D—二聚體在急性白血病28例中檢測(cè)的臨床意義

【摘要】目的探討急性白血病血漿-二聚體含量與病情狀態(tài)的關(guān)系。方法將28例急性白血病患據(jù)白血病診療標(biāo)準(zhǔn)分為初診組、持續(xù)緩解組、復(fù)發(fā)組，采用膠體金方法分別測(cè)定其血漿-二聚體含量，并與對(duì)照組進(jìn)行比較，初診組與其化療前、后自身對(duì)照。結(jié)果①初診組、復(fù)發(fā)組與對(duì)照組比較，-二聚體水平明顯升高（P<0.01；持續(xù)緩解組與對(duì)照組比較無明顯差異（P>0.05；②初診組化療前明顯高于化療完全緩解后（P<0.01。結(jié)論①急性白血病患兒在初診、復(fù)發(fā)時(shí)-二聚體水平明顯升高，完全緩解時(shí)降為正常，說明急性白血病初診、復(fù)發(fā)時(shí)存在凝血與纖溶系統(tǒng)激活，有繼發(fā)纖溶亢進(jìn)，隨著化療，完全緩解后繼發(fā)纖溶亢進(jìn)解除。②急性白血病-二聚體水平與病情狀態(tài)密切相關(guān)，可以預(yù)測(cè)化療效果。

【關(guān)鍵詞】急性白血病；-二聚體；纖維蛋白

doi：10.3969j.issn.1004-7484（x.2013.10.077文章編號(hào)：1004-7484（2013-10-5624-02

急性白血病是一種惡性、克隆性疾病，它源于造血干細(xì)胞的異常，發(fā)病時(shí)骨髓異常的原始細(xì)胞和幼稚細(xì)胞（白血病細(xì)胞大量增殖并廣泛浸潤(rùn)肝，脾，淋巴結(jié)等各種器官，抑制正常造血。白血病細(xì)胞處在克隆中時(shí)會(huì)停滯在發(fā)育的各個(gè)不同階段從而喪失分化成成熟細(xì)胞的下一步的能力。骨髓及周圍血象多為原始細(xì)胞，幼稚細(xì)胞。臨床常表現(xiàn)為：①正常骨髓造血功能受抑制表現(xiàn)。②白血病細(xì)胞增殖浸潤(rùn)的表現(xiàn)。常表現(xiàn)為貧血，常為首發(fā)癥狀。發(fā)熱，常因正常粒細(xì)胞缺乏或功能缺陷等其他因素所致。感染，出血等一系列臨床癥狀。急性白血病起病急，病情發(fā)展迅速，病程短。盡管白血病的發(fā)生被認(rèn)為和許多因素有關(guān)，但人類白血病的發(fā)生至今未找到確切病因。但隨著全世界在分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)現(xiàn)和進(jìn)一步提高運(yùn)用，白血病的病因?qū)W已進(jìn)入分子生物學(xué)的研究從而從群體醫(yī)學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域突破出來。目前仍然認(rèn)為病毒感染，電離輻射，化學(xué)因素，遺傳因素和其他血液病與急性白血病的發(fā)病有關(guān)系。根據(jù)成熟分化程度和自然病程的長(zhǎng)短，為急性白血?。ˋL和慢性白血病（CL兩類是根據(jù)成熟程度和自然病程把白血病分為2類。病情發(fā)展的很迅速，只有數(shù)周到數(shù)月的自然病程。一般可根據(jù)白血病細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和細(xì)胞化學(xué)可分為急性髓系白血?。ˋL和急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL兩大類^[1-2]。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象本實(shí)驗(yàn)收集通化市中心醫(yī)院2012年1月至2013年5月的因急性白血病住院患者28例，其中18例男，10例女；年齡最小16歲，最大48歲，平均37歲。其中25例急淋（ALI；3例急非淋（ANLL，28例患者中：a、分別各1例。均與張之南《白血病診斷治療標(biāo)準(zhǔn)》相符合^[3]。細(xì)致劃分為：①初診組：其中確診為急性白血病尚未化療的患者20例。初診組進(jìn)行化療1-2個(gè)療程（28天后，再次進(jìn)行血漿-二聚體的檢測(cè)，同時(shí)給該組患者進(jìn)行骨髓檢測(cè)，根據(jù)骨髓檢測(cè)，該組患者中6例部分緩解（PR，14例為完全緩解（cR。②有6例的持續(xù)緩解者，持續(xù)緩解者是指已經(jīng)被確診為白血病的患者，經(jīng)過一段時(shí)間的治療后完全緩解，從緩解之日開始計(jì)算，一年以上無白血病復(fù)發(fā)的患者。③復(fù)發(fā)組：2例。二、正常對(duì)照組：其中男17例，女13例共30例；最小16歲，最大50歲，平均41歲。

1.2主要儀器和試劑

1.2.1日本Sysmex公司CA7000血凝儀。

1.2.2試劑①反應(yīng)試劑：采用CA7000血凝儀配套ade Behring（德靈試劑；②系統(tǒng)清潔液：廠家配套Sysmex Clean I清潔液，用于檢測(cè)過程中樣品針、試劑針的沖洗；③系統(tǒng)沖洗液：蒸餾水，實(shí)驗(yàn)室自制，用于檢測(cè)過程中系統(tǒng)管路的沖洗4稀釋液：配套ade Behring的Owern’s Veronal Buffer和CA System Buffer，用于檢測(cè)過程中樣本的稀釋或定標(biāo)曲線制定中標(biāo)準(zhǔn)血漿的稀釋。

