察用藥前后動作電位的振幅。標(biāo)本分別給予任氏液、1.0%的鹽酸普魯卡因溶液、0.5 g/ml和1.0 g/ml的烏藥水提取物,以給藥前后動作電位振幅為100%,分別計算給藥后不同時間動作電位振幅的相應(yīng)百分率。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    采用SPSS 14.0統(tǒng)計軟件包對相關(guān)數(shù)據(jù)進行分析,計量資料以±s表示,組間兩兩比較用t檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 烏藥水提取物對三氯甲烷誘發(fā)小鼠室顫的影響

    本研究提示,10.0、30.0 mg/kg的烏藥水提取物能使小鼠室顫發(fā)生率顯著下降(P<0.05)(表1)。

    表1 烏藥水提取物對三氯甲烷誘發(fā)小鼠室顫的影響(±s)

    與生理鹽水組比較,*P<0.05;#P<0.01

    組別 n 劑量(mg/kg)小鼠室顫只數(shù)(n)室顫發(fā)生率(%)生理鹽水組維拉帕米組烏藥水提取物A組烏藥水提取物B組20 20 20 20-5.0 10.0 30.0 20 4 10 7 100.0 20.0#50.0*35.0#

    2.2 烏藥水提取物對氯化鈣誘發(fā)大鼠室顫的影響

    10.0 mg/kg、30.0 mg/kg的烏藥水提取物能顯著降低大鼠室顫的發(fā)生率(P<0.05)(表2)。

    表2 烏藥水提取物對CaCl2誘發(fā)大鼠室顫的影響(±s)

    表2 烏藥水提取物對CaCl2誘發(fā)大鼠室顫的影響(±s)

    與生理鹽水組比較,*P<0.05;#P<0.01

    組別 n 劑量(mg/kg)小鼠室顫只數(shù)(n)室顫發(fā)生率(%)生理鹽水組維拉帕米組烏藥水提取物A組烏藥水提取物B組6666-5.0 10.0 30.0 5132 100.0 16.6#50.0*33.3#

    2.3 烏藥水提取物對腎上腺素誘發(fā)家兔心律失常的影響

    20.0 mg/kg的烏藥水提取物能顯著延長腎上腺素誘發(fā)家兔開始出現(xiàn)心律失常的時間和心律失常持續(xù)時間(P<0.05)(表3)。

    2.4 烏藥水提取液對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位的影響

    0.5 g/ml和1.0 g/ml的烏藥水提取液能顯著降低蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位振幅(P<0.05)(表4)。

    表3 烏藥水提取物對腎上腺素誘發(fā)家兔心律失常的影響(s,±s)

    表3 烏藥水提取物對腎上腺素誘發(fā)家兔心律失常的影響(s,±s)

    與給藥前比較,*P<0.01

    時間 n 開始出現(xiàn)心律失常的時間 心律失常持續(xù)時間給藥前給藥后88 1.9±1.1 18.1±8.6*198±30.3 56.2±25.6*

    表4 烏藥水提取液對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位振幅的影響(%,±s)

    表4 烏藥水提取液對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位振幅的影響(%,±s)

    與任氏液組比較,*P <0.05;**P <0.01

    藥物名稱 n 給藥前給藥后6 min 12 min 18 min 24 min任氏液普魯卡因烏藥水提取液(0.5 g/ml)烏藥水提取液(1.0 g/ml)10 10 10 10 100 100 100 100 99.5±4.6 31.6±18.7*58.1±22.3*42.4±17.9*99.1±3.6 3.3±2.5#27.3±5.6#22.6±3.1#100.5±4.7 0#10.8±2.6#6.7±3.1#99.8±2.7 0#2.3±1.8#0#

