野生中華鱘卵孵化、苗種培育及自然繁殖的研究

摘要：在人工養(yǎng)殖條件下對撈取的6批野生中華鱘（Acipenser sinensis）卵進(jìn)行了孵化，并采用自制的小型苗種培育自循環(huán)系統(tǒng)對孵化的野生中華鱘苗種進(jìn)行了培育。結(jié)果表明，野生中華鱘卵的受精率和孵化率較低，受精率約為20%；平均孵化率約為15%；孵出的野生中華鱘苗優(yōu)質(zhì)率約為72%。

關(guān)鍵詞：中華鱘（Acipenser sinensis）；孵化；培育；自然繁殖

中圖分類號：S961.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）13-3099-03

中華鱘（Acipenser sinensis）是一種典型的溯河洄游產(chǎn)卵魚類，是中國珍稀特有魚類之一，被列為國家一級保護(hù)動物。近年來因過度捕撈、水體污染等一系列因素的影響，中華鱘野生資源數(shù)量日益減少[1]。1981年葛洲壩水利樞紐截流后，中華鱘產(chǎn)卵群體被阻隔在葛洲壩下游江段，在壩下宜昌江段形成了新的產(chǎn)卵場。自2003年以來，中華鱘的產(chǎn)卵量急劇下降。因此，監(jiān)測和研究野生中華鱘自然繁殖狀況，對掌握野生中華鱘群體波動狀態(tài)并采取有效的保護(hù)措施有重要的意義。

建立合理的中華鱘自然繁殖效果評價技術(shù)，可以有效掌握中華鱘的自然繁殖狀況，并為保護(hù)野生中華鱘提供依據(jù)，也是保護(hù)野生中華鱘的重要環(huán)節(jié)。為研究葛洲壩野生中華鱘自然繁殖效果，并對中華鱘自然繁殖效果進(jìn)行評價，本研究分析了自然繁殖時野生中華鱘的受精率，并在人工條件下對采集的野生中華鱘卵進(jìn)行了孵化和苗種培育，旨在評價野生中華鱘自然繁殖狀況，并建立評價野生中華鱘自然繁殖效果技術(shù)，為野生中華鱘的繁殖效果評價提供方法和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2011年11月22日至11月25日于葛洲壩撈取的6批野生中華鱘卵。

1.2 野生中華鱘卵的采集

采集中華鱘卵使用經(jīng)改造的弶網(wǎng)進(jìn)行。底層弶網(wǎng)網(wǎng)口呈規(guī)則的半圓形，網(wǎng)口直徑1.5 m，網(wǎng)口面積0.884 m2。網(wǎng)具分前后兩部分，前面網(wǎng)衣長7 m，網(wǎng)目20目，后面囊網(wǎng)長3 m，網(wǎng)目60目。底層弶網(wǎng)采樣時，網(wǎng)具由錨固定。底層弶網(wǎng)放網(wǎng)時，當(dāng)船行駛到采樣點，使船頭朝向上游，網(wǎng)錨拋下后使船緩慢下行，錨固定后放網(wǎng)，放網(wǎng)時微力拉緊網(wǎng)與浮筒間尼龍繩，使采樣網(wǎng)口與水面垂直下沉。收網(wǎng)時，待網(wǎng)口拉出水面后順網(wǎng)口拉起囊網(wǎng)，解開囊網(wǎng)尾部扎口，將收集的魚卵置于清潔水盆中，分揀并計數(shù)。

1.3 野生中華鱘卵的孵化

野生中華鱘卵運輸采用雙層塑料袋充氧的方法，塑料袋外加裝泡沫盒，以緩沖震動和隔熱。孵化采用的設(shè)備為“尤先科”孵化器，孵化前采用20 mg/L的高錳酸鉀溶液消毒孵化設(shè)備，消毒后清洗并運行孵化設(shè)備，待運行穩(wěn)定后，放入野生中華鱘卵進(jìn)行孵化。孵化水源為中華鱘研究所黃柏河基地井水，水溫變化范圍為16.4～20.5 ℃，孵化過程中監(jiān)測并記錄孵化水溫，及時調(diào)節(jié)供水量。在孵化過程中要及時剔出死卵、霉卵，防止水霉的孳生。統(tǒng)計并計算孵化過程中產(chǎn)生的受精率、孵化率和優(yōu)質(zhì)魚苗率。

受精率=原腸期魚卵數(shù)/樣品魚卵數(shù)×100%

孵化率=出苗數(shù)/放入孵化篩的魚卵數(shù)×100%

優(yōu)質(zhì)魚苗率=優(yōu)質(zhì)魚苗數(shù)/孵出魚苗數(shù)×100%

1.4 野生中華鱘苗的培育

1.4.1 野生中華鱘苗的培育設(shè)備 野生中華鱘苗培育設(shè)施為自制的小型苗種培育自循環(huán)系統(tǒng)。系統(tǒng)主要由養(yǎng)殖池和水處理系統(tǒng)兩部分構(gòu)成，養(yǎng)殖池為圓形塑料桶（d池底=70 cm，d池面=90 cm，h=80 cm）；水處理系統(tǒng)主要包括生物棉過濾、活性炭過濾、曝氣增氧、紫外燈消毒和毛刷過濾等流程；養(yǎng)殖水溫由室內(nèi)空調(diào)調(diào)控。培育設(shè)施工藝流程見圖1。