1.2.3其它消耗品反應(yīng)杯：廠家配套Sysmex Reaction CA7000 Tube反應(yīng)杯；貨號(hào)：SU-400。

1.3方法檢測(cè)方法：病例組患者和對(duì)照組自愿者在早晨起床、未進(jìn)食狀態(tài)時(shí)靜脈采血1.8ml，加入枸櫞酸鈉0.2ml，抗凝劑：血比例為1：9。將其在3000g離心15min（在2h內(nèi)進(jìn)行，用加樣器吸取1.0ml標(biāo)本上層血漿，保存在-20℃條件下，4周內(nèi)對(duì)保存樣品進(jìn)行測(cè)定。凡病例組滿足4例就配以對(duì)照組（相同例數(shù)的同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。首先要對(duì)冰凍標(biāo)本進(jìn)行15min37℃水浴復(fù)溶。實(shí)驗(yàn)要由同一實(shí)驗(yàn)室同一檢驗(yàn)師嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作，以確保實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的質(zhì)量控制。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理本測(cè)試所的數(shù)據(jù)是采用SPSS14.0進(jìn)行的，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（χ±s進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，兩比較組間的均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)（數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)；Pearson相關(guān)分析法被用來分析兩組變量間是否具有相關(guān)性。α=0.05。

2結(jié)果

各組血漿-二聚體檢測(cè)結(jié)果。

2.1復(fù)發(fā)組、初診組血漿-二聚體檢測(cè)結(jié)果分別比較對(duì)照組升高明顯（P<0.01；持續(xù)緩解組的患者與之前設(shè)置的對(duì)照組自愿者相比無明顯的差異（P>0.05；初診組的患者相比復(fù)發(fā)組的患者也不存在明顯差異（P>0.05；而三個(gè)組相比較初診組患者和復(fù)發(fā)組患者分別與持續(xù)緩解組患者相比，都升高明顯（P<0.01。

2.2血漿-二聚體的檢測(cè)結(jié)果在初診組患者化療前后發(fā)生變化?；熐?、化療一到兩個(gè)療程之后自身前后對(duì)比，血漿-二聚體明顯降低的現(xiàn)象出現(xiàn)在完全緩解組化療之后，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01；部分緩解組化療后經(jīng)t檢驗(yàn)無顯著性差異，血漿-二聚體雖然有所降低（P>0.05。

3討論

-二聚體是一個(gè)特異性的纖溶過程標(biāo)記物，是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子XIII交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物。纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊繼而產(chǎn)生-二聚體，-二聚體的升高表明機(jī)體纖溶系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)的雙重激活，是體內(nèi)繼發(fā)纖溶亢進(jìn)敏感而特異的指標(biāo)^[4]。人體纖溶系統(tǒng)，它對(duì)組織修復(fù)和維持血液的流動(dòng)狀態(tài)，保持血管壁的正常通透性起著重要作用。如果存在繼發(fā)性纖溶過程，而先生凝血酶，后又有纖溶系活化，血漿中-二聚體的檢測(cè)水平就會(huì)升高；如果纖溶酶濃度或活性在血栓形成的局部超過血漿2‰—抗纖溶酶濃度或活性也會(huì)隨之增高。運(yùn)用各種相應(yīng)藥物促使纖維蛋白溶解系統(tǒng)活化的治療方式被稱作溶栓治療。為使血栓加速溶解通過運(yùn)用，從而使用某種纖溶酶原活化物如UK、SK或t-PA等藥物使大量纖溶酶生成溶解血栓從而達(dá)到治療效果。如果有-二聚體生成或FP就說明達(dá)到溶栓效果。2例急性白血病再次復(fù)發(fā)的患者和本組20例初診患者的血漿-二聚體水平與正常對(duì)照組的自愿者以及處于持續(xù)緩解時(shí)的急性白血病患者比較有明顯增高（P<0.01。表明初診組和復(fù)發(fā)組的急性白血病患者在時(shí)體內(nèi)凝血、纖溶功能均存在明顯異常。急性白血病患者發(fā)生纖溶功能、凝血異常的機(jī)制：①癌促凝物質(zhì)（cancer procoagulant，cp存在于白血病細(xì)胞之中^[5]，此類物質(zhì)通過大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)為半胱氨酸蛋白酶類物質(zhì)。②纖溶酶原激活物被釋放是因?yàn)榘籽〖?xì)胞浸潤(rùn)患者的血管內(nèi)皮使血管內(nèi)皮損傷從而消耗纖溶酶原并引起纖溶亢進(jìn)。③白血病時(shí)纖溶功能、凝血功能被干擾^[6]。④急性白血病患者纖溶、凝血功能的異常加重是因?yàn)榛颊叱０橛袊?yán)重的感染所引起的。本次試驗(yàn)還對(duì)初診組急性白血病患者進(jìn)行了動(dòng)態(tài)觀察并記錄編錄到本組資料?；熀笸耆徑庹叩难獫{-二聚體水平明顯比化療前有所下降（P<0.01，而化療未完全緩解者，-二聚體水平下降不明顯（P>0.05，表明-二聚體水平在一定程度上反映急性白血病患者體內(nèi)白血病細(xì)胞負(fù)荷，從而與病情發(fā)展?fàn)顟B(tài)有著密切聯(lián)系，如果治療后患者-二聚體水平不下降，則說明預(yù)后不良。

此實(shí)驗(yàn)表明，急性白血病患者初診未治和復(fù)發(fā)時(shí)血漿-二聚體水平增高，患者經(jīng)過一段時(shí)間的化療完全緩解后患者的血漿-二聚體水平下降。通過檢測(cè)患者血漿-二聚體水平的改變，可對(duì)急性白血病患者體內(nèi)纖溶、凝血狀態(tài)的變化及時(shí)的了解，所以常作為化療效果、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)之一。

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