雞冠花的化學(xué)成分研究

張洪財(cái)，張婷婷，杜 冰，陳大忠*，李智剛

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江哈爾濱 150040;2.牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院普外科，黑龍江牡丹江 157011)

雞冠花Celosia cristata L.又名雞髻花、老來紅、雞公花，為莧科Amaranthaceae青葙屬一年生草本，原產(chǎn)于美洲熱帶、印度和非洲［1］?，F(xiàn)我國已有大面積的種植［2］。雞冠花花序入藥首載于《滇南本草》，味甘，性涼，入肝、大腸經(jīng)，具有收斂止血，止帶止痢之功效［3］。其活性成分主要有黃酮類、皂苷等化合物［4-5］，具有調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)骨骼發(fā)育、抗陰道毛滴蟲、止血、抗衰老及保肝等作用［6-10］。有關(guān)雞冠花化學(xué)成分研究的報(bào)道較少，有文獻(xiàn)報(bào)道雞冠花種子中分離得到三萜皂苷類成分［5-6］。

為明確雞冠花的藥用價(jià)值，進(jìn)一步弄清該植物的生理活性部位及其活性成分物質(zhì)基礎(chǔ)，對雞冠花花序的化學(xué)成分進(jìn)行研究，以期為雞冠花的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料 雞冠花采摘自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物園，并經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室孫慧峰教授鑒定為莧科青葙屬植物雞冠花Celosia cristata L.。標(biāo)本(20110912)保存于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院。

1.2 儀器 Bruker-400超導(dǎo)核磁共振光譜儀(美國Bruker公司)，Agilent 1100制備型HPLC(美國Agilent公司，G1361A型泵，G1315B型UV-vis檢測器)，Agilent 1100 Series LC ChemStation工作站，C18反相色譜柱(ZORBAX SB-C18，9.4 mm×25 cm，5μm);FTIR7600型傅立葉紅外光譜儀(天津天光光學(xué)儀器有限公司);柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠，140～200、200～300目);薄層色譜用硅膠板(Silica gel60 F254)和TLC Silica gel60 Rp-18 F254s(Rp-18)為德國Merck公司產(chǎn)品;柱色譜用反相ODS(ODS-AM)為日本YMC公司產(chǎn)品;甲醇、乙醇、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等試劑均為分析純。

2 提取和分離

雞冠花花序10 kg，剪成小塊，以60%乙醇室溫浸泡后加熱回流提取3次，每次3 h。合并提取液，減壓回收溶劑后用蒸餾水混懸，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取至無色，各萃取液分別回收溶劑。

正丁醇部位(230 g)以適量的水溶解，AB-8大孔樹脂吸附，依次用水、30%乙醇、50%乙醇和95%乙醇梯度洗脫，得到的各洗脫液分別減壓濃縮干燥。得30%乙醇部分37.5 g。

雞冠花正丁醇提取部位的30%乙醇部分(37.5 g)經(jīng)硅膠柱層析，二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)梯度洗脫，得到6個組份(F1～F6)。F2部分(1.2 g)經(jīng)ODS硅膠柱層析分離，得到化合物3(4.7 mg)。F3部分(1.5 g)經(jīng)正相硅膠柱層析，結(jié)合甲醇重結(jié)晶得到化合物2(4.3 mg)。F4(6.8 g)部分經(jīng)ODS柱層析結(jié)合HPLC(制備型)分離得到化合物1(5.0 mg)、化合物4(8 mg)。F5(8.7 g)經(jīng)ODS柱層析和HPLC(制備型)分離得到化合物5(12 mg)、化合物6(85.0 mg)、化合物7(7.2 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:白色無定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 461.1589［M+H］+，分子式C20H28O12，計(jì)算不飽和度為7。1H-NMR(CD3OD)δ:6.22(1H，d，J=2.3 Hz，H-3)，6.16(1H，d，J=2.3 Hz，H-5)，5.44(1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，5.05(1H，d，J=7.3 Hz，H-1')，4.04(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.92(1H，d，J=1.5 Hz，H-2″)，3.90(3H，s，6-OCH3)，3.79(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.61(2H，dd，J=14.0，6.0 Hz，H-6')，3.50(2H，s，H-5″)，2.58(3H，s，-CH3)。13C-NMR(CD3OD)δ:204.9(C=O)，167.7(C-2)，165.4(C-4)，164.7(C-6)，107.8(C-1)，97.7(C-3)，92.8(C-5)，56.4(6-OCH3)，33.2(8-CH3)，100.1(C-1')，78.1(C-2')，78.4(C-3')，71.4(C-4')，78.5(C-5')，62.5(C-6')，110.1(C-1″)，78.5(C-2″)，80.8(C-3″)，75.5(C-4″)，66.0(C-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］報(bào)道的數(shù)據(jù)一致，故鑒定為4-O-β-D-芹糖-(1→2)-β-D-葡萄糖-2-羥基-6 甲氧基苯乙酮 ［4-O-β-D-apifuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxy-6-methoxy-acetophenone］。