1.4.2 野生中華鱘苗的飼養(yǎng)管理 野生中華鱘苗培育用水為黃柏河基地井水，養(yǎng)殖池供水采用笛式供水管供水。利用自制的苗種培育自循環(huán)系統(tǒng)共培育野生中華鱘苗300尾，分別放入3個養(yǎng)殖池中，每池放養(yǎng)100尾。仔魚暫養(yǎng)階段約為12 d，主要調(diào)控養(yǎng)殖環(huán)境，定時監(jiān)測養(yǎng)殖水體的水質(zhì)指標(biāo)，使水溫維持在（18.5±0.2）℃，氨氮小于0.1 mg/L，亞硝酸鹽小于0.01 mg/L，垂直供水，不形成水流。仔魚暫養(yǎng)到約12日齡時，大多仔魚開始排出胎糞并開始攝食。采用水蚯蚓作為開口餌料，餌料用3～5 mg/L的土霉素或呋喃唑酮浸泡消毒，消毒后沖洗干凈，將水蚯蚓剁成1 mm左右的碎段投喂，水蚯蚓碎段長度隨魚苗口徑的增大而逐漸增加。開口時以魚苗體重的2%～3%投喂，每天投3次（9∶00；15∶00；21∶00）。將剁好的水蚯蚓用水混合后沿池壁周圍均勻潑灑。每天可根據(jù)魚苗吃食情況遞增。投喂前后30 min清除殘餌及糞便。

在利用苗種培育自循環(huán)系統(tǒng)養(yǎng)殖中華鱘的過程中，主要的日常管理內(nèi)容包括：確保系統(tǒng)正常運行；定時開啟紫外燈消毒水體；定時監(jiān)測水溫，防止水溫驟變；監(jiān)測養(yǎng)殖池水質(zhì)狀況，適時進(jìn)行補水或換水；及時清污，保持良好水質(zhì)；苗種培育早期，做好養(yǎng)殖池的供水量調(diào)節(jié)，防止水交換過大導(dǎo)致排污口吸苗或溢池，在仔魚培育后期，形成微流水。培育苗種所用器具每天進(jìn)行消毒，消毒后的器具要經(jīng)過清洗后用于苗種培育，認(rèn)真填寫?zhàn)B殖記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 野生中華鱘卵孵化結(jié)果

野生中華鱘卵孵化情況見表1。2011年11月22日至11月25日6批共撈取野生中華鱘卵8 565粒，其中死卵數(shù)為1 125粒。孵化野生中華鱘卵共7 440粒，霉卵數(shù)為6 295粒，出苗1 145尾，孵化率為15.39%，其中劣質(zhì)苗數(shù)為322尾，優(yōu)質(zhì)苗為823尾，優(yōu)質(zhì)率為71.88%。在原腸期對受精率進(jìn)行了統(tǒng)計，隨機(jī)抽取第一批魚卵20粒，鏡檢后有3粒魚卵發(fā)育至原腸晚期，1粒魚卵發(fā)育至原腸中期（由于野生中華鱘卵極其珍貴，其他幾批卵沒有鏡檢統(tǒng)計），估測此次繁殖的野生中華鱘卵受精率約為20%。

野生中華鱘卵孵化出苗后，在中華鱘研究所黃柏河基地水族箱中暫養(yǎng)5 d后，采用塑料袋充氧的方式運到中華鱘研究所三峽基地培育。

2.2 野生中華鱘苗培育結(jié)果

在野生中華鱘苗的培育過程中，出現(xiàn)了兩個死亡高峰期，第一個死亡高峰期出現(xiàn)在內(nèi)源性營養(yǎng)期，死亡量為24尾，在這個階段死亡的中華鱘苗經(jīng)過觀察和鏡檢主要有以下類型死亡：卵黃囊破裂死亡、畸形苗死亡和受傷死亡；第二個死亡高峰期出現(xiàn)在開口期，死亡量為150尾，在開口期培育階段死亡魚苗經(jīng)觀察和鏡檢主要有以下類型死亡：腸炎病造成的死亡、未攝食造成的死亡和畸形造成的死亡等。在開口期的死亡高峰期后，野生中華鱘苗趨于穩(wěn)定，在后期的養(yǎng)殖中沒有出現(xiàn)大量死苗，只有少量弱苗和畸形苗死亡（圖2）。在三峽基地共培育苗種300尾，苗種培育結(jié)束后，共存活野生中華鱘苗124尾，培育成活率為41.3%。

