乳腺癌組織中Trop—2蛋白的表達(dá)及意義

摘要：目的 探討Trop-2在乳腺癌組織中的表達(dá)水平及臨床意義。方法 選擇125例乳腺癌組織、30例正常乳腺組織和30例乳腺良性增生組織，應(yīng)用免疫組織化學(xué)SABC法檢測Trop-2的表達(dá)水平。結(jié)果 125例乳腺癌中Trop-2陽性者84例（67.2%）；30例乳腺良性增生組織Trop-2陽性者11例（36.7%）；30例正常乳腺組織Trop-2陽性者8例（26.7%）；Trop-2陽性表達(dá)率與乳腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)，而與患者年齡、腫瘤大小無顯著相關(guān)性。結(jié)論 乳腺癌高表達(dá)Trop-2。Trop-2的異常表達(dá)可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程，Trop-2有望成為乳腺癌治療的分子靶點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：乳腺癌；Trop-2

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，它的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的多基因調(diào)控異常的過程。腫瘤相關(guān)鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白（tumor-associated calcium signal transducer 2 ， Trop-2）是一種高表達(dá)于多種上皮性腫瘤的細(xì)胞表面蛋白，參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程[1]。我們采用免疫組織化學(xué)方法檢測了125例乳腺癌患者Trop-2的表達(dá)情況，探討Trop-2在乳腺癌臨床和病理診斷中的作用及意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集本院2009年6月～2010年9月我院外科住院手術(shù)治療的乳腺癌患者125例手術(shù)切除標(biāo)本，均病理證實(shí)為浸潤性導(dǎo)管癌，年齡39～77歲；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移74例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移51例；腫物<2 cm 37例，2～5cm 77例，≥5 cm 11例；高分化癌48例，低分化癌77例；臨床分期采用1997年國際抗癌聯(lián)合會(huì)（Union International Cantrell Cancer， UICC）TNM分類分期標(biāo)準(zhǔn)，臨床Ⅰ期12例，Ⅱ期35例，Ⅲ期64例，Ⅳ期14例。另選擇30例乳腺良性增生組織，及同期手術(shù)切除的30例正常乳腺組織作為對(duì)照組。

1.2方法 病理診斷與分類依據(jù)2003年《WHO乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，由包括兩位高級(jí)病理醫(yī)生在內(nèi)的三位醫(yī)師進(jìn)行診斷及分級(jí)。所有組織學(xué)診斷均基于經(jīng)常規(guī)處理后，蘇木精和伊紅染色的形態(tài)學(xué)檢查。冰凍標(biāo)本常規(guī)4μm連續(xù)切片，一抗工作濃度（TROP-2鼠抗人單克隆抗體）為1∶400。采用免疫組化SABC法，DAB液顯色，蘇木素復(fù)染。實(shí)驗(yàn)設(shè)PBS代替一抗為陰性對(duì)照，作為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。分乳腺癌組織組、乳腺良性增生組織組和正常乳腺組織組。

1.3結(jié)果判定 光鏡下，隨機(jī)選擇5個(gè)視野，采用雙評(píng)分，陽性細(xì)胞百分率評(píng)分：≤25%為0分，26%～50%為1分，51%～75%為2分，>75%為3分；染色強(qiáng)度評(píng)分：無顯色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將以上2項(xiàng)得分相加：1～2分判為\"+\"，3～4分判為\"++\"，5～6分判為\"+++\"。\"+\"為弱陽性表達(dá)；\"++\"和\"+++\"為陽性表達(dá)。癌組織染色強(qiáng)度≥3或癌組織染色強(qiáng)度=2，但陽性細(xì)胞百分率≥10%皆為有表達(dá)，癌組織染色強(qiáng)度≤1，不論陽性率多大，皆歸為無表達(dá)。TROP-2陽性定位于細(xì)胞膜。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌組織Trop-2的表達(dá)水平 免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)Trop-2蛋白的表達(dá)以細(xì)胞膜為主。正常乳腺組織及乳腺良性增生組織中很少見到淺棕色顆粒，呈弱陽性或陰性表達(dá)水平（見圖1～2），而乳腺癌組織中可以出現(xiàn)較多的棕色或深棕色顆粒，呈高表達(dá)水平（見圖3）。125例乳腺癌癌組織中Trop-2陽性表達(dá)共有84例，陽性率為67.2%，顯著高于正常乳腺組織（26.7%）和乳腺良性增生組織（36.7%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

2.2 Trop-2的表達(dá)水平與臨床病理特征的相關(guān)性 77例低分化乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)有61例，陽性率為79.2%；而48例高分化乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)有23例，陽性率為47.9%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的74例乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)為57例，陽性率77.0%；而在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的51例乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)為31例，陽性率為60.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。47例Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌組織中TROP-2陽性表達(dá)有23例，陽性率為48.9%；而78例Ⅲ、Ⅳ乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)有60例，陽性率為76.9%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Trop-2的陽性表達(dá)率與患者年齡、性別、腫瘤大小無顯著相關(guān)性（見表1）。

3 討論

Trop-2亦稱為M1S1，是GA733基因家族中的一員，定位在1號(hào)染色體短臂上 ，所編碼的產(chǎn)物為含有323個(gè)氨基酸、35.7kDa的蛋白質(zhì)，被認(rèn)為是一種腫瘤相關(guān)抗原，表達(dá)于上皮性腫瘤細(xì)胞表面的糖蛋白，其包含一個(gè)上皮生長因子樣的重復(fù)區(qū)，一個(gè)甲狀腺球蛋白樣重復(fù)區(qū)，其分子羥基端含有絲氨酸和酪氨酸位點(diǎn)及PIP-2結(jié)合區(qū)域，其絲氨酸殘端為激酶c所磷酸化。Trop-2蛋白的生理功能不是十分清楚，目前認(rèn)為它是一種細(xì)胞膜鈣離子通道相關(guān)蛋白，與細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的調(diào)控有關(guān)，具有調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移的作用[2-4]。近年的研究表明，Trop-2在許多實(shí)體瘤如大腸癌、乳腺癌食管癌等腫瘤中均有過表達(dá)[5-6]。Trop-2在腫瘤組織的高表達(dá)和在正常組織的低表達(dá)使得特異性Trop-2的單克隆抗體成為一種治療手段[7]。我們的研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織Trop-2呈強(qiáng)陽性表達(dá)，正常乳腺組織不僅表達(dá)強(qiáng)度下降，而且陽性表達(dá)率也明顯下降。Wang等研究發(fā)現(xiàn)Trop-2的高表達(dá)與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，用RNA干擾技術(shù)下調(diào)Trop-2表達(dá)，大腸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯下調(diào)[8]。由此我們推測，Trop-2有望成為乳腺癌的一種新的治療靶點(diǎn)。

研究發(fā)現(xiàn)[9]，腫瘤的不同TNM分期中Trop-2的陽性表達(dá)率隨著分期的升高而升高，提示Trop-2有可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物之一。我們發(fā)現(xiàn)，在低分化乳腺組織及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中，Trop-2陽性表達(dá)率較高，而在高分化乳腺癌組織及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中Trop-2陽性表達(dá)率明顯下降，Ⅲ、Ⅳ乳腺癌組織中Trop-2表達(dá)水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌組織，提示Trop-2的高表達(dá)可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程。但其具體機(jī)制目前尚不清楚。

總之，乳腺癌組織高表達(dá)Trop-2，Trop-2的異常表達(dá)可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程，Trop-2有望成為乳腺癌臨床診治及預(yù)后判斷的分子靶點(diǎn)。

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