山楂葉黃酮類成分的研究進(jìn)展

廣西玉林食品藥品檢驗(yàn)所,廣西 玉林 537000

山楂葉黃酮類成分的研究進(jìn)展

黎小偉

廣西玉林食品藥品檢驗(yàn)所,廣西 玉林 537000

山楂葉為一種重要藥材資源，主要含有黃酮類成分，藥理作用廣泛。本文對其黃酮類成分及藥理作用的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，以期對山楂葉的廣泛研究提供參考。

山楂葉；黃酮類成分；藥理作用

山楂為薔薇科山楂屬植物，其果實(shí)為常用的中藥，具有悠久的保健與藥用歷史。過去我們多注重其果實(shí)方面的研究，但近幾年隨著提取工藝，檢驗(yàn)手段的提高，對于山楂葉的研究有了很大進(jìn)展，尤其是其黃酮類成分在心血管系統(tǒng)方面的治療效果以及抗衰老等作用受到人們的青睞。山楂葉具有活血化淤，理氣脈作用[1]，研究表明黃酮類物質(zhì)是山楂葉的主要藥理活性成分，本文就近年來對山楂葉黃酮類成分及藥理作用的研究進(jìn)行了綜述。

1 化學(xué)成分

山楂葉總黃酮中含有黃酮及其苷類、黃酮醇及其苷類、雙氫黃酮苷類、異黃酮醇類、花色苷類、橙酮類和聚合黃酮類等[2-3]。從山楂葉中分離出各種黃酮類化合物有牡荊素，牡荊素-4-鼠李糖苷，乙酰牡荊素-4-鼠李糖苷，牡荊素-4′,7-雙葡萄糖苷[2]，槲皮素(qaercetin)、金絲桃甙(hyperin)、牡劑素(vitexit)、牡荊素鼠李糖甙(rhamnosylvitexin)[4]，pinnatifida A，pinnatifida B,6″-O-乙?；登G素,2″-O-乙?；登G素, 牡荊素-2″- 0-鼠李糖苷[5], 3-O-β-D-吡喃葡糖基槲皮素，3-O-β-D-吡喃半乳糖基槲皮素，3-O-β-D-吡喃葡糖(6→1)-α-L-鼠李糖槲皮素，3-O-β-D-吡喃半乳糖(6→1) -α-L-鼠李糖槲皮素，山萘酚，7-O-α-L-鼠李糖一3-O-β-D-葡糖山萘酚[6]，蘆丁，4″′-O-葡萄糖牡荊素,4″′-O-鼠李糖蘆丁[7]，Pinnatifida C和Pinnatifida D[8]等。

2 提取分離

2.1 提取方法 山楂葉中的黃酮類物質(zhì)，一般以乙醇、水為介質(zhì)，采用浸漬法、回流提取法、超聲波提取、超高壓提取，其中以醇提、超聲波處理的較多。采用超聲波提取法具有提高提取效率，省時(shí)、節(jié)能的效果[9-12]。李宏偉等[13]用超高壓技術(shù)常溫提取山楂葉中黃酮類化合物，具有提取效率高、時(shí)間短，雜質(zhì)含量少等優(yōu)點(diǎn)。郭永學(xué)等[14]在常規(guī)水提取方法上，增加微波輔助萃取處理，試驗(yàn)證明微波輔助萃取所用的溶劑量是傳統(tǒng)水提取法的10%，所用的操作時(shí)間是傳統(tǒng)方法的10%，提取效率高達(dá)96.34%。王立娟[15]利用山楂落葉為原料，70% 乙醇為溶劑，比較了微波輔助提取與傳統(tǒng)工藝提取山楂葉總黃酮，表明微波輻射有利于山楂葉總黃酮的提取，總黃酮得率提高了1.13個(gè)百分點(diǎn)。魏紅福[16]采用響應(yīng)面法對水浸提工藝進(jìn)行優(yōu)化，以提高山楂葉中總黃酮的提取率，提取率達(dá)至88.54% 。魯巍巍等[17]對山楂葉總黃酮的提取采用浸漬法、回流提取法、超聲波法進(jìn)行了研究比較，結(jié)果從總黃酮得率來看，以浸漬法所得黃酮總量最高，超聲波法次之，而加熱回流提取法所得黃酮總量最低。王曉等[18]以0.2mg/ml的纖維素酶和0.1mg/ml的果膠酶的復(fù)合酶液，在50℃ ，pH=4.5的條件下對山楂葉酶解120min，對山楂葉細(xì)胞壁進(jìn)行破壞， 然后再在90℃浸提90min，可提高總黃酮提取得率，為山楂葉總黃酮的提取提供了一種新方法。

