血必凈注射液對創(chuàng)傷性急性肺損傷患者HMGB1水平的影響及其治療價值

[摘要] 目的 探討血必凈注射液對創(chuàng)傷性急性肺損傷患者血清高遷移率族蛋白B1水平的影響。 方法 將50例創(chuàng)傷性急性肺損傷患者隨機分成兩組，常規(guī)組給予常規(guī)治療，血必凈組在常規(guī)治療基礎上加用血必凈注射液100 mL，Q12 h；治療前及治療后7 d，利用酶聯(lián)免疫吸附法檢測外周血HMGB1濃度，同時監(jiān)測血氣分析，記錄治療前后急性生理學與慢性健康狀況Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluation， APACHE-Ⅱ） 評分、pH值及氧合指數。 結果 兩組患者24 h內血清HMGB1濃度較正常健康組顯著升高；治療7 d后，與常規(guī)組相比，血必凈組血清HMGB1下降更為明顯（P<0.05）；血必凈組較常規(guī)組pH值、氧合指數改善更為顯著（P<0.05）；兩組死亡率及ARDS發(fā)生率無明顯差異（P>0.05）。 結論 創(chuàng)傷性急性肺損傷患者早期HMGB1即開始明顯升高，而血必凈注射液治療后可顯著降低其外周血HMGB1水平及改善缺氧狀態(tài)，具有一定治療價值。

[關鍵詞] 血必凈注射液；創(chuàng)傷性急性肺損傷；急性呼吸窘迫綜合癥；高遷移率族蛋白B1

[中圖分類號] R563 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）26-0057-03

創(chuàng)傷所致的急性肺損傷（acute lung injury，ALI）是由嚴重創(chuàng)傷直接或間接引起肺泡-毛細血管損傷為主的臨床綜合征，進一步發(fā)展可導致急性呼吸窘迫綜合癥（acute respiratory distress syndrome，ARDS），病死率高，且目前缺乏有效的治療手段。研究表明，大量炎癥介質的釋放是ALI發(fā)生的關鍵環(huán)節(jié)之一，其中包括“晚期炎癥介質”——高遷移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein，HMGB1）[1]。在創(chuàng)傷患者中發(fā)現，創(chuàng)傷早期HMGB1即明顯升高，且其血清水平與預后密切相關，如膿毒癥、多器官功能衰竭、ARDS的發(fā)生等[2]。血必凈作為一種中藥材復合制劑，具有活血化瘀、疏通經絡、清熱解毒、菌毒并治等功效，同時能有效拮抗內源性炎癥介質的失控性分泌，對膿毒癥、中毒及嚴重燒創(chuàng)傷等均具有較好的療效。收集送至本院的創(chuàng)傷性ALI患者，觀察血必凈注射液對其血清HMGB1的影響及臨床療效評估，為其臨床應用提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年3月～2011年9月我院急診外科及ICU收治的ALI患者50例為研究對象，其中男29例，女21例；年齡18～63歲，平均37.8歲；致傷原因為墜落傷15例、車禍傷23例、鈍器傷5例、其他傷7例；全部病例均符合ALI的診斷標準[3]：①急性起病；②存在誘發(fā)ARDS的危險因素；③氧合指數（動脈血氧分壓/吸入氧濃度，PaO2/FiO2）≤40 kPa（300 mm Hg）；④肺部X線片或CT均顯示雙肺彌漫性浸潤；⑤肺毛細血管楔壓（PCWP）≦18 mm Hg或無心源性肺水腫的臨床證據；將患者隨機分為常規(guī)治療組（25例）和血必凈治療組（25例），根據急性生理學與慢性健康狀況評分系統(tǒng)Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluation， APACHE-Ⅱ）評分標準對患者疾病危重度進行評分，兩組臨床資料在年齡、性別構成、APACHE-Ⅱ評分等相關因素的比較中差別均無統(tǒng)計學意義，具有可比性，見表1。

1.2 方法

各組患者均于診斷ALI后24 h內用肝素抗凝管抽取靜脈血5 mL，室溫放置2 h，以1 000 r/min離心10 min，分離血清，存于-80℃冰箱備用。同時收集10例健康成人標本作為正常健康組；同時記錄各組病例生命體征、完成血常規(guī)、血氣分析、肝腎功能電解質等檢測。所有患者予以常規(guī)治療，包括積極處理原發(fā)灶、循環(huán)和呼吸支持、氧療、止血、聯(lián)合激素和抗生素抗感染、營養(yǎng)支持、手術及對癥治療等；血必凈治療組則在常規(guī)治療的基礎上加用血必凈注射液100 mL靜脈滴注，Q12 h，連用7 d后，連續(xù)檢測血氣分析，紀錄各組患者預后，包括ARDS發(fā)生率、病死率。

1.3 血清HMGB1水平的檢測

采用人HMGB1酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（日本Shino-Test公司）檢測，嚴格按照說明書操作，分別計算出標準曲線和回歸方程，將樣品吸光度值代入標準曲線計算出HMGB1水平。

1.4 統(tǒng)計學處理

數據采用均數±標準差（x±s）表示，應用SPSS 12.0軟件對資料進行分析，兩組間定量資料比較采用單因素方差分析，定性資料比較采用χ2檢驗，以P=0.05為檢驗水準。

2 結果

2.1 血清HMGB1水平的比較

兩組患者創(chuàng)傷性ALI發(fā)生后，其血清HMGB1較正常健康人顯著升高。血必凈治療組與常規(guī)治療組患者在治療前血清HMGB1水平均無明顯差異（F=0.938，P=0.346），但治療后HMGB1水平較治療前均有所下降（常規(guī)組：F=37.22，P<0.01；血必凈組：F=105.94，P<0.01），而血必凈組患者的血清HMGB1水平較常規(guī)治療組降低更為顯著（F=8.19，P=0.01），見表2。

