CIK細(xì)胞經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管胸腔灌注治療惡性胸腔積液32例

孫春華 柏淳 許永萍 朱珍英

CIK細(xì)胞經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管胸腔灌注治療惡性胸腔積液32例

孫春華 柏淳 許永萍 朱珍英

惡性胸腔積液是惡性腫瘤侵犯胸膜或原發(fā)于胸膜本身的惡性腫瘤引發(fā)的并發(fā)癥，其出現(xiàn)提示腫瘤晚期[1]。?？梢鸹颊吆粑щy、咳嗽、胸痛，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，治療胸腔積液對(duì)改善患者生活質(zhì)量及延長(zhǎng)生存期有重要意義。應(yīng)用單純胸腔穿刺抽液或全身化療及常規(guī)藥物胸腔內(nèi)注射，療效較差，復(fù)發(fā)率高[2]。我院應(yīng)用中心靜脈導(dǎo)管閉式引流聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK細(xì)胞）胸腔灌注治療惡性胸腔積液患者32例，效果滿意，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 2011-10—2012-06我院收治的32例惡性胸腔積液患者，均通過胸腔積液細(xì)胞學(xué)確診為惡性腫瘤，其中男19例，女13例；年齡40～76歲，中位年齡58歲?；颊逰PS評(píng)分＞60分，預(yù)計(jì)生存期＞3個(gè)月。原發(fā)腫瘤中肺癌19例，乳腺癌5例，食管癌2例，胃癌3例，結(jié)直腸癌2例，B細(xì)胞惡性淋巴瘤1例。所有患者均經(jīng)X線胸片及B超檢查證實(shí)為中等量以上的胸腔積液，既往無(wú)胸腔內(nèi)用藥史。治療前心電圖、血常規(guī)、肝、腎功能檢查正常，患者均簽署治療知情同意書及穿刺同意書。

1.2 CIK細(xì)胞的制備 采用人外周血淋巴細(xì)胞分離液分離并收集患者外周血單個(gè)核細(xì)胞，洗滌后將細(xì)胞以2×106個(gè)/ml的密度懸浮于RPMI 1640完全培養(yǎng)液中，加入γ-干擾素1 000U/ml，置于37℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%的條件下培養(yǎng)24h，再加入抗CD3單克隆抗體100ng/ml、IL-2 1 000U/ml繼續(xù)培養(yǎng)，每2～3d傳代一次，并補(bǔ)加完全培養(yǎng)液及IL-2。細(xì)胞培養(yǎng)至10～14d經(jīng)檢測(cè)無(wú)污染后，收集CIK細(xì)胞，洗滌后以0.9%氯化鈉溶液40ml重懸。

1.3 CIK細(xì)胞的表型及病原學(xué)檢測(cè) CIK細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)至第10天時(shí)，以流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD3、CD4、CD8和CD56等表面抗原的表達(dá)情況，要求CD3+CD56+細(xì)胞比例不低于20%，CD3+CD8+細(xì)胞比例不低于40%，微生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果為陰性。

1.4 治療方法 患者均取坐位或半臥位，根據(jù)B超定位選擇穿刺點(diǎn)，置入中心靜脈導(dǎo)管持續(xù)引流，控制速度＜200ml/h，引流完畢后，經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管注入CIK細(xì)胞3.3×109個(gè)/次，1次/3d，共3次，輸注完畢夾閉導(dǎo)管36h。注藥后囑患者變換體位使藥物與胸膜充分接觸。灌注前予吲哚美辛栓50mg塞肛，至胸腔積液引流量＜50ml/d時(shí)撤管。

1.5 療效評(píng)定 按照WHO癌性滲液療效判定標(biāo)準(zhǔn)分為：（1）完全緩解（CR）：胸腔積液完全消失并維持4周以上；（2）部分緩解（PR）：胸腔積液減少50%以上，癥狀緩解并維持4周以上；（3）無(wú)效（NC）：胸腔積液未減少或4周內(nèi)復(fù)發(fā)，癥狀無(wú)好轉(zhuǎn)?？傆行剩≧R）=（CR+ PR）/總例數(shù)×100%。生活質(zhì)量評(píng)價(jià)根據(jù)治療后患者KPS評(píng)分，改善：增加10分以上者；穩(wěn)定：增加或減少未超過10分者；減退：減少10分以上者。

