梅毒螺旋體血清學檢測方法比較

摘要：目的 比較三種梅毒血清學實驗方法的準確性及在臨床診斷中的價值。方法 應(yīng)用甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）檢測我院1379例血清樣本。結(jié)果 TRUST、ELISA的敏感性分別為51.0%、98.0%、；特異性為92.9%、96.2%。結(jié)論 梅毒檢測應(yīng)聯(lián)合非特異抗體和特異性抗體兩種檢測方法，以提高檢測的靈敏度和特異性。

關(guān)鍵詞： 梅毒螺旋體；甲苯胺紅不加熱血清試驗；酶聯(lián)免疫吸附試驗；明膠顆粒凝集試驗

梅毒的病原體為蒼白密螺旋體，亦稱梅毒螺旋體，主要通過性傳播，也可以通過血液傳播、母嬰傳播，人體感染后可侵犯皮膚黏膜并侵犯全身的組織和器官而產(chǎn)生多種癥狀和體征。正確選擇檢測實驗方法，對術(shù)前、輸血前、孕檢及梅毒的診斷和治療有重要的臨床意義。本文對我院患者梅毒的篩查，采用甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）三種方法，并對檢測結(jié)果進行了比較分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 我院2013年6～9月術(shù)前、輸血前、門診及社區(qū)患者，共1379例。

1.2試劑 TRUST：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；ELISA：北京萬泰生物藥業(yè)有限公司；TPPA ：日本富士瑞必歐株式會社。

1.3儀器 科華ST-36W洗板機；科華ST-360酶標儀。

1.4方法 嚴格按試劑盒內(nèi)說明書方法操作。

2 結(jié)果

對1379例標本進行梅毒TRUST和ELISA方法檢測，用TPPA法確證。TRUST法檢出28份陽性，ELISA法檢出52份陽性，其中兩種方法均為陽性的25份。經(jīng)TPPA法進行確證后，3份TRUST陽性中有2份為假陽性，假陽性率7.1%；27份ELISA陽性中有2份為假陽性，假陽性率3.8%。ELISA假陽性標本再用TRUST檢測為陰性，標本倍比稀釋后重檢，未發(fā)現(xiàn)帶現(xiàn)象所至的假陰性。見表1。

以TPPA法為判斷標準，經(jīng)計算得出TRUST法敏感性51.0%，特異性92.9%，與確證試驗TPPA法有顯著性差異（P<0.05）；ELISA法敏感性98.0%，特異性96.2%，與TPPA法較接近，無顯著性差異（P>0.05）。見表2。

3 討論

梅毒螺旋體進入機體后產(chǎn)生非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性的密螺旋體抗體，針對不同人群的檢測目的選擇合適的實驗方法尤為重要。

TRUST試驗是用VDRL重懸于甲苯胺紅顆粒作為抗原檢測血清中的抗類脂質(zhì)抗體，為梅毒非特異性抗體，在梅毒感染的不同時期檢出率差別較大[1]，在感染潛伏期由于其抗體出現(xiàn)時間相對較晚，一般陽性率低，治療后或晚期梅毒TRUST濃度可不同程度下降或呈陰性，不易檢出，而對二期梅毒有較高的診斷價值[2，3]。TRUST法檢測還易受類風濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病影響[4]，能引起非螺旋體抗原血清試驗生物學假陽性反應(yīng)。當抗體濃度過量時，會出現(xiàn)前帶現(xiàn)象引起假陰性而造成漏診。作為過篩試驗，TRUST具有操作簡便快速、成本低、不需依賴儀器判斷結(jié)果等優(yōu)點，但其敏感性低，特異性不高，不能自動化，故此法適用于梅毒療效觀察和對復(fù)發(fā)或再感染的監(jiān)測。

ELISA是用雙抗原夾心法，利用基因重組工程合成抗原，檢測血清中的梅毒特異性抗體，其特異性、敏感性在本文統(tǒng)計中分別為96.2%、98.0%，與TPPA非常相近。且ELISA試劑成本相對較低，重復(fù)性好，使用兩步法可有效防止鉤狀效應(yīng)，能使用全自動或半自動酶標儀讀數(shù)，原始數(shù)據(jù)易于保存，是批量篩查梅毒的理想方法[5]。由于這類方法檢測的是抗梅毒螺旋體IgM、IgG抗體，IgM抗體早于IgG抗體出現(xiàn)，對窗口期的檢出靈敏度要高于其他兩種方法，IgG持續(xù)存在體內(nèi)，無論治療與否或者疾病是否活動，IgG抗體仍保持陽性[6]，所以不能用以觀察療效、復(fù)發(fā)及再感染。

TPPA是將梅毒的精制菌體成分包被在人工載體明膠粒子上，致敏粒子能和待檢梅毒特異性抗體進行反應(yīng)發(fā)生凝集。其敏感性和特異性高，是目前公認的梅毒血清學確證試驗。因其抗原來源困難而試劑成本高，操作相對復(fù)雜，實驗時間長，檢測結(jié)果易受主觀判斷影響及不能自動化等缺點，不適于大批量標本的檢測[7]。與ELISA法一樣，該法是檢測梅毒特異性抗體，對梅毒的治療效果無法判斷，主要用于初篩陽性標本的確證。

在我們的實驗活動中，根據(jù)不同人群的篩查目的，選擇合適的梅毒檢測方法，如聯(lián)合檢測非特異抗體的TRUST和特異性抗體的ELISA兩種檢測方法，可以提高梅毒的檢出率和準確性，為臨床診斷和治療提供有價值的檢測結(jié)果，避免漏診和誤診。

參考文獻：

[1]陳雪梅.梅毒螺旋體三種檢測方法比較[J].交通醫(yī)學，2007，21（3）：342-343.

[2]何永玲.3種方法在梅毒檢測中的比較[J].華夏醫(yī)學，2009，22（3）：491-492.

[3]胡鳳濤，石成虎.梅毒的檢測與診斷[J].中國醫(yī)藥指，2012，10（12）：471.

[4]孟冬婭，方秀菊.常用梅毒檢測方法的臨床診斷意義[J].沈陽部隊醫(yī)藥，2008，21（4）：285.

[5]徐志偉，詹明華，王莎娜.梅毒血清學檢測方法進展及評價[J].河北北方學院學報，2010，27（3）80-82.

[6]徐剛.梅毒螺旋體血清學檢測方法的臨床評價[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（9）：18-19.

[7]武建國.梅毒的實驗室診斷與臨床相關(guān)問題[J].臨床檢驗雜志，2006，24（4）：316-320.

編輯/哈濤