化合物2:無色顆粒狀結(jié)晶，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 327.1009［M+H］+，分子式C15H18O8，計(jì)算不飽和度為7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.63(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.39(2H，d，J=8.6 Hz，H-2，6)，6.72(2H，d，J=8.6 Hz，H-3，5)，6.27(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，5.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-1')，3.75(1H，dd，J=11.9 Hz，1.6 Hz，H-6'a)，3.59(1H，dd，J=12.04.5 Hz，H-6'b)。13C-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:167.7(C=O)，161.6(C-4)，148.0(C-7)，131.4(C-2，6)，127.0(C-1)，116.9(C-3，5)，114.5(C-8)，95.8(C-1')，78.8(C-3')，78.0(C-5')，74.1(C-2')，71.1(C-4')，62.4(C-6')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］報(bào)道基本一致，故鑒定為對羥基苯丙烯酸葡萄糖酯(p-coumaric acid glucoside)。

化合物3:白色針狀結(jié)晶，易溶于甲醇。HRESI-MS m/z 373.1426［M+H］+，分子式 C17H24O9，計(jì)算不飽和度為6。1H-NMR(CD3OD)δ:6.75(2H，m，H-3，5)，6.50(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.33(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.22(2H，dd，J=1.4，5.6 Hz，H-8)，3.85(6H，s，OCH3-2，6)，3.78(1H，dd，J=12.0，2.4 Hz，H-6'a)，3.67(1H，dd，J=12.0，5.2 Hz，H-6'b)。13C-NMR(CD3OD)δ:154.4(C-2，6)，135.9(C-1)，135.3(C-4)，131.3(C-8)，130.0(C-7)，105.4(C-3，5)，105.3(C-1')，78.4(C-3')，77.8(C-5')，75.7(C-2')，71.3(C-4')，64.4(C-9)，63.6(C-6')，57.0(2×-OCH3)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］報(bào)道的紫丁香苷(syringin)的數(shù)據(jù)一致。

化合物4:無色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 443.1847［M+H］+，分子式 C21H30O10，計(jì)算不飽和度為 7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.07(1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，6.82(1H，d，J=1.8 Hz，H-3)，6.74(1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-5)，5.96(1H，ddt，J=16.9，10，2.0 Hz，H-8)，5.08(1H，dd，J=16.9，2.0 Hz，H-9b)，5.04(1H，dd，J=10，2.0 Hz，H-9a)，4.96(2H，dd，J=2.4，9.4 Hz，H-7)，4.95(1H，d，J=2.4 Hz，H-1″)，4.79(1H，d，J=7.2 Hz，H-1')，3.99(1H，dd，J=1.5，11.0 Hz，H-6')，3.73(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″a)，3.94(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″b)，3.88(1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，3.84(3H，s， OCH3)， 3.56(2H， s， H-5″)。13C-NMR(CD3OD)δ:150.8(C-2)，146.3(C-1)，139.0(C-8)，136.5(C-4)，122.2(C-5)，118.4(C-3)，115.9(C-9)，114.1(C-6)，111.0(C-1″)，103.1(C-1')，80.5(C-3″)，78.0(C-3')，77.8(C-5')，77.0(C-2″)，75.0(C-4″)，74.9(C-2')，71.6(C-4')，68.7(C-6')，65.6(C-5″)，56.7(OCH3-2)，40.8(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］報(bào)道的數(shù)據(jù)一致，故鑒定為丁香酚-O-β-芹糖-(1→6)-O-β-葡萄糖苷 ［eugenyl-O-β-apiofuranosyl-(1→6)-O-βglucopyranoside］。

化合物5:無定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 231.1062 ［M+H］+，分子式C13H14N2O2，計(jì)算不飽和度為 8。1H-NMR(CD3OD)δ:1.73(3H，d，J=6.7 Hz，H-10)，3.01(1H，dd，J=16.0，12.0 Hz，H-4a)，3.43(1H，dd，J=16.0，5 Hz，H-4b)，3.95(1H，dd，J=12.0，5 Hz，H-3)，4.69(1H，q，J=6.6 Hz，H-1)，7.03(1H，t，J=7.4 Hz，H-6)，7.13(1H，t，J=7.4 Hz，H-7)，7.33(1H，d，J=7.8 Hz，H-8)，7.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)。13C-NMR(CD3OD)δ:51.1(C-1)，59.8(C-3)，24.4(C-4)，107.9(C-4a)，127.5(C-4b)，119.2(C-5)，120.5(C-6)，123.3(C-7)，112.3(C-8)，138.6(C-8a)，131.4(C-9a)，17.2(C-10)，173.7(C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］報(bào)道的基本一致，故鑒定為(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氫化-β-咔啉-3-甲酸 ［(1S，3S)-1-Methyl-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid］。

化合物6:黃色晶體，易溶于甲醇、二甲基亞砜。HR-ESI-MS m/z 757.2121［M+H］+，分子式C33H40O20，計(jì)算不飽和度為14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.03(2H，d，J=8.8 Hz，H-2'，6')，6.89(2H，d，J=8.8 Hz，H-3'，5')，6.40(1H，brs，H-8)，6.18(1H，brs，H-6)，5.65(1H，d，J=7.0 Hz，H-1″)，4.28(1H，d，J=7.8 Hz，H-1?)，3.69(2H，dd，J=9.4，2.7 Hz，H-6?)，3.58(2H，t，J=11.6 Hz，H-6″)，0.85(3H，d，J=6.1 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，165.3(C-7)，161.1(C-5)，159.9(C-4')，156.4(C-2)，156.0(C-9)，132.5(C-3)，130.7(C-2'，6')，120.8(C-1')，115.1(C-3'，5')，104.9(C-1?)，103.5(C-10)，100.5(C-1″″)，99.0(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，83.0(C-2″)，77.4(C-5″)，77.1(C-3?)，76.9(C-3″)，76.5(C-5?)，74.4(C-2?)，72.4(C-4″″)，70.4(C-2″″)，70.1(C-3″″)，69.7(C-4″)，66.7(C-4?)，63.0(C-5″″)，62.7(C-6?)，60.9(C-6″)，17(C-6″″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16］報(bào)道的基本一致，故鑒定為山柰酚-3-O-α-L-鼠里糖-(1→6)-β-D-葡萄糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷 ［kaempferol 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside］。

化合物7:黃色晶體，易溶于甲醇、二甲基亞砜。HR-ESI-MS m/z 771.2277［M+H］+，分子式C34H42O20，計(jì)算不飽和度為14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.49(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6')，6.91(1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，6.41(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.18(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.75(2H，d，J=7.4 Hz，H-1″，H-1″″)，4.24(1H，d，J=7.0 Hz，H-1?)，3.86(3H，s，OCH3)，3.58(1H，m，H-6″a，)，3.55(1H，m，H-6″b)，3.39(1H，m，H-6?)，0.74(3H，d，J=6.2 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，164.8(C-7)，161.1(C-5)，149.3(C-4')，146.8(C-3')，132.4(C-3)，121.4(C-6')，120.4(C-1')，115.2(C-5')，113.4(C-2')，105.0(C-10)，103.7(C-1?)，100.7(C-1″″)，98.9(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，78.0(C-2″)，77.4(C-5″″)，76.9(C-5?)，76.8(C-3?)，76.5(C-5″)，69.9(C-4?)，69.7(C-4″″)，76.9(C-3″″)，66.6(C-4″)，62.7(C-6″″)，60.9(C-6?)，60.4(C-6″)，55.6(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17］報(bào)道的基本一致，故鑒定為異鼠李素-3-O-(2-O-β-D-葡萄糖)-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷 ［isorhamnetin 3-O-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside-7-O-β-D-glucopyra noside］。

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