2.2 血氣分析比較

見表3。血必凈組和常規(guī)組患者在治療前血氣分析的pH值和氧合指數均無顯著差異；治療后其pH值較治療前下降（常規(guī)組：F=7.18，P=0.018；血必凈組：F=7.25，P=0.021），氧合指數提升（常規(guī)組：F=5.13，P=0.04；血必凈組：F=4.875，P=0.044），且血必凈組患者更為明顯（F=6.33，P=0.023）。

2.3 ARDS發(fā)生率及病死率比較

血必凈治療組與常規(guī)治療組在ARDS發(fā)生率及死亡率的比較上均無明顯差異（ARDS發(fā)生率比較：χ2=2.122，P=0.145；病死率比較：χ2=1.754，P=0.185），見表4。

3 討論

創(chuàng)傷性急性肺損傷是由嚴重創(chuàng)傷直接或間接造成肺泡-毛細血管損傷，引起急性肺間質水腫，廣泛的肺微血管內皮損傷、微血栓形成等病理改變，從而造成急性、進行性、缺氧性呼吸功能障礙，進一步發(fā)展可導致ARDS的發(fā)生，其發(fā)展迅速，且死亡率極高，但目前對于其中的機制尚未完全闡明。研究表明，除創(chuàng)傷直接損傷因素外，創(chuàng)傷后炎癥因子大量釋放入血導致失控性炎癥反應的發(fā)生亦為ALI發(fā)生的一個重要原因之一。

HMGB1是一種含量豐富、存在于細胞核內的非組蛋白，其在細胞核內與DNA緊密結合，具有調控DNA穩(wěn)定、復制、轉錄以及翻譯等功能。研究發(fā)現，核內HMGB1可通過單核/巨噬細胞等免疫炎癥細胞主動分泌和壞死或受損細胞被動釋放等方式分泌至細胞外，且其具有多種胞外作用如促進細胞分化、觸發(fā)與調節(jié)炎癥、組織損傷以及免疫調控作用等[4]。Wang[5]等利用內毒素體外刺激巨噬細胞發(fā)現HMGB1與腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF）、白細胞介素-1（interleukin-1， IL-1）等早期炎癥因子相比較，具有釋放延遲、作用時間長等特點，而且針對HMGB1進行干預可有效降低膿毒癥大鼠晚期死亡率，即使在膿毒癥發(fā)生后延遲給藥亦是如此[6]，因而被稱之為“晚期炎癥介質”。另有研究顯示，嚴重創(chuàng)傷患者外周血中HMGB1早期即開始升高，且其升高水平與創(chuàng)傷嚴重程度正相關。Cohen[7]等證實嚴重外傷患者外周血HMGB1水平早期（30 min）就開始明顯升高，且與損傷的嚴重程度、組織低灌注、凝血功能紊亂和纖溶亢進、補體系統(tǒng)的活化、ARDS的發(fā)生相關。歐陽軍[8]等收集臨床創(chuàng)傷性ALI患者后，檢測其血清HMGB1水平，發(fā)現ALI患者血清HMGB1明顯升高，與并發(fā)MODS密切相關。我們的研究也證實創(chuàng)傷性ALI發(fā)生后24 h內，血清HMGB1開始顯著升高，提示有效降低創(chuàng)傷患者外周血HMGB1水平可能為一種創(chuàng)傷性ALI的有效治療手段。

血必凈注射液是一種主要成分為紅花、川芎、赤芍、丹參、當歸等活血化瘀藥物組成的中草藥提取制劑。大量的基礎研究和臨床實踐證實，血必凈具有拮抗內毒素、下調炎癥因子、調節(jié)免疫、增加血小板和纖維蛋白原含量等作用，保護和修復機體應激狀態(tài)下受損的器官。資料顯示，膿毒癥大鼠給予小劑量血必凈治療可以降低病死率，而且血必凈可顯著降低膿毒癥大鼠組織TNF-α水平，有效防止膿毒癥的發(fā)展[9]。張旃[10]等證實血必凈可以有效緩解慢性阻塞性肺疾病急性加重期全身炎癥反應綜合癥患者的臨床癥狀，縮短住院時間，降低病死率。孫元瑩[11]等也發(fā)現血必凈能有效降低內毒素所致急性肺損傷大鼠TNF-α的表達，降低其病死率。刁云峰[12]等應用血必凈注射液治療重型顱腦損傷后肺部感染患者發(fā)現血必凈能夠降低患者血漿IL-6、TNF-α水平，提示血必凈能有效降低炎癥因子的分泌。我們在實驗中也發(fā)現血必凈治療7 d后能顯著降低創(chuàng)傷性ALI患者的外周血HMGB1水平，且較常規(guī)治療組更為明顯，而且亦能改善ALI患者的pH值和氧合指數，改善缺氧狀態(tài)。然而與既往研究不同，在我們的實驗中發(fā)現血必凈治療并未降低創(chuàng)傷性ALI患者的死亡率和ARDS發(fā)生率，具體原因尚不清楚，可能是與我們收集的樣本量偏少有關，在以后的研究中我們將采取加大樣本量等措施，進一步分析其中原因。

綜上所述，我們認為創(chuàng)傷性ALI患者早期血清HMGB1水平即開始升高，且血必凈能有效降低HMGB1水平，減輕炎癥反應程度，同時能改善通氣，緩解呼吸窘迫，有利于患者的恢復。

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（收稿日期：2013-05-22）