    3 討論

    一定劑量的三氯甲烷可提高心肌的自律性,導(dǎo)致室性期前收縮、室性心動過速,甚至室性顫動。本次研究中生理鹽水組小鼠室顫發(fā)生率為100.0%,而低劑量(10.0 mg/kg)和高劑量(30.0 mg/kg)的烏藥水提取物使小鼠室顫率分別降低為50.0%、35.0%,提示烏藥水提取物可降低三氯甲烷誘發(fā)的室顫發(fā)生率,且具有劑量依賴性。

    腎上腺素為腎上腺素受體(α、β)激動劑,通過激動心臟的β1-腎上腺素受體對心臟產(chǎn)生較強的興奮作用,并且腎上腺素受體興奮后可開放Ca2+通道,促進Ca2+內(nèi)流,提高心肌細(xì)胞的興奮性和自律性,但也可引起后去極及自發(fā)活動。同時β1-受體興奮還可激活K+通道,促進K+外流,降低心肌細(xì)胞的最大舒張電位,增加膜反應(yīng)性,使傳導(dǎo)加快,故腎上腺素過量又可導(dǎo)致心律失常的發(fā)生。給予10.0、30.0 mg/kg的烏藥水提取物后,腎上腺素誘發(fā)心律失常的時間較給藥前明顯延長,且心律失常持續(xù)時間也明顯縮短。說明烏藥水提取物可能通過阻斷心臟的β1-腎上腺素受體,降低心肌細(xì)胞的興奮性和自律性,達(dá)到對抗腎上腺素誘發(fā)的心律失常。

    蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位振幅主要系Na+內(nèi)流所致,0.5、1.0 g/ml的烏藥水提取物能明顯降低蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位的振幅,表明烏藥水提取物對Na+內(nèi)流有抑制作用。

    綜上所述,烏藥水提取物具有抗心律失常作用,且其抗心律失常作用可能與抑制Na+內(nèi)流及抗β-腎上腺素受體有關(guān)。

    [1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:53.

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    Study of antiarrhythmic effect ofLindera aggregataaqueous extract

    GUO Xiao-qiu1LI Wu2WANG Li-ping2HE Yue2
    1.Department of Pharmacy,Hospital of Traditional Chinese Medicine of Jiangxi Province,Nanchang 330006,China;2.Department of Pharmacy,the First People′s Hospital of Fuzhou City in Jiangxi Province,Fuzhou 344000,China

    ObjectiveTo study the antiarrhythmic effect of aqueous extract of Lindera aggregata.MethodsThe conventional anti-arrhythmic methods was selected,two conventional antiarrhythmic models were employed by establishing the chloroform-induced mice ventricular fibrillation model and calcium-induced rat ventricular fibrillation model,the experimental animals were divided into saline group,verapamil group,10.0 mg/kg and 30 mg/kg Lindera aggregata aqueous extract treating groups.In the adrenaline-induced arrhythmias rabbits experiment,animals were grouped as before administration and after administration.In the in vitro toad sciatic nerve action potential experiment,the toads were randomly divided into ringer solution group,1.0%procaine hydrochloride group,0.5 g/ml and 1.0 g/ml Lindera aggregata aqueous extract groups.ResultsThe aqueous extract of Lindera aggregata showed obvious treating effect on mice ventricular fibrillation(VF)induced by chloroform(P<0.05),and also for preventive effect of rat VF induced by calcium chloride(P<0.01),it reduced the potential amplitude of toad sciatic nerve action significantly(P<0.05).ConclusionThe aqueous extract of Lindera aggregata has obvious antiarrhythmic effect against arrhythmia induced by chloroform,calcium chloride and adrenaline.The mechanism may be related to the inhibition of Na+influx and blocking β-adrenergic receptor.

    Lindera Aggregata(Sims)Kosterm;Aqueous extract;Arrhythmia

    R965.1

    A

    1674-4721(2014)04(a)-0016-03

    江西省衛(wèi)生廳科技計劃項目(20133229)

    郭曉秋(1972-),女,本科學(xué)歷,副主任藥師,主要從事臨床藥學(xué)研究

    2014-01-27 本文編輯:袁 成)

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