2 結(jié)果

2.1 近期療效 治療1個(gè)月后對(duì)患者進(jìn)行X線胸片及B超復(fù)查以評(píng)價(jià)療效。32例患者RR為84.38%，其中CR 16例（50.00%），PR 11例（34.38%），NC 5例（15.62%）。

2.2 生活質(zhì)量 治療后再次對(duì)患者進(jìn)行一般狀況KPS評(píng)分，其中改善23例（71.88%），KPS評(píng)分增加10～30分；穩(wěn)定7例（21.88%），KPS評(píng)分增加或減少未超過10分；減退2例（6.25%），KPS評(píng)分減少10分以上。

2.3 不良反應(yīng) 治療中2例患者（6.25%）出現(xiàn)中低度發(fā)熱，1例體溫 37.8℃，4h后自行緩解；1例體溫38.7℃，經(jīng)吲哚美辛栓50mg塞肛后緩解，無(wú)一例患者出現(xiàn)胃腸道反應(yīng)及骨髓抑制。

3 討論

CIK細(xì)胞是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞[3]，具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體限制性抑制腫瘤生長(zhǎng)的特點(diǎn)[4]，其主要效應(yīng)細(xì)胞為CD3+CD56+雙陽(yáng)性。CIK細(xì)胞通過下列幾種途徑殺滅腫瘤：（1）通過黏附因子LFA/ICAM-1途徑與腫瘤細(xì)胞結(jié)合后，分泌含大量BLT酯酶的顆粒，這些顆粒能穿透靶細(xì)胞膜，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的裂解[5]。（2）CIK細(xì)胞能分泌IL-2、IL-6、TNF-α及粒單細(xì)胞集落刺激因子等細(xì)胞因子，增強(qiáng)細(xì)胞毒作用，直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。還可通過對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)來(lái)間接殺傷瘤細(xì)胞[6]。（3）CIK細(xì)胞可以通過表達(dá)FasL誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[7]。另外CIK細(xì)胞分泌的IL-2等細(xì)胞因子可以產(chǎn)生非特異性炎癥，使胸膜粘連固定，從而阻止胸腔積液的生成。

本結(jié)果顯示，CIK細(xì)胞經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管胸腔灌注治療惡性胸腔積液RR達(dá)84.38%，不良反應(yīng)主要為中低度發(fā)熱，患者可耐受，無(wú)一例出現(xiàn)胃腸道反應(yīng)及骨髓抑制，大部分患者生活質(zhì)量均得到不同程度改善。

[1] 劉志聰,崔恩海,王斌,等.重組人血管內(nèi)皮抑素聯(lián)合卡鉑治療惡性胸腔積液療效觀察[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,21(11):784-785.

[2] 陳碧茵,歐陽(yáng)學(xué)農(nóng).惡性胸水的治療現(xiàn)狀[J].實(shí)用癌癥雜志,2006,21(2): 222-224.

[3]栗敏,梅家轉(zhuǎn),劉桂舉.厄洛替尼聯(lián)合CIK細(xì)胞治療EGFR基因突變的肺腺癌[J].天津醫(yī)藥,2013,41(10):1017-1018.

[4]羅光華,馬鳴,郭莉莉,等.CIK細(xì)胞治療對(duì)腫瘤患者外周血免疫細(xì)胞亞型的影響[J].中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2013,20(4):475-477.

[5] Sun S,LiXM,LiXD,et al.Studies on inducing apeptosis effects and mechanism of CIK cells for MGC-803 gastric cancer cell lines[J]. Cancer Biother Radiopharm,2005,20(2):173-180.

[6] Wei XC,Zhai XH,Han XR,et al.Biological activity of DC-CIK cells and its effect against leukemia cells in vitro[J].Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi,2008,16(5):1150-1153.

[7] 張輝,趙群,左連富,等.細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞SKOV3/CDDP的作用機(jī)制[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2007,23(12): 1167-1169,1171.

2013-06-25）

（本文編輯：胥昀）

314000 嘉興，武警浙江省總隊(duì)嘉興醫(yī)院腫瘤科