3 討論

3.1 野生中華鱘卵的受精率和孵化率

2011年采集到的野生中華鱘卵受精率和孵化率較低，且采集到的各批次野生中華鱘卵相差較大。劉鑒毅等[2]研究1998-2005年中華鱘人工繁殖的結(jié)果表明，人工繁殖的中華鱘卵的受精率為（63.7±11.2）%，孵化率為（48.1±17.5）%。郭柏福等[3]研究2000-2008年野生中華鱘人工催產(chǎn)、孵化的結(jié)果顯示，受精率和孵化率為（77.2±16.3）%和（70.8±17.7）%。2003年監(jiān)測到的中華鱘自然繁殖受精率僅為23.8%，已經(jīng)大大下降[4]。目前野生中華鱘在自然環(huán)境中的受精率和孵化率呈持續(xù)下降的趨勢，野生中華鱘生存前景堪憂。

影響魚類受精率的因素是多方面的，配子的質(zhì)量、最佳受精時間、環(huán)境因子等都是影響受精率的因子。研究資料顯示野生中華鱘精子的成活率為（55.8±17.8）%，精子渦旋運動時間為（32.8±12.6）s，精子壽命為（5.58±2.87）min[3]。表明野生中華鱘的受精時間和最佳受精時間較短，尤其是在野外的大水域中自然繁殖，野生中華鱘卵的受精率受到很大的影響。近年來野生中華鱘的精子質(zhì)量下降，參加繁殖的親魚繁殖力也呈下降趨勢[2]。近年監(jiān)測結(jié)果表明，中華鱘產(chǎn)卵群體性比已經(jīng)發(fā)生了顯著變化[4]，雄性比例在1993年之后逐年下降，1981-1992年性比平均值為1.42（♂∶♀），而1993-2001年平均為0.58（♂∶♀），雄性中華鱘親魚數(shù)量的減少，對于中華鱘魚卵受精率有很大的影響。此外，野生中華鱘產(chǎn)卵場水域的復(fù)雜性，如水溫、水流等環(huán)境因子也是制約野生中華鱘受精的重要因素。本研究中各批次撈回的野生中華鱘卵的孵化率差異較大，在人工條件下總體孵化率僅為15.39%。在自然環(huán)境中野生中華鱘卵受到的影響因素較人工孵化環(huán)境多，如水溫、水質(zhì)、水流、光照等環(huán)境的突變和食卵魚的威脅[5]。

3.2 影響苗種成活率的主要因素

在野生中華鱘苗種的培育過程中，出現(xiàn)了兩個死亡高峰期。第一個死亡高峰期發(fā)生在內(nèi)源性營養(yǎng)期，在這個階段死亡的中華鱘魚苗主要為：卵黃囊破裂死亡、畸形苗死亡和受傷死亡。第二個死亡高峰期發(fā)生在中華鱘苗種開口期，在這個階段出現(xiàn)死亡高峰可能是由于魚病、饑餓、畸形等因素造成的。制約中華鱘苗種培育成活率的因素較多，如水溫、溶氧和氨氮含量等因素，有研究表明在人工養(yǎng)殖條件下，中華鱘苗種最適宜的生活水溫范圍為18～22 ℃，當(dāng)水溫的日變化幅度超過3 ℃時，對中華鱘苗種的成活率有災(zāi)難性的影響[7]。肖慧等[6]研究表明中華鱘仔魚在開口攝食階段是中華鱘仔魚由內(nèi)源性營養(yǎng)向外源性營養(yǎng)過渡的“敏感時期”，在這個時期魚苗抗病力較差，極易感染魚病導(dǎo)致驟然大批死亡。莊平等[8]報道當(dāng)中華鱘魚苗在一定時間內(nèi)未攝食，即達(dá)到饑餓不可逆點（PNR）時也會造成死亡。在本次野生中華鱘苗的培育中，也再次表明仔魚開口期是中華鱘苗抵抗力差，極易造成大批死亡的時期，是中華鱘苗培育關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，也是影響苗種成活率的重要環(huán)節(jié)之一。

4 小結(jié)

野生中華鱘的繁殖效果直接影響自然環(huán)境中天然中華鱘種群的數(shù)量和質(zhì)量，對中華鱘自然繁殖效果的正確評價可以有效表明野生中華鱘的自然繁殖狀況，以及天然種群受到的影響。通過這些內(nèi)容的評價，可以了解野生中華鱘種群的情況，為合理保護(hù)野生中華鱘種群提供參考依據(jù)。所以，形成完整的野生中華鱘自然繁殖評價體系對中華鱘物種的保護(hù)有重要的意義。本研究以評價中華鱘天然種群的繁殖效果為目的，為中華鱘天然種群資源的繁殖評價提供了新的方法和參考。

中華鱘仔、幼魚的成活率是影響中華鱘增殖和物種保護(hù)的重要因素。因此，中華鱘苗種培育工作至關(guān)重要。在中華鱘仔魚暫養(yǎng)期和開口攝食期，仔魚抗病力弱，耐受力差，尤其是開口攝食初期、自平游轉(zhuǎn)入底棲生活的敏感期極易出現(xiàn)驟然大批死亡，這個時期魚苗對水質(zhì)、水溫、溶氧等要求較高。這就要求苗種培育工作要更為精細(xì)，才能有效提高中華鱘苗種的成活率。在今后的中華鱘苗種培育中，建議對苗種的生活環(huán)境、開口餌料、馴食、防病等工作進(jìn)行精細(xì)的管理和操作，以提高中華鱘的苗種成活率。

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