2.2 分離純化 近年來，分離純化山楂葉總黃酮的方法主要是大孔樹脂吸附、聚酰胺兩種方法,而又以大孔樹脂吸附純化為多。許英愛等[19]對D101大孔樹脂吸附純化山楂葉總黃酮的工藝條件進(jìn)行了篩選，結(jié)果表明D101大孔樹脂對山楂葉總黃酮吸附純化的最佳條件為樹脂投量與生藥比為4∶1，以70%乙醇作為洗脫劑，洗脫流速為2ml/min，溶劑用量與生藥比為20∶1，吸附時(shí)間為1.5h，采用本工藝山楂葉總黃酮的得率達(dá)5.17% ，純度達(dá)67.22% 。安彩賢等[20]通過對4種不同極性的大孔吸附樹脂進(jìn)行篩選，最終確定用D101型樹脂純化分離葛根與山楂葉中總黃酮，山楂葉黃酮飽和吸附量11.28mg·g-1，吸附流速3mL·min-1，洗脫劑為80%乙醇，洗脫劑用量為20倍藥材量，洗脫流速3mL·mi n-1。郭永學(xué)等[21]采用HPD-600大孔樹脂分離純化山楂葉總黃酮,結(jié)果含量達(dá)80.75%。張培成等[8]將山楂葉干燥粉碎后用80%的工業(yè)乙醇提取，減壓回收乙醇，濃縮物過大孔吸附樹脂，用55%的乙醇洗脫，減壓回收乙醇，干燥得棕紅色粉狀固體提取物，提取物分別經(jīng)硅膠、聚酰胺柱層析，從中分得2個(gè)化合物，分別鑒定為：Pinnatifida C，Pinnatifida D。此外，有文獻(xiàn)[22]報(bào)道采用甲醇一水(7∶3)提取山楂葉，提取液在室溫下蒸發(fā)至較小體積，用石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯液蒸干，所得粗提物過聚酰胺CC6柱，依次用甲醇、甲醇一水(7∶3)和丙酮一水(7∶3)洗脫，分得10個(gè)黃酮類化學(xué)物。

3 藥理作用研究

3.1 對心血管的作用 鞠曉云等[23]采用犬冠脈結(jié)扎導(dǎo)致心肌梗死的方法造模，觀察山楂葉總黃酮的作用。結(jié)果山楂葉總黃酮凍干粉高、中劑量組能降低冠脈結(jié)扎所致心肌梗死犬的SAP、DAP、MAP。表明不同劑量山楂葉總黃酮凍干粉可明顯緩解心肌缺血癥狀。山楂葉總黃酮可明顯增加冠脈流量，擴(kuò)張冠脈血管，降低冠脈阻力，增加心輸出量和心搏出量，提高左室做功能力，降低動(dòng)脈血氧含量，增加冠狀靜脈竇血氧含量，降低心肌耗氧量，改善心肌的血氧供應(yīng)，并能降低外周阻力，對心血管系統(tǒng)起到調(diào)整和改善作用。閔清等[24]研究表明，山楂葉總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注引起的心功能減弱具有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與改善能量代謝障礙和抑制自由基生成或清除氧自由基作用有關(guān)。

3.2 對腦血管的作用 劉瑛琳等[25]研究山楂葉總黃酮對大鼠腦缺血再灌注損傷中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)的影響，結(jié)果表明山楂葉總黃酮能明顯地減少腦梗死的面積，降低MMP-9的表達(dá)，發(fā)揮腦保護(hù)作用。紀(jì)影實(shí)等[26]采用線栓法制作大鼠局灶性腦缺血模型(MCAO)，對山楂葉總黃酮抗局灶性腦缺血的作用進(jìn)行研究。結(jié)果顯示山楂葉總黃酮可減輕腦缺血損傷，對腦細(xì)胞具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與降低全血黏度、抑制血小板聚集有關(guān)。

3.3 對血脂、血糖代謝的作用 葉希韻等[27]采用四氧嘧啶(45mg/kg)尾靜脈注射建立糖尿病小鼠模型，實(shí)驗(yàn)表明山楂葉總黃酮可明顯降低糖尿病小鼠血清中血糖、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、果糖胺(FA)、山梨醇和大腦脂褐質(zhì)水平(P<0.01)，升高血清高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)水平(P<0.05)，呈劑量效應(yīng)關(guān)系，對由糖尿病引起的肝臟組織脂肪積累有一定的清除作用。說明山楂葉總黃酮具有顯著降低糖尿病小鼠血糖和血脂的作用，并對糖尿病并發(fā)癥和肝臟組織脂肪積累具有一定的防治作用。有文獻(xiàn)報(bào)道[28]山楂葉總黃酮可減輕家兔動(dòng)脈粥樣硬化及降低血清中NO、CRP、IL-6及TNF-α的水平，升高SOD和GSH。Px的活性，下調(diào)COX-IImRNA。裴小川等[29]研究顯示山楂葉總黃酮具有較強(qiáng)的清除自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的能力。能減少小鼠機(jī)體內(nèi)GSH的消耗，增強(qiáng)GSH抗氧化系統(tǒng)的抗氧化能力，抑制自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對肝臟的損傷，對酒精性肝損傷有確切的保護(hù)作用。

3.4 對神經(jīng)方面的影響 紀(jì)影實(shí)等[30]探討山楂葉總黃酮(FMCL)對H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及機(jī)制。表明山楂葉總黃酮可抑制H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與抑制線粒體途徑的細(xì)胞凋亡有關(guān)。嚴(yán)瑾等[31]在爪蟾卵母細(xì)胞中建立人類PPARγ-PPRE調(diào)控信號系統(tǒng)，研究山楂葉總黃酮通過該系統(tǒng)對LPL表達(dá)的影響，結(jié)果顯示中藥提取物山楂葉總黃酮可能含有PPARγ配體樣成分，通過與PPARγ結(jié)合，誘導(dǎo)PPlRE下游目的基因的表達(dá)。

綜上所述，山楂葉含有的黃酮類成分在心腦血管系統(tǒng)方面的臨床應(yīng)用有著廣闊的發(fā)展前景，現(xiàn)代化學(xué)和藥理研究已部分闡明了山楂葉黃酮類成分和生物活性之間的聯(lián)系，因此對其化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行深入研究，可進(jìn)一步闡明其化學(xué)成分和臨床應(yīng)用之間的聯(lián)系，對于指導(dǎo)臨床用藥和新藥開發(fā)有著重要意義。

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2